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获得目的基因的方法(共2页).docx

精选优质文档-倾情为你奉上获得目的基因的方法常用的方法有PCR法、化学合成法、cDNA法及建立基因文库的方法来筛选一、直接获取 1、从基因文库中获取就是从现成的基因储存在受体菌上提取出来(基因组文库法就是原教材中的用限制性内切酶直接获取。利用噬菌体载体构建基因组文库的一般操作程序如下: 选用特定限制性内切酶, DNA进行部分酶解,得到DNA限制性片段 选用适当的限制性内切酶酶解噬菌体载体DNA。 经适当处理,将基因组DNA限制性片段与噬菌体载体进行体外重组。 利用体外包装系统将重组体包装成完整的颗粒。 以重组噬菌体颗粒侵染大肠杆菌,形成大量噬菌斑,从而形成含有整个DNA的重组DNA群体,即文库。)2、cDNA文库法即逆转录法。cDNA文库,是指汇集以某生物成熟mRNA为模板逆转录而成的cDNA序列的重组DNA群体。虽然可用基因组文库法来获取真核生物的目的基因,但是由于高等真核生物基因组DNA文库比其cDNA文库大得多,相关工作量同样大得多。更为重要的是,在真核生物基因组中合有大量的间隔序列或内含子,但在大肠杆菌等原核生物中没有类似序列

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