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精选优质文档-倾情为你奉上总RNA提取的原理、步骤1.原理及方法（异硫氰酸胍-酚-氯仿 一步法） TRIZOL试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚，其中异硫氰酸胍可裂解细胞，促使核蛋白体的解离，使RNA与蛋白质分离，并将RNA释放到溶液中。当加入氯仿时，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA进入水相，离心后可形成水相层和有机层，这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层（无色）主要为RNA，有机层（黄色）主要为DNA和蛋白质。2.简易步骤细胞或组织，加入0.4ml TRIZOL试剂后匀浆室温静置5分钟加入1/5 TRIZOL试剂体积量的氯仿，剧烈震荡混匀室温静置5分钟，12000g 4离心l5分钟将上清液转移至新的离心管中，加入与上清液等体积的异丙醇，颠倒混匀室温静置10分钟，12000g 4离心l0分钟，弃上清向沉淀中加入1ml的75%乙醇清洗沉淀，12000g 4离心5分钟弃上清保留沉淀，干燥沉淀物溶解于11l的DEPC处理水中
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