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考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度(共4页).docx

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考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度(共4页).docx

精选优质文档-倾情为你奉上实验报告学院：第二临床医学院专业：临床医学年级：2013级班级：1班姓名：学号：日期：2014,3,8 得分：实验课程：生物化学实验实验名称：蛋白质的定量测定（五）考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度【实验目的】掌握考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量的原理和方法。【实验原理】考马斯亮蓝G-250（Coomassie G-250）是一种甲基取代的三苯基甲烷，分子中磺酸基的蓝色染料，在465nm处有最大吸收值。考马斯亮蓝G-250能与蛋白质通过范得华相互作用形成蛋白质考马斯亮蓝复合物蓝色溶液，引起该染料的最大吸收max的位置发生红移，在595nm处有最大吸收值。由于蛋白质考马斯亮蓝复合物在595n处的光吸收远高于考马斯亮蓝在465nm处的光吸收，因此可大大地提高蛋白质的测定灵敏度。蛋白质考马斯亮蓝复合物溶液颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。利用溶液颜色的差异进行比色测定，适合于蛋白质类的定量分析尤其适合于稀有蛋白质的微量分析。考马斯亮蓝G-250试剂呈