痛泻要方组成药物对大鼠结肠平滑肌运动的影响及机制.DOC

1、痛泻要方组成药物对大鼠结肠平滑肌运动的影响及机制魏睦新* 吴燕敏 刘振清 田琳(南京医科大学第一附属医院中医科，江苏，南京，210029)摘要：目的： 观察痛泻要方拆分成分防风、白术和白芍对离体大鼠结肠平滑肌的影响，并探讨其部分机制。方法： 制备大鼠结肠平滑肌肌条，以9g/L NaCl 溶液为对照，观察白术、白芍和防风对平滑肌自发收缩的影响和防风对乙酰胆碱(Ach)引起的肌条收缩的影响，并用 3 种工具药（纳络酮、心得安、酚妥拉明）初步探讨了防风的作用机制。结果： 与 NS 组相比较，白术、白芍均对大鼠平滑肌有促进收缩的作用，且白术的作用大于白芍；防风各剂量组（1040g/L）均对平滑肌收缩有

2、剂量依赖性的抑制作用。不同浓度的防风对Ach 引起的肌条收缩作用均有抑制，并呈剂量依赖关系。先用工具药充分孵育后再加入 RS，与对照组(NS+RS)比较，NLT+RS 组面积的回升有统计学意义（P0.05)。3.2 防风3.2.1 RS 对离体大鼠结肠平滑肌自发收缩的影响 以 NS 对照组的结肠平滑肌自发收缩为 100%，RS 各组均对平滑肌收缩有一定程度的抑制作用（振幅统计 F=8.388，P0.05 ） ，但 40g/L 组（58.3723.41%）与 NS 组比较差异有统计学意义（P0.05） ；而收缩面积与对照组相比，三组均有统计学差异。RS20g/L 组为 61.0519.53%（P

3、0.05） ，RS30g/L 组为 49.3218.73%（P0.05） ，RS40g/L 组为38.0720.42%（P0.01） 。(结图 3)3.2.3 工具药物对 RS 抑制平滑肌收缩作用的影响先用三种工具药充分孵育后再加入 RS（40g/L） ，与对照组(NS+RS)比较，XDA 组差异振幅和面积均无统计学意义；NLT+RS 组振幅（72.615.26% ）的差异无统计学意义，面积的回升（56.53 15.83%）有统计学意义（P0.05） ；FTLM 组振幅（88.929.93%）和面积（91.512.59%）回升差异均有统计学意义（P0.01 ） ，与阴性对照组(NS)的差异则无

4、统计学意义（结果见图 4） 。4 讨论在古代文献记载中，痛泻要方的主治症状描述，与功能性肠病最为吻合，现代报道也发现，很多治疗 IBS 的验方，均以该方为基础发展而成 1-2。IBS 是功能性胃肠病中研究最活跃的一种疾病，从临床角度可以分为腹泻型，便秘型和腹痛型 3 种，均与肠道平滑肌调节紊乱，运动异常有关。但是就其病理来说，腹痛型以平滑肌痉挛为主，腹泻型以平滑肌运动亢进有关，而便秘型则是运动抑制。呈现为不同甚至相反的机制。为什么痛泻要方对不同类型均能取得效果，单纯用中医“抑木扶土”来解释，很难被现代医学接受。研究传统方药的药理效应和机制具有理论意义和临床价值。药性赋云：“白术，其用有四，利水

5、道，有除湿之功；强脾胃，有进食之效；佐黄芩有安胎之能；君枳实有消痞之妙。 ”“白芍，其用有四，扶阳气大除腹痛，收阴气陡健脾经，坠其胎能逐其血，损其肝能缓其中。 ”现代大量药理学研究亦显示白术、白芍能促进平滑肌的收缩运动：如李建军魏睦新 8等通过研究清胰汤对豚鼠离体结肠平滑肌收缩活动的影响发现，白芍对结肠平滑肌有直接的显著的兴奋作用；覃俊佳 9等同时应用在体试验和离体实验的方法研究了白芍泻下作用的机理，认为白芍通过促进小肠、大肠的推进运动而起到泻下的作用；朱金照 10等运用胃排空率测定和小肠推进功能测定等在体实验方法对 15 味中药促胃肠动力作用进行了筛选研究，结果显示白术对胃排空及肠道传输均有

6、促进作用；我们课题组以往的研究亦表明：25白术水煎剂可明显促进小鼠胃排空及小肠推进功能，使正常小肠张力增高，使麻痹小肠振幅加大，恢复节律性收缩。已往的研究表明，很多中药在在体实验条件下和离体实验条件下所得的实验结论往往是不同的。本实验运用了离体实验方法，结果表明白术、白芍均能促进大鼠结肠平滑肌的收缩，且白术的作用强于白芍，与之前的在体实验相比，本次实验结果更为精确，过程易于观察，此方法可较大范围地应用于促结肠动力中药的筛选。防风在治疗消化系统疾病方面有着广泛的应用，本实验组此次实验的结果显示，在所应用防风的几个浓度组中，均对离体大鼠结肠平滑肌收缩表现出不同程度的抑制。乙酰胆碱作为胆碱能神经释放

7、的一种兴奋性神经递质，可激动胃肠平滑肌细胞膜上的 M 受体，导致细胞内 Ca2+浓度升高，兴奋胃肠平滑肌并产生强烈的收缩运动，对胃肠运动调节有重要作用。当先给予 Ach 作用时，防风可部分抑制 Ach 所引起的结肠平滑肌的收缩，此结果提示防风对结肠平滑肌产生抑制作用可能与 M 胆碱受体被阻断有关。纳络酮为阿片受体特异拮抗剂，心得安是 -受体阻断剂，他们都不能明显阻断防风对离体肠肌的抑制作用，提示防风对结肠平滑肌的抑制作用与阿片受体和 -受体关系不大。肾上腺素能 受体阻断剂酚妥拉明几乎可以完全阻断防风对离体肠肌运动的抑制作用，提示防风对离体肠肌抑制作用的机制可能与肾上腺素能 受体有较为密切的关系

8、。以上研究结果提示，痛泻要方中至少含有促进胃肠运动功能药和抑制胃肠运动功能药效的两类药物，在 IBS 等肠功能紊乱状态，如何发挥作用，还有待于进行全方，整体动物模型层面的进一步深入研究。我们根据以上离体平滑肌实验，推测痛泻要方，很有可能是根据机体具体状况，起着不同的调节作用，且与肾上腺素能 受体、胆碱能 M 受体有关。胃肠道运动的调节，非常复杂，受植物神经，脑肠肽类调节物质多方面多层次调节。从这个角度思考，胃肠道功能异常疾病（如 IBS）也很难说是某一单一因素引起的。所以现代医学一元论的理论指导下的治疗，效果不理想。而中医的体质调整、辨证论治下的复方治疗，一般认为是多靶点，多层次发挥效应的，反

9、而能取得效果。在今后的进一步研究中，扩大样本数量、扩大药物浓度范围，或在不同的生理、病理状态的整体模型动物以及在更高层次的离体细胞水平，进行全方与拆方研究，都是非常重要而有意义的工作。参考文献1 李熠萌. 中医辨证分型治疗腹泻型肠易激综合征的临床观察 J. 中华中医药杂志，2009，S1:52-54.2 苏国彬，刘文华，陈海滨等 . 以痛泻要方为基本方治疗肠易激综合征随机对照试验的质量评价J. 中医杂志，2008 ，49(12):10771079.3 陈文莉，郭良集，莫宁等. 加味痛泻要方对家兔体外结肠平滑肌的作用J. 中国中西医结合消化杂志，2007，15(1):38 -40.4 潘锋，张涛

10、，陈建永. 痛泻要方对腹泻型肠易激综合征 Cajal 间质细胞影响的研究J. 中华中医药学刊，2009 ，27(6):1272-1273.5 李伟，郑天珍，翟颂义等 . 陈皮对大鼠胃平滑肌条收缩活动的作用及机制的探讨J. 中国中西医结合杂志，2000 ，7(基础理论研究特集):49-50.6 李晨, 魏睦新. 氢溴酸槟榔碱对豚鼠体外胃不同部位肌条作用及其机制J. 中国中西医结合消化杂志，2007，15(2):77 -80.7 衣兰娟，田琳，梁宁霞等. 促结肠动力中药筛选及其机制 J. 世界华人消化杂，2006，14(32):3093-3097.8 李建军，杨小军，轩辕青史等 . 清胰汤对豚鼠离

11、体结肠平滑肌收缩活动的影响J. 山东中医杂志，2002 ，21(3):174 -176.9 覃俊佳，覃平，罗宇东等. 白芍泻下作用机理的实验研究 J. 中国中医药科技，1998，5(3):155-157.10 朱金照，冷恩仁，陈东风等. 15 味中药促胃肠动力作用的筛选研究J. 第三军医大学学报，2000，22(5):436 -438. 图 1 WPR、 LA对 离 体 大 鼠 结 肠 平 滑 肌 收 缩 作 用 的 影 响 (meanSD， n=6).与 NS组 比 较 ， aP0.05； 与 WPR组 比 较 ， b P0.05.aaa ba050010001500200025003000

12、3500NS LA WPR平滑肌收缩百分率（NS%） 振 幅 面 积aa ba平滑肌收缩百分率（NS%)图 2 不 同 剂 量 RS (g/L)对 离 体 大 鼠 结 肠 平 滑 肌 自 发 收 缩 的 影 响(mean SD， n=6). 与 NS组 比 较 ,aP0.5,bP0.1a ab bb bb0255075100NS 0.01RS 0.02RS 0.03RS 0.04RS振 幅 面 积b平滑肌收缩百分率（NS%)图 3 加 入 不 同 剂 量 RS (g/L)对 Ach(终 浓 度 10-6 mol/L)引 起 离 体 大 鼠 结 肠平 滑 肌 收 缩 的 影 响 (mean +S

13、D， n=6).与 NS组 比 较 , a P0.5, bP0.1a b a0255075100Ach+NS Ach+0.01RS Ach+0.02RS Ach+0.03RS Ach+0.04RS振 幅 面 积ab ab平滑肌收缩百分率（NS%)图 4 三 种 药 物 充 分 孵 育 后 对 RS (终 浓 度 40 g/L)抑 制 离 体 大 鼠 结 肠 平滑 肌 收 缩 作 用 的 影 响 (mean+SD， n=6). 与 NS组 比 较 , aP0.01;与NS+RS组 比 较 ，bP0.05, c P0.01b b b a a b0255075100NS NS+RS NLT+RS XDA+RS FTLM+RS振 幅 面 积aa a b a ac c