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液相色谱的分离机理及色谱柱选HPLC参数时的基本考虑n 溶解度 - 选择流动相的条件n 分子量 - 在样品预处理或GPC分析时有用n 样品的基质 - 考虑如何前处理n 在基质中样品的含量 n 检测特性 - 有否紫外吸收? 荧光?n 找出样品中不同组份之间的差异n 摸索条件的重要线索极性问题液相色谱的分离机理n 正相n 反相n 体积排除n 离子交换n 其他n不同的分离模式是不同的机理吸附色谱的分离机理 随着样品在固定相上的吸附能力由大到小 在色谱柱上的保留由长到短 吸附色谱概述n 分离基于样品的极性差异。n 洗脱次序一般为正相,即:极性低的先被洗脱n 常用的流动相n 非极性有机溶剂,如己烷n 乙酸等为添加剂n 常用固定相n 硅胶、氧化铝等。分配色谱的分离机理分配色谱概述n 反相色谱的主要类型,基于分子的极性分离n 洗脱次序:一般为反相,即极性高的先被洗脱n 常用的流动相:n 有机溶剂如甲醇、乙腈,水n 应用添加剂,成为离子对、离子抑制方法n 常用固定相:n 碳十八、碳八、胺基等基团n 反相色谱固定相多为键合相?键合相色谱柱n 以硅胶为基质,通过化学键合方式把碳十八、碳八、胺基等基团联在基
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