精选优质文档-倾情为你奉上生物制药产业化及膜分离技术，下游纯化解决方案专帖！yangzhiming wrote:非常感谢您的回复,我现在是利用RP-HPLC制备,纯度只能达到90%,也使用过离子色谱,效果也不好.主要是和主峰保留时间非常接近的杂质难以分离,不知用什么预处理方法,请您指教.多谢!IEC-HPLC不是很好操作，条件控制比较难，相对来说，RP-HPLC会好些。样品的预处理，当然有很多。比如脱盐，根据你的量选择合适的方法超滤手段脱盐。比如去除大分子蛋白，你也可以选择超滤。要是浓度不够，可以用超滤浓缩。另外，RP-HPLC的梯度选择比较重要，在选择好柱子后，然后考虑合适的梯度去完成实验，到底什么样的梯度最好，需要你去优化。洗脱剂的选择也是很重要的，不同洗脱剂效果是不一样的。比如乙氰和甲醇是不一样的。初学者请问：我们用miliipore的板式膜包纯化蛋白，目的蛋白的分子量是11kd，选择的膜包的分子量是30kd，没有压力表，靠流速来控制压力，逐级PBS洗滤，在不同 时间分别取截留和透过液，进行SDS-PAGE电泳，结果发现大部分的目的
