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精选优质文档-倾情为你奉上常用中性粒细胞分离方法(外周血、骨髓提取均可)(1) Percoll非连续密度梯度离心法(张灿老师课题组使用方法)优点:Percoll的主要成分是硅石胶,对中性粒细胞的化成成分和活性无影响。回收率高,存活率高。缺点:可能会有部分红细胞分离不干净,影响不大。 (2) Ficoll-Hypaque密度梯度离心法优点:回收率高和percoll差不多。缺点:由于Ficoll结构中的长链烃组成具有LPS样作用,因此在分离过程中,会对中性粒细胞有激活作用。(3) Dextran作用下红细胞自然沉降法优点:能够完全分离红细胞缺点:回收率最低(4) 裂解红细胞法优点:能够完全分离红细胞缺点:回收率低纯度、回收率和存活率检测方法纯度:瑞吉染色存活:台盼蓝计数回收:分离后(计数)/分离前(血常规检测)Percoll非连续密度梯度离心法(张灿老师实验室的方法)和培养备注:使用外周血或骨髓提取都是可以的,一般来说,外周血每1ml能够提取1*106 cell,数量比较少,如果骨髓提取,一只小鼠
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