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PCR原理技术与应用(附教学用)ppt课件.ppt

PCR原理技术与应用 PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应,是指在DNA聚合酶催化下,以母链DNA为模板,以特定引物为延伸起点,通过变性、退火、延伸等步骤,体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。 是一项DNA体外合成放大技术,能快速特异地在体外扩增任何目的DNA。可用于基因分离克隆,序列分析,基因表达调控,基因多态性研究等许多方面。 PCR技术的基本原理一.PCR反应成分:1.模板DNA;2.引物;3.四种脱氧核糖核苷酸;4.DNA聚合酶;5.反应缓冲液、Mg2 等。二.PCR反应基本步骤:1.变性:高温使双链DNA解离形成单链(94 ,30s)。2.退火:低温下,引物与模板DNA互补区结合(55 ,30s)。3.延伸:中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应(7072 ,3060s) 1.变性(denaturation):通过加热使模板DNA的双链之间的氢键断裂,双链分开而成单链的过程。 2.退火(annealling):当温度降低时,引物与模板DNA中互补区域结合成杂交分子。 3.延伸(extension):在D

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