1、 鸡分泌型免疫球蛋白 A（sIgA）注意事项ELISA 试验时，注意事项如下：1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或 BSA 等封闭。2. 在 ELISA 中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:(1)固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40 孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其
2、吸附性能是否良好。(2)包被抗体(或抗原) 的选择：将抗体( 或抗原 )吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求 PH 在9.09.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用 41824小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10gml 等)进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的 OD 值。选择 OD 值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为110g ml。(3)酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接 ELISA 法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份 )。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品
3、及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。(4)酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体(如 OPD 等)有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如 TMB 和ABTS 是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是 H2O2在临用前加入样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心
4、。2.血浆：应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分) 。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。科研 ELISA 检测试剂盒.提供实验代测服务.您只需将需要检测的种属(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Monkey,Pig)和检测指标(介素类、因子类)及标本数量(48T/96T)通知公司业务员即可。在接到客户标本当日起，现货产品一周内将检测报告交到客户手中！
