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核酸等温扩增-杨银辉ppt课件.ppt

核酸等温扩增技术在病毒检测中的应用军事医学科学院微生物流行病研究所杨银辉核酸等温扩增技术核酸等温扩增的优势核酸等温扩增的种类环介导核酸等温扩增技术(LAMP)LAMP引物设计原则LAMP扩增引物设计LAMP扩增过程环引物在茎环结构环状结构处识别并不断延伸,使双链过早打开,有利于复杂茎环结构的成环和外引物置换作用。这一定程度上加速了整个 LAMP 扩增循环阶段的反应。LAMP的操作过程检测方法LAMP技术在病原体检测中的应用LAMP技术小结LAMP技术的优点存在缺陷 所识别的靶位序列长度不得过大,一般在300 bp 以内。因此,无法进行长片段 DNA 的扩增; LAMP 技术具备高灵敏度,对操作要求严格分区,否则极易受到污染而产生假阳性结果; LAMP 的反应结果只有两种即扩增与不扩增,故在产生非特异性扩增时是难以进行后续鉴定的; 产物相当复杂,无法进行后续的回收、鉴定、克隆等基因工程操作。NASBA的优缺点 NASBA是种RNA扩增法,因此其主要应用是对RNA病毒的检测。 整个反应能在42 条件下进行,经过两个小时的扩增可将模板RNA放大至1091010倍。 灵敏度高、特异性强、保真度

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