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第二章 基因工程的载体和工具酶第一节载体引 言基因克隆的本质是使目的基因在特定的条件下得到扩增和表达，而目的基因本身无法进行复制和表达、不易进入受体细胞、不能稳定维持，所以就必须借助于“载体”及其“寄主细胞”来实现。作为基因克隆的载体必须具备以下特性：载体必须是复制子。具有合适的筛选标记，便于重组子的筛选。具备多克隆位点（MCS），便于外源基因插入。自身分子量较小，拷贝数高。在宿主细胞内稳定性高。一、质粒载体（plasimidvectors）（一）质粒载体的生物学特性（二）质粒载体的制备（三）质粒载体的改造（一）质粒的生物学特性（1）质粒是独立于染色体以外的能自主复制的裸露的双链环状(少数为线形和RNA） DNA分子。广泛从在于细菌细胞中，比病毒更简单。在霉菌、蓝藻、酵母和一些动植物细胞中也发现了质粒，目前对细菌的质粒研究得比较深入，特别是大肠杆菌的质粒。大肠杆菌的质粒主要有F质粒（F因子）、R质粒（抗药性因子）和Col质粒（大肠杆菌素因子）三种。（一）质粒的生物学特性（2）质粒的大小差异很大，最小的只有1kb,只能编码中等大小的2-3种蛋白质分子，最大的达到200kb。（3）质粒的生
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