1、山东大学 2005 年细胞生物学考研题1、名词解释1、嵌合体答:有两个或多个具有不同基因型的胚胎和细胞合并在一起发育成一个完整的个体,称之为嵌合体。2、胞质凝胶层答:紧贴细胞膜下方有一层特殊细胞质,含有大量微丝和微管结合蛋白,形成凝胶状的三维网络结构,称为胞质凝胶层或者细胞皮层。3、细胞皮质答:细胞皮质是质膜内面的一层特化的细胞质。细胞皮质富含微丝及相关蛋白形成凝胶状的网络结构。细胞皮质跟细胞运动如胞质流动、阿米巴运动有关。4、第二信使答:受细胞外信号作用,在细胞质溶质内形成或向细胞质溶质释放的细胞内小分子,负责将信号传到细胞内部,如 cAMP、IP 3、Ca 2+等。5、共翻译转移答:蛋白质
2、合成在游离核糖体上起始后由信号肽引导转移至糙面内质网,然后新生肽边合成边转入糙面内质网中,在糙面内质网和高尔基体中经加工包装转移至指定位置。共翻译转移是蛋白质分选的一种机制。另外一种机制是翻译后转运途径,蛋白质完全合成之后由导肽引导至靶位。6、F 0-F1 偶联因子答:ATP 合酶包括两个基本组分,它们是球状的 F1 头 部和嵌于内膜的 F0 基部。F1 是水溶性的蛋白复合物,由 5 种类型的 9 个亚基组成,其组分是 33。F 0 是嵌合在内膜的疏水性蛋白复合体,由 a、b、c 三种亚基按照 a2b2c10-12 的比例组成一个跨膜质子通道。F 0-F1 偶联因子的作用是将氧化磷酸化过程中形
3、成质子电化学梯度转化为 ATP。7、分子伴侣答:在蛋白质折叠和组装过程中能够防止多肽链的错误折叠和聚集作用,并可破坏多肽链中已形成的错误结构,但其本身并不发生变化,这类蛋白称为分子伴侣。8、协调运输答:一种物质的逆浓度梯度跨膜运输依赖于另一种物质的顺浓度梯度的跨膜运输,协同不直接消耗能量但是需要间接消耗能量。9、恒定性分泌答:新的译法为组成型分泌,指细胞中分泌物形成后,随即被排出细胞。与之相对的是调节型分泌,指分泌物形成后储存在分泌泡中,当细胞受到胞外信号的刺激时,分泌泡和质膜融合并将内含物释放出去。10、基因打靶答:通过同源重组将外源突变基因取代染色体上特定的正常基因。二、问答题1、简述多细
4、胞有机体中细胞的社会性。答:多细胞生物中,通过细胞通讯、细胞连接以及细胞和胞外基质的相互作用,细胞和细胞之间建立联系,形成和谐的细胞社会。细胞连接是指在细胞质膜的特化区域,通过膜蛋白、细胞骨架或者胞外基质形成的细胞与细胞之间、细胞与胞外基质的连接结构,包括封闭连接、锚定连接和通讯连接。是相邻细胞之间协同作用的重要组织方式。细胞连接不仅起着从结构上把细胞绑在一起的作用,还承担着细胞与细胞之间、细胞与胞外基质之间的物质交换和信息交流的功能。细胞通讯是指一个细胞发出的信息通过配体传递到另一个细胞并与靶细胞相应的受体相互作用,然后通过细胞信号转导产生保内一系列生理生化反应,最终表现为细胞整体的生物学效
5、应的过程。总而言之,多细胞生物中,细胞与细胞以及细胞与胞外基质之间通过细胞通讯和细胞连接等方式将整个多细胞生物联系成为一个有机整体,协调细胞之间的功能,控制细胞的生长和分裂、调控组织形成和形态建成等等。多细胞有机体中细胞存在着密切的联系,是一个和谐的细胞社会群体。2、有丝分裂可分为哪几个时期,各有什么特点?答:根据一些形态学上得变化,有丝分裂可以分为前期、前中期、中期、后期和末期五个时期。(1)前期:染色质浓缩为染色体,两个姐妹染色单体靠着丝粒相连,核仁消失,核膜破裂,形成有丝分裂器。(2)前中期:纺锤体与染色体结合,动力微管形成,染色体向赤道面集中。(3)中期:染色体整齐排列在赤道面上。(4
6、)后期:姐妹染色单体分离,各移向一极。(5)末期:染色体到达两极,核膜重建,核仁重现,染色体松散成染色质。核分裂末期,细胞分离也开始,细胞从中间溢断,由一个母细胞变成两个子细胞。3、简述核糖体的形态结构、化学组成及可能功能。答:核糖体是一种不规则的颗粒状结构,没有生物膜的包裹,其直径约为 25-30nm,主要成分是 RNA 与蛋白质。核糖体 RNA(rRNA)约占 2/3,蛋白质( r 蛋白质)约占 1/3。r蛋白质主要分布在核糖体的表面而 rRNA 在内部,二者通过非共价键结合在一起。核糖体有大小两个亚基,原核生物核糖体(70S)是 50S 和 30S 两个亚基,真核生物核糖体(80S)是
7、60S 和 40S 两个亚基。大亚单位略呈半圆形,在一侧伸出三个突起,中央为一凹陷;小亚单位呈长方形,在约 1/3 长度处有一细的缢痕,将小亚单位分为大小两个区域。当大小单位结合在一起成核糖体时,其凹陷部分彼此对应,从而形成隧道,为蛋白质翻译时 mRNA 的穿行道路。此外,在大亚单位中还有一垂直于该隧道的通道,在蛋白质合成时,新合成的肽链由此通道穿过,可保护新生肽链免受蛋白水解酶的降解。核糖体是蛋白质翻译的场所,每个核糖体有供 tRNA 分子结合的 3 个位点,分别是 A 位点、P 位点和 E 位点,这些位点横跨核糖体大小亚基的结合面,这个结合面也是 mRNA 和 tRNA 的结合处,没有r
8、蛋白质分布。催化肽键形成和活性位点由 rRNA 组成。4、核仁超微结构包括哪几部分?答:电镜下核仁的超微结构与细胞质中的大多数细胞器不同,它没有被膜包裹。核仁的大小、形态和超微结构随细胞类型和细胞代谢状态不同而变化,但是核仁一般都具有三种基本的超微结构:纤维中心、致密纤维组分、颗粒组分。纤维中心是包埋在颗粒组分内部一个或几个浅染的低电子密度的圆形结构。致密纤维组分是核仁超微结构中电子密度最高的部分,呈环形或半月形包围纤维中心,有致密纤维组成,通常看不见颗粒。颗粒组分是核仁的主要结构,由核糖体蛋白颗粒(RNP)构成,这些颗粒是正在加工、成熟的核糖体亚单位前体颗粒,间期核仁的大小差异主要是由颗粒组
9、分数量的差异造成的。5、简述非肌肉细胞中的微丝结合蛋白的类型和作用。答:非肌肉细胞中存在肌肉细胞中也存在的微丝结合蛋白,如肌球蛋白、原肌球蛋白等,但是不含肌钙蛋白。微丝结合单边的主要类型有:(1)成核蛋白:在微丝开始组装时起成核作用。(2)成束蛋白:横向连接相邻的微丝成为微丝束。(3)封端蛋白:结合于纤维一端,阻止肌动蛋白单体的增加或减少。(4)纤维-解聚蛋白:与肌动蛋白单体或肌动蛋白结合,促使肌动蛋白丝的解聚。(5)网络-形成蛋白:横向连接相邻微丝,形成三维网络结构。(6)膜结合蛋白:在细胞连接和细胞黏着部位,通过 -辅肌动蛋白介导微丝与细胞质膜结合。6、溶酶体的功能,溶酶体的功能,溶酶体的
10、合成及分选机制。答:溶酶体的功能包括:细胞内消化; 防御功能; 细胞内衰老和多余细胞器的清除; 发育过程中清除细胞的功能; 受精中的功能; 植物种子萌发中的功能等。溶酶体发生机制简述为:溶酶体酶靠其 N 端信号肽引导到糙面内质网上进行蛋白质的合成和糖基化,再运到高尔基复合体上进行加工修饰后由单个膜囊以出芽的方式形成。其具体分子机制是:溶酶体酶在糙面内质网上合成并经过糖基化修饰以后,被转移至高尔基复合体。溶酶体酶分子上具有信号斑,高尔基复合体顺面膜囊中的磷酸转移酶识别信号斑,对寡糖链上得甘露糖残基进行磷酸化修饰形成 M6P。在高尔基复合体的反面膜囊和管网膜上存在 M6P 受体,对 M6P 具有高
11、度特异性,靠 M6P 受体与 M6P 的特异性结合便可把溶酶体酶从其它蛋白质中分拣出来,进行浓缩,最后以出芽的方式被包装成衣被小泡,直接转运到溶酶体中。在溶酶体的酸性环境下,M6P 的受体便于 M6P 分离,又重新回到高尔基复合体反面,再去参与其它溶酶体酶的分拣及溶酶体的形成。7、说明细胞培养的基本原理和方法。如何进行小白鼠脾细胞原代培养?如何判断死活细胞的比率?答:细胞培养是将从机体中取出的细胞,置于一定的生长基质之中,并给以恒定的培养环境,使这些细胞在体外继续生长和分裂的技术。细胞培养技术大致可分为两种:一种是群体培养,将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶中,让细胞贴壁生长,汇合后形成均与的
12、单细胞层,另外一种是克隆培养,将高度稀释的游离细胞悬液加入培养瓶中,各个细胞贴壁后,彼此距离较远,经过生长增殖每一个细胞形成一个细胞集落,此种集落成为一个克隆。培养小鼠脾细胞:首先从健康小鼠体内取出脾细胞,剪碎,用浓度和活性适中的胰酶和胶原酶与 EDTA 等将细胞连接处消化分散,给予良好的培养液与无菌培养环境(接近体温与体内 PH) ,在培养瓶中进行静止或慢速转动培养。培养液中加一定量的小牛或胚牛血清,这样才有利于细胞的贴壁生长和分裂。判断死活细胞比率的方法哟:染色法和流式细胞仪分析法。3、综述题1、细胞外基质成分各结构特点,与质膜连接结构、特点。答:细胞外基质成分有:(1)胶原。胶原是细胞外
13、基质中最重要的水不溶性纤维蛋白。胶原分子首尾相连成线,并列成束组成胶原原纤维。胶原原纤维平行排列组成胶原纤维。胶原是细胞外基质的骨架结构,赋予细胞外基质刚性和抗张性。(2)弹性蛋白。弹性蛋白是弹性纤维的主要成分,赋予组织弹性。弹性蛋白有两个重要特征,一是构想呈无规则卷曲状态,二是通过赖氨酸残基互相交联成网状。(3)糖胺聚糖和蛋白聚糖。糖胺聚糖是由氨基酸和糖醛酸组成的二糖单元重复连接而成,多糖链呈充分展开构象。糖胺聚糖填充了胞外基质的大部分空间,为组织提供了机械支撑作用;蛋白聚糖是由糖胺聚糖与蛋白质共价结合而成。在软骨中,大量蛋白聚糖借助连接蛋白以非共价键与透明质酸结合形成很大的复合体,赋予软骨
14、凝胶样特征和抗形变能力。蛋白聚糖能与 FGF、TGF- 等生长因子结合有利于激素分子与细胞表面受体结合完成细胞信号传导。纤连蛋白和成连蛋白。纤连蛋白是由两个亚基组成的二聚体,在靠近羧基端有一对二硫键将两个亚基连在一起,使两个亚基呈 V 字形。纤连蛋白的细胞表面受体是整连蛋白家族成员,因此纤连蛋白有介导细胞黏着的功能,就像一座桥,把细胞锚定在比胞外基质上。成粘连蛋白是由 3 条长肽链组成的大复合物,肽链通过二硫键连在一起。整个分子呈十字架形,分子具柔性,可折曲。粘连蛋白也是分子桥,将细胞锚定在基膜上。山东大学 2006 年细胞生物学考研题1、名词解释1、核仁组织区答:核仁组织区(NOR)是细胞核
15、内特定染色体的次缢痕处,含有 rRNA 基因(5S rRNA基因除外)的一段染色体区域,与核仁的形成有关。2、基粒类囊体答:类囊体是沿叶绿体的长轴平行的由膜围成的圆盘状扁囊。在一定部位许多圆盘状的类囊体成摞存在构成基粒,形成基粒的类囊体称为类囊体,又叫基粒片层。3、核孔复合体答:细胞核具有两层平行但是不连续的核膜,内外核膜在一定部位相互融合,形成一些环形开口,在核被膜上规则排列成核孔。核孔是由多种蛋白质分子构成的复杂结构,故称为核孔复合体,是胞质和核质之间运输物质的通道。4、细胞融合答:两个或多个细胞融合成一个双核或多核细胞的现象称为细胞融合。动物细胞融合一般要用灭活的病毒(如仙台病毒)或化学
16、物质(如 PEG)介导;植物细胞融合时,首先用纤维素酶去掉纤维素壁。细胞融合技术是单克隆制备等地基础。5、原位杂交答:根据分子杂交技术原理,在不破坏细胞或细胞器的情况下,用核酸探针测定特定核苷酸序列在染色体上的精确位置的技术。原位杂交技术的优点在于不破坏细胞结构,因此能够显示生理条件下的染色体状态。6、离子泵答:存在于膜上协助离子进行主动运输的跨膜蛋白,具有 ATP 酶活性。通过消耗 ATP 能量逆电化学梯度特异地转运离子。7、过氧化物酶体答:过氧化物酶体又称微体,是细胞质中单层膜围成的内部主要含氧化物酶和过氧化氢酶的细胞器。过氧化物酶体与糖异生、分解代谢、过氧化氢分解有关。8、间隙连接答:间
17、隙连接的基本结构单位是连接子。每个连接子由 6 个相同或相似的跨膜连接蛋白呈环状排列,中央形成一个直径约 1.5nm 的亲水性通道。相邻细胞质膜上得两个连接子对接便形成完整的间隙连接结构。间隙连接可以介导细胞之间的物质交换,更重要的是间隙连接在神经冲动传导中发挥作用。电化学突触就是细胞与细胞之间形成间隙连接进而传递神经冲动。9、成帽反应答:用标记有荧光的多价抗体,同淋巴细胞的表面抗原相互作用。在开始结合时,抗体在细胞表面均匀分布。几分钟之后,抗原-抗体结合物变为簇集分布,随后又集中成斑。最后,结合物全部集中到细胞的尾端表面,形成一帽状结构,这步变化称为成帽反应。其原因是多价体抗体交联了相邻的膜
18、蛋白分子,从而聚集到一端。这个实验充分证明了细胞膜的流动性。10、SRP答:signal recognition particle,信号识别颗粒。SRP 存在于真核生物细胞质中,由 300 个核苷酸组成的 7S RNA 和六中蛋白结合组成复合体。SRP 一般游离在细胞质中,当新合成多肽的信号肽从多聚糖上延伸暴露出来,SRP 便于其结合。 SRP 还能与内质网停泊蛋白 SRP受体结合,从而将新生肽和核糖体带到内质网上。SRP 上有三个结合点:信号肽识别结合位点,SRP 受体蛋白结合位点,翻译暂停结构域。11、受体答:可同专一信号分子结合启动细胞内反应的蛋白质,多数受体蛋白为跨膜蛋白,也有一些分布
19、在细胞质和细胞核内。12、联会复合体答:减数分裂 I 的偶线期中已联合的一对同源染色体间形成的复合结构。联会复合体被认为与同源染色体联会和基因重组有关。13、原癌基因答:机体内具有引起细胞癌变潜能的基因称为原癌基因。14、极质答:一些生物卵细胞中所含的一些特殊的蛋白质和 RNA 性质的细胞质因子,它们不是均一地分布在卵细胞中而是存在极性(比如在果蝇卵细胞的后端) ,它们能够决定生殖细胞的分化,这部分细胞质成分称为极质,又叫生殖质。15、再生答:生物成体丢失的组织或器官重新生长和修复的过程称为再生。再生现象从一个侧面反映了细胞的全能性,越高等动物和年龄越大个体,其再生能力越弱。2、填空题1、细胞
20、学说创始人是 施旺 和 施莱登 。2、体外培养动物细胞生长特点是 单层贴壁生长 和 接触抑制 。3、肌球蛋白有两个酶功能位点,肌球蛋白可被 胰蛋白酶 水解为头部和尾部重轻链两断。头部重断又可被 木瓜蛋白酶 水解为两段。4、动物细胞离体培养方式主要有 3 种 群体培养 、 克隆培养 、转鼓培养。5、异染色体常存在于 着丝粒区 、 端粒 和 核仁组织区 附近。6、叶绿体基粒类囊体游离面有两种颗粒,一种大颗粒为 光系统 II ,另一小颗粒为 光系统 I 。该两种中 光系统 I 存在其表面上。7、骨骼肌中细肌丝纤维组成包括 肌动蛋白 、 原肌动蛋白 、 肌钙蛋白 、其他结合蛋白。8、核膜上孔膜的特征性
21、蛋白为一种跨膜糖蛋白 gp210 核纤层通过 核纤层蛋白 B 与核膜相连。9、光面内质网功能主要包括 合成脂类 、 解毒作用 和 糖原代谢 。而粗面内质网最主要的功能是 蛋白质加工和修饰 。10、整联蛋白质膜外可与 细胞外基质结合 ,胞内可与 细胞骨架 结合,从而使细胞锚定在基膜上。在转化的细胞中,细胞容易转移扩散与细胞中基质 纤连蛋白 和 钙粘蛋白 变化有关。11、通常内体与内吞体结合,在内体 酸性环境 作用下,内吞体中 配体 和 受体 分离内体膜形成的膜泡所携带的物质最终与溶酶体结合。12、信号假说创始人 Blobel 以实验证明在内质网膜上存在允许肽链通过的蛋白质通道直径 2nm 左右。
22、所以蛋白质跨膜必须以 膜泡运输 方式通过。13、膜脂主要运动方式包括 旋转异构 、 左右摆动 、 旋转运动 、 侧向扩散 、翻转运动。14、目前认为第二信使主要有 cAMP 、 Ca2+ 、 IP3 等。15、动物细胞有丝分裂器包括 中心体 和 纺锤体 。16、细胞同步化方法大致分三类 DNA 合成阻断法 、 分裂中期阻断法 、 利用条件依赖性突变株法 。17、酶关联受体都是扩膜蛋白质,其在细胞外表面具有 配体结合区 而在细胞质溶质或本身内有 酶活性 。18、程序性细胞死亡可分为 4 个阶段 凋亡起始 、 凋亡小体 和 凋亡小体逐渐为临近细胞吞噬和消亡 、 细胞死亡 。19、癌细胞形态改变主要
23、表现有以下几个方面 细胞外形改变 、 细胞骨架结构紊乱 、 核异常 、 质膜结构发生变化 。20、细胞拆合的方法有 物理法 和 化学法 两种。3、问答题1、非肌细胞中微丝的装配有哪些特征?答:非肌细胞中微丝的装配有:(1)由肌动细胞组装而成。G 肌动蛋白具极性,首尾相连装配成具极性的 F 肌动蛋白。微丝是由一条 F 肌动蛋白形成的右手螺旋。(2)装配方式为踏车运动,即正极因加上肌动蛋白单体而延长,负极因肌动蛋白单体脱落而缩短。(3)在体内装配受以下因素影响:游离肌动蛋白单体的浓度,微丝交织成网的程度,微丝结合蛋白的调节。(4)体外装配受 ATP、Ca2+ 、Na+、K+浓度的影响。适当的 Ca
24、2+,而 Na+、K+浓度较低时,趋向于解聚;含有 ATP 和 Mg2+,而 Na+、K+浓度较高时,趋向于聚合。2、阐述亲核蛋白进入细胞核的机制。答:亲核蛋白具有一段特殊的氨基酸序列,称为核定位信号。胞质溶质中有核输入受体。核蛋白由细胞质溶质进入核的机制如下:核输入受体与核蛋白结合成复合物;复合物与核孔伸出的原纤维结合,移向核孔;核蛋白与核孔结合,由 GTP 水解功能,打开核孔,复合物穿过核孔进入核;核输入受体与核蛋白分离,受体返回细胞质溶质。3、动物细胞外基质中胶原的结构特征及合成装配过程。答:胶原:以胶原纤维结构存在。胶原分子是由 3 股 肽肽链形成的右手型超螺旋结构。胶原分子首尾相连成
25、线,并列成束。组成胶原原纤维。胶原原纤维平行排列成胶原纤维。合成装配工程:胶原分子的多肽链是糙面内质网上得核糖体上合成的,称为前 链。前 链上带有称为前肽的氨基酸序列,可阻抑装配成的前胶原分子在细胞内即装配成大的胶原原纤维。在内质网腔内,前 链的脯氨酸和赖氨酸残基羟基化,3 条前 链由羟基形成的氢键相互结合,构成 3 股螺旋的前胶原分子装配完成后,被包装到分泌泡中,分泌到细胞外。在细胞外,前胶原分子的前肽序列被专一蛋白水解酶切除,转变成胶原分子,胶原分子又近一步装配成胶原原纤维,最后后者聚集成胶原纤维。4、为什么说高尔基体是极性细胞器?说明高尔基体的功能,亚显微结构分区及其不同区域的功能和联系
26、。答:高尔基体在细胞中的位置具极性,结构具极性,物质运输具极性,因此说高尔基体是极性细胞器。高尔基体靠近细胞核的一面,膜囊弯曲成凸面,称为形成面或顺面;面向细胞质膜的一面常呈凹面,称为成熟面或反面。高尔基体的亚显微结构分区,从顺面到反面,依次为:顺面膜囊及顺面高尔基体管网状结构(CGN) 、中间囊膜、反面膜囊及反面高尔基体管网状结构(TGN) 。各亚显微结构分区对应的功能是:(1)顺面囊膜及 CGN:初级分选站,负责对糙面内质网上转过来的蛋白质进行鉴别。(2)中间囊膜:多数糖基修饰、糖脂形成以及有关的多糖合成。(3)反面囊膜及 TGN:参与蛋白质的分类与包装,并输出高尔基体。不同囊膜有不同功能
27、,执行不同功能,执行功能时是流水式操作,上一道工序完成了、才能进行下一道工序。5、何谓成熟促进因子?它是如何调控细胞周期运转的?答:成熟因子是一种促进细胞成熟和分裂的调控性蛋白激酶。成熟促进因子的生化成分是两个亚单位,一个是 cdc2 蛋白,一个是周期蛋白。当二者结合后,表现出蛋白激酶活性,磷酸化下游的蛋白分子,从而促进细胞成熟或分裂。Cdc2 蛋白是其催化亚单位,周期蛋白是其调节亚单位。6、何为细胞、细胞核全能性?如何用实验证明,有何意义?答:所谓细胞全能性,是指细胞如受精卵一样,具有经过分裂、分化形成组织和器官,最终发育成一个完整个体的能力。细胞核全能性则指细胞虽不具有发育成一个完整个体的
28、能力,但是当将其细胞核通过核移植等方法导入去核卵细胞或受精卵,经过受体卵细胞质的诱导去分化,体细胞核和受体卵细胞质共同作用,依然可能发育成一个完整的个体。细胞全能性最有利的证据是植物细胞组织培养,而动物的终端分化的体细胞还没能证明有全能性。细胞核全能性最著名的证明是克隆多莉羊的诞生。细胞和细胞核全能性的证明具有重要意义。比如,在植物育种方面,组织培养技术可以快速、大量地生产植物幼苗,既保证了幼苗的品质,而且还节约了可以作为粮食的种子,组织培养技术是一项经济高效的农业新科技。动物细胞和细胞核的全能性如果得到清晰的研究,可以培养出人造器官,为需要进行器官移植的病人带来希望。细胞(核)全能性的应用还
29、有很多。4、综述题1、阐述动物细胞膜和细胞表面各自的结构特点及其相互关系。答:细胞膜是由磷脂双分子层构成骨架,蛋白质和脂类分子镶嵌于其中,且膜的结构处于流动变化中,其特征为镶嵌性、流动性、不对称性、蛋白质极性。细胞膜的磷脂双分子层结构是整个细胞质膜的骨架,它具有将细胞质和外界环境隔离开来的作用。质膜上镶嵌着诸多蛋白质,这些蛋白质在信号转导和物质运输方面起着重要作用。这些蛋白质在细胞内外两个朝向是不对称的,具有极性,这种极性也是其信号转导和物质运输的功能相适应的。质膜表面存在一层富含糖类结构的细胞外被,具有细胞识别、血型抗原功能。细胞与细胞之间、细胞与细胞外基质间也往往通过这层细胞外被形成细胞连
30、接结构,如封闭连接、锚定连接和通讯连接等。磷脂双分子层具有流动性,并且带动膜上的蛋白质等一起运动,并存在脂筏这样的亚显微结构。磷脂双分子层的流动性与脂质分子的类型、比率有关,与脂分子同膜蛋白及膜两侧的生物大分子之间的相互作用以及温度等环境条件有关。2、说明制备染色体标本的原理和制备小鼠染色体的方法,并说明如何进行染色体组型,如何判断核仁分布在那些染色体上?答:Q 带染色体技术是将中期染色体经氮芥喹吖因或双盐酸喹吖因染色后,在紫外线照射下所呈现的荧光亮带或暗带。一般富含 AT 碱基的区段显示为亮带,而富含 GC 碱基的区段显示为暗带。G 带染色技术是利用 Giemsa 染料染色后所呈现的区带。具
31、体操作方法是:其制作过程一般是首先用秋水仙素抑制纺锤丝的形成,使中期染色体停留在赤道面上,然后用低渗法将细胞涨破,使细胞的染色体铺展到载玻片上,用他的特定染料染色。最后,根据体细胞核中的全部染色体的显微图像按照大小、着丝粒位置,以至带型有序的排列起来。此图像排列称核型或染色体组型。根据核仁组织区位于次缢痕部位,此处伸出 DNA 袢环,且此处 DNA 较细,可作为判断次缢痕的标准。山东大学 2007 年细胞生物学考研题1、名词解释1、核质体答:用细胞松弛素处理动物细胞,细胞出现排核反应,在结合离心技术,可将细胞分为核体和胞质体。由于核体表面有一层细胞膜和少量胞浆,因此可称为小细胞或核质体。这是一
32、种化学性细胞拆合方法。2、细胞决定答:细胞分化具有严格的方向性,在细胞未出现分化细胞的特征之前,分化方向就已由细胞内部环境的变化及周围环境的影响决定,这一现象称为细胞决定。3、核质体答:用细胞松弛素处理动物细胞,细胞出现排核反应,在结合离心技术,可将细胞分为核体和胞质体。由于核体表面有一层细胞膜和少量胞浆,因此可称为小细胞或核质体。这是一种化学性细胞拆合方法。4、核孔复合体。答:细胞核具有两层平行但是不连续的核膜,内外核膜在一定部位相互融合,形成一些环形开口,在核被膜上规则排列成核孔。核孔是由多种蛋白质分子构成的复杂结构,故称为核孔复合体,是胞质和核质之间运输物质的通道。2、简答题1、分子生物
33、学中心法则。答:分子生物学的中心法则就是指生物信息从 DNA 到 RNA 再到蛋白质,它构成了整个分子生物学的基础,以下是具有代表性的四步:DNA 的自我复制; 转录:DNA 通过转录将信息传递给 mRNA;翻译:mRNA 与核糖体结合,核糖体读取 mRNA 的信息合成蛋白质; 逆转录:在某些病毒中,RNA 可以逆转录将遗传信息传递给 DNA。以上四步几乎参与了所有生物活动,而且现在还不断有实验证明证据来补充经典中心法则。2、动植物克隆原理、方法及举例。答:(1)植物克隆。原理:高度分化的植物细胞仍具有全能性。如用悬浮培养的胡萝卜单个细胞培育成可育植株。方法:取自胡萝卜根部韧皮部组织的细胞,经
34、培养长成一团愈伤组织,从中分离一个在适当培养基中悬浮培养,经多步优化培养,最终长成成熟的胡萝卜植株。(2)原理:动物高度分化细胞的细胞核具有全能性。如多莉羊的诞生。方法:将一只母羊的完全分化的乳腺细胞的核通过显微操作仪注入另一只母羊的去核卵细胞中,再移植到第三只羊体内发育成后诞生多莉。3、癌症既为细胞分化疾病,又为细胞增殖疾病。答:癌细胞较之正常体细胞其分化特性发生改变,其蛋白表达谱中往往出现一些胚胎细胞中所表达的蛋白,这些异常表达的蛋白可能与癌细胞的恶性增殖和扩散有关。癌细胞具有无限增殖能力,分裂增殖不受控制。4、核被膜的特点。答:核被膜的结构特点:(1)核被膜由内外两层平行不连续膜组成。(
35、2)向着胞质侧的一层核膜叫外膜,其胞质表面上附有大量核糖体颗粒,外膜常常与糙面内质网相连。近核质侧的一层核膜叫内膜,其表面光滑,含有一些特异性蛋白质。(3)内外层核膜之间有 20-40nm 的间隙,称为和膜间隙,与糙面内质网上相通。(4)核被膜并非完全连续,其内、外膜在一定部位相互融合,形成一些环形开口,称为核孔,核孔周围有许多蛋白质,共同形成一个大型的核孔复合体。核孔复合体在核物质交换和信息交流方面起着调控作用。6、放射标记原理。答:放射性同位素及它们的化合物,与自然界存在的相应普通元素及其化合物之间的化学性质和生物学性质是相同的,只是具有不同的核物理性质。因此,就可以用同位素作为一种标记,
36、制成含有同位素的标记化合物(如标记食物,药物和代谢物等)代替相应的非标记化合物。利用放射性同位素不断地放出特征射线的核物理性质,就可以利用核探测器随时跟踪它在体内或体外的位置、数量及其转变。7、溶酶体的功能,溶酶体的功能,溶酶体的合成及分选机制。答:溶酶体的功能包括:细胞内消化; 防御功能; 细胞内衰老和多余细胞器的清除; 发育过程中清除细胞的功能; 受精中的功能; 植物种子萌发中的功能等。溶酶体发生机制简述为:溶酶体酶靠其 N 端信号肽引导到糙面内质网上进行蛋白质的合成和糖基化,再运到高尔基复合体上进行加工修饰后由单个膜囊以出芽的方式形成。其具体分子机制是:溶酶体酶在糙面内质网上合成并经过糖
37、基化修饰以后,被转移至高尔基复合体。溶酶体酶分子上具有信号斑,高尔基复合体顺面膜囊中的磷酸转移酶识别信号斑,对寡糖链上得甘露糖残基进行磷酸化修饰形成 M6P。在高尔基复合体的反面膜囊和管网膜上存在 M6P 受体,对 M6P 具有高度特异性,靠 M6P 受体与 M6P 的特异性结合便可把溶酶体酶从其它蛋白质中分拣出来,进行浓缩,最后以出芽的方式被包装成衣被小泡,直接转运到溶酶体中。在溶酶体的酸性环境下,M6P 的受体便于 M6P 分离,又重新回到高尔基复合体反面,再去参与其它溶酶体酶的分拣及溶酶体的形成。3、综述题1、细胞外基质成分各结构特点,与质膜连接结构、特点。答:细胞外基质成分有:(1)胶
38、原。胶原是细胞外基质中最重要的水不溶性纤维蛋白。胶原分子首尾相连成线,并列成束组成胶原原纤维。胶原原纤维平行排列组成胶原纤维。胶原是细胞外基质的骨架结构,赋予细胞外基质刚性和抗张性。(2)弹性蛋白。弹性蛋白是弹性纤维的主要成分,赋予组织弹性。弹性蛋白有两个重要特征,一是构想呈无规则卷曲状态,二是通过赖氨酸残基互相交联成网状。(3)糖胺聚糖和蛋白聚糖。糖胺聚糖是由氨基酸和糖醛酸组成的二糖单元重复连接而成,多糖链呈充分展开构象。糖胺聚糖填充了胞外基质的大部分空间,为组织提供了机械支撑作用;蛋白聚糖是由糖胺聚糖与蛋白质共价结合而成。在软骨中,大量蛋白聚糖借助连接蛋白以非共价键与透明质酸结合形成很大的复合体,赋予软骨凝胶样特征和抗形变能力。蛋白聚糖能与 FGF、TGF- 等生长因子结合有利于激素分子与细胞表面受体结合完成细胞信号传导。(4)纤连蛋白和成连蛋白。纤连蛋白是由两个亚基组成的二聚体,在靠近羧基端有一对二硫键将两个亚基连在一起,使两个亚基呈 V 字形。纤连蛋白的细胞表面受体是整连蛋白家族成员,因此纤连蛋白有介导细胞黏着的功能,就像一座桥,把细胞锚定在比胞外基质上。成粘连蛋白是由 3 条长肽链组成的大复合物,肽链通过二硫键连在一起。整个分子呈十字架形,分子具柔性,可折曲。粘连蛋白也是分子桥,将细胞锚定在基膜上。
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