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流式细胞仪实验方法(共15页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上流式细胞仪实验方法一、 实验准备1 标本制备:2.最小化非特异性结合:二、凋亡1凋亡的检测方法:网站和其它2PI染色法3Annexin V 法4TUNNEL法三、细胞因子1激活的细胞因子2CBA四、血小板1活化2活化检测3网织血小板五、红细胞1网织红细胞2PNH3胎儿红细胞六、肿瘤学1DNA 细胞周期2蛋白3多药耐药4微小残留白血病第一部分 标本处理一、流式细胞术常规检测时的样品制备 (一)直接免疫荧光标记法 取一定量细胞(约1X106细胞ml),在每一管中分别加入50l的HAB,并充分混匀,于室温中静置1分钟以上(),再直接加入连接有荧光素的抗体进行免疫标记反应(如做双标或多标染色,可把几种标记有不同荧光素的抗体同时加入),。孵育20-60分钟后,用PBS(pH7274)洗1-2次,加入缓冲液重悬,上机检测。本方法操作简便,结果准确,易于分析,适用于同一细胞群多参数同时测定。虽然直标抗体试剂成本较高,但减少了间接标记法中较强的非特异荧

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