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精选优质文档-倾情为你奉上1 包涵体洗涤试剂1.1 裂解液50mmol/L TrisCl(pH7.2),10mmol/L EDTA,300mmol/L NaCl.。1.2 Buffer I20mmol/L Tris-HCl,5mmol/L EDTA,100mM NaCl。1.3 2M/4M/8M 尿素溶液分别称取2mol/4mol/8mol的尿素,用Buffer I定容至1L即可。2 工程菌的大量表达从平板上挑生长饱满的单克隆菌落接种于25ml LB(含抗生素),37振荡培养过夜。将培养菌液按1:1000扩种,至装有500ml LB(含抗生素)的1000ml三角培养瓶中,培养的瓶数根据需要而定。37振荡培养,至OD600nm 1.0左右。使菌液冷却,加IPTG至终浓度为0.2mmol/L,25,诱导6hr。收集菌体,4,10,000g离心4min。以培养液体积的1/50量的裂解液悬浮。冰浴,用超声破碎仪或高压均质机破碎菌体。超声条件为:输出功率70%,作用2sec、间歇4sec为一个脉冲,共作用时间累计30min/100ml裂解
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