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琼脂糖凝胶电泳操作标准流程(共5页).docx

精选优质文档-倾情为你奉上琼脂糖凝胶电泳操作标准流程1、 实验目的:琼脂糖凝胶电泳是常用的检测核酸的方法,具有操作方便、经济快速等优点。DNA琼脂糖凝胶电泳的使用技术仅代表具备操作琼脂糖电泳的能力。2、 实验原理:琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA分子混合物的方法,这种电泳方法以琼脂凝胶作为支持物,利用DNA分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应,达到分离混合物的目的。DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电,在电场中向阳极移动。在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应,即分子本身的大小和构型是主要的影响因素。DNA分子的迁移速度与其相对分子量成反比。不同构型的DNA分子的迁移速度不同。如环形DNA分子样品,其中有三种构型的分子:共价闭合环状的超螺旋分子(cccDNA)、开环分子(ocDNA)、和线形DNA分子(IDNA)。这三种不同构型分子进行电泳时的迁移速度大小顺序为:cccDNAIDNAocDNA。影响核酸分子泳动率的因素主要还是:1、DNA分子大小;2、琼脂糖浓度;3、DNA构想;4、所用的电压;5、琼脂糖种类;6、

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