1、实验诊断Laboratory Diagnosis,第一章 概 论 基本概念 注意事项 主要内容 应用范围,实验诊断:是运用物理、化学和生物学的实验室技术和方法,对病人的血液、体液、分泌物、排泄物以及组织细胞等标本进行检验,以获得反映机体功能状态,病理变化或病因等的客观资料。其对疾病的诊断、病情监测、疗效观察、预后评估等均有重要意义。 技术和方法 标本检验 客观资料 诊断,注意事项:,实验诊断的临床应用和评价: 临床疾病诊断过程:病史、体检、辅助检查。化验结果具有重要性,也有一定的局限性,需要结合临床综合判断。 确定性诊断、辅助性诊断、鉴别性诊断参考值和参考范围: 抽样组测得值为参考值,平均值加
2、减标准差为参考范围。提倡一滴血、一次尿简便、省钱的检查: 尽量减轻病人的负担。,学习方法和要求: 实验诊断属于基础课与临床课之间的医学桥梁课程,教学的重点是使学生由基础向临床过渡,使学生掌握临床思维,运用实验结果、综合为临床所用。掌握带有概念性、普遍性、实用性的内容。5.危急值: 危急值是指某些检验结果出现异常超过一定界值时,可能危及患者的生命,医生必须紧急处理,称之为危急值。,实验诊断学的主要内容 1临床血液学检测 2血栓与止血检测 3排泄物、分泌物及体液检验 4常用肾脏功能实验室检测 5肝脏病常用实验室检测 6临床常用生物化学检测,实验诊断学的应用范围 1为临床医疗工作提供依据 2为公共卫
3、生和预防疾病提供资料 3为临床研究和基础研究提供手段 4为健康普查和咨询提供服务,第二章 临床血液学检测 血液是实验诊断(化验诊断)应用数量最多、最广泛的实验标本。 生理状态 动态平恒 参考值正常 健康 病理状态 动态平恒紊乱 参考值异常 疾病,血液,有形成分(血细胞)45%,无形成分(血浆)55%,RBC,WBC,PLT,水分,无机盐,营养物,排泄物,蛋白质,其他,78%,血液的组成,55-60%是血浆,其中的90%是水,其余为无机盐、营养物、排泄物、蛋白质等物质。,40-45%是血细胞(红细胞、白细胞、血小板)。,第一节 血液一般检测(血常规),血常规包括:RBC、Hb、WBC、DC一、红
4、细胞和血红蛋白检验:【参考值】 问题:正常成年男性与女性RBC、Hb差异产生的原因? 2.成人与新生儿RBC、Hb差异产生的原因?,Bone marrow,Red blood cell,EPO,雄激素,WBC,PLT,缺氧,【临床意义】 正常情况下(人体出生后)骨髓是生成RBC的唯一组织。而对于成熟红细胞来说,其内主要包含Hb(占红细胞重量的3236%,或占红细胞干重的96%),故在正常情况下RBC与Hb有着相对固定的比例关系。 RBC Hb11012/L30g/L,在病理情况下,这种比例关系失调:(贫血)以RBC下降为主: RBC Hb 大细胞性贫血以Hb下降为主: RBC Hb 小细胞性贫
5、血RBC、Hb平行下降:RBC Hb 正细胞正色素性贫血,RBC、Hb减少(多见)贫血定义:单位容积循环血液中,红细胞数、血红蛋白量及血细胞比容低于参考值低限称为贫血。贫血分度(级):,生理性减少: 妊娠中晚期妇女:为适应胎盘血液循环,血液 稀释而致。 婴幼儿:(3个月15岁)红细胞生成相对迟缓 于生长发育而致。 老年人:骨髓造血功能减退而致(退行性变)。,病理性减少: 红细胞生成不足: 骨髓造血功能障碍: 再障、白血病、恶性肿瘤骨髓浸润。 细胞分化成熟障碍(造血原料不足): 缺铁贫、巨幼贫。 红细胞破坏过多: 细胞内在缺陷(遗传性): 球形RBC、红细胞酶缺陷,异常血红蛋白病,PNH。 红细
6、胞外来因素(获得性): 自免溶贫、理化因素致溶血。 失血:急性失血 慢性失血,RBC、Hb增多(少见)定义: 男性:RBC6.0101 2/L Hb170g/L 女性: RBC5.51012/L Hb160g/L相对性增多:因体液丢失,血液浓缩,单位体积血 液内RBC、Hb升高。 临床所见:呕吐、腹泻、出汗、烧伤、尿崩症、 甲亢危象、慢性肾炎、糖尿病酮症酸 中毒等。,绝对增多:继发性红细胞增多症: 继发于EPO ,属非造血系统疾病。EPO代偿性增加: 因机内组织缺氧,致EPO ,红细胞增多程度与缺氧程度成正比。 生理情况下:胎儿、新生儿、高源居民、运动员。 病理情况下:慢性心肺疾患、肺心病、先
7、心病。EPO非代偿性增加: 体内某些肿瘤或肾脏疾患致EPO分泌增加:肾癌、肝癌、卵巢癌,肾胚胎瘤、肾上腺皮质瘤、子宫肌瘤、肾盂积水、多囊肾。,真性红细胞增多症: 属骨髓增生性疾病: 真性红细胞增多症 急性红白血病 原发造血干细胞疾病等。,红细胞形态学改变:,正常成熟RBC形态:Wright染色 无核、双凹圆盘形、大小均一、直径69um(平均7.5um),细胞厚度边缘2um,中央1um。中心淡染、淡染区大小相当于红细胞直径的1/32/5。 形态异常包括:大小异常;形态异常 ; 染色反应异常;结构异常。,二、白细胞计数和白细胞分类计数:,【参考值】白细胞计数: 成人:(410)109/L 新生儿:
8、(1520)109/L 6个月2岁:(1112)109/L,5种白细胞正常百分数和绝对值,【临床意义】,中性粒细胞:Neutrophil. N 骨髓中的干/祖细胞在多种因素的调控下(包括集落刺激活性物Colony stimulating activity CSA或称集落刺激因子colony stimulating factor CSF)逐渐分化、增殖、成熟为外周血中的中性粒细胞。,中性粒细胞生成:,CFU-E BFU-E CFU-S CFU-GM 原始早幼中幼晚幼杆状分叶TSC CFU-Eo CFU-Meg Pre-L 按照是否具备形态特点分为两群。 按照分布情况分为两群,骨髓、外周血。 杆状
9、核以前的细胞(包括杆状核)统称不分叶的中性粒。 分叶核正常时多分为3叶,少数可分为2叶,也可出现杆状核。 杆状核分叶核=113,中性粒细胞功能:,趋化功能变形和粘附作用吞噬作用杀菌作用 中性粒细胞成熟过程及分布情况:,干细胞池:细胞无形态学特点 原始粒 经35次分裂 分裂池 早幼粒 由1个细胞分裂 骨 mitotioc pool 中幼粒 为832个细胞 髓 (35天) 1012天 生长成熟池:细胞具备 晚幼粒 maturation pool 形态学特点 杆状核 晚幼粒发育 成熟为分叶 不再分裂 分叶核 核需68天,循环粒细胞池 : 存在于血液循环中, 外 功 能 池 circulating g
10、ranulocyte pool 占总数的50% 随机交换 周 粒细胞存留时间 动态平恒 血 1012h半衰期67h 边缘粒细胞池 : 附着于静脉、毛细血管 marginating granulayte 壁上,占总数的50% pool 成熟池 贮存池 功能池 组织中 1012天 35天 1012小时 13天 贮存池内的粒细胞为外周血(功能池)的1520倍。 组织中的粒细胞数为血管内的20倍。 骨髓贮存池中粒细胞释放维持血液中细胞数量的相对恒定。 中性粒细胞 具有趋化作用,变形和粘附作用、吞噬作用、杀菌作用。,1.中性粒细胞增多:neutrophilia(较常见 ) 1)生理性增多: 特点:暂时性
11、或一过性,细胞无质量变化。 见于:饱餐、淋浴、情绪激动、运动、高温、寒冷、 新生儿、月经期、妊娠(5个月) 分娩等。,2)病理性中性粒细胞增多: 机体对各种刺激因素产生应急反应,引起储存池和边缘池中的粒细胞释放进入循环池的结果。 .急性感染或炎症: 最常见:特别是化脓性感染,即球菌 引起的感染,其次某些杆菌,真菌,病毒,立克次体,螺旋体,寄生虫等。 中性粒细胞增高的程度相关因素: A.病原体种类;B.感染的部位和程度;C.机体的反应性。,.严重的组织损伤或大量血细胞破坏: 外伤、手术、大面积烧伤、冻伤、血管栓塞所致局部缺血性坏死、心梗、肺梗塞、血栓等。 急性溶血致缺氧及RBC分解产物刺激骨髓使
12、储存池WBC释 放,以中性分叶核为主。,.急性大失血: 急性失血可使WBC在12小时内升高达1020109/L,可能机制:缺氧、应激刺激骨髓使骨髓中储存池中粒细胞释放。 内脏出血引起WBC升高更为显著,故WBC升高可作为早期诊断内出血的参考指标,血小板也同时有所增高。 .急性中毒: 化学药物中毒:(外源性): 昆虫药,蛇毒,药蕈,安眠 药,铝,汞等。 代谢性中毒(内源性): 尿毒症,酮症酸中毒,妊娠中毒症。,.恶性肿瘤、白血病: 非造血系统恶性肿瘤,特别是消化系统肿瘤,可能的机制: .肿瘤坏死组织刺激骨髓。 .肿瘤组织释放G-CSF(肝瘤,胃癌)。 .肿瘤细胞浸润干扰调控作用。 造血干细胞克隆
13、性疾病,引起中性粒大量增生。 .粒细胞白血病: 各种急、慢性白血病 .骨髓增生性疾病: Myeloproliferative disorders MPD 真性红细胞增多症、原发血小板增多症、骨髓 纤维化症。 .其它:类风湿性关节炎、自疫溶贫、痛风。 药物:肾上腺皮质激素、肾上腺素等。,2.中性粒细胞减少:neutropenia(较少见) 白细胞减少症:Leukopenia:WBC4.0 109 /L 。 粒细胞减少症:Granulocytopenia:N1.5 109 /L 。 粒细胞缺乏症:Agranulocytosis;N0.5 109 /L 。,1)感染性疾病: 病毒:流感、麻疹、病毒性
14、肝炎、水痘、风疹、巨 细胞病毒。 细菌:伤寒、副伤寒、肠道沙门化菌属。 原虫:疟疾、黑热病等。 2.)血液系统疾病: 再障、粒缺、白血病、恶性组织细胞病、恶性贫 血、严重缺铁性贫血。,3.)物理、化学因素损伤: 射线:Co60 r-射线 药物:解热镇痛药、抗生素、磺胺、抗肿瘤、抗甲亢、 抗糖尿病、以及免疫抑制剂等。 4.)单核吞噬细胞系统功能亢进:脾功能亢进。 5.)自身免疫性疾病:SLE 、过敏性休克。,中性粒细胞核象是指粒细胞的分叶状况,反应粒细胞成熟程度。分为核左移和核右移。 1.)核左移:(多见)5 定义:外周血中出现不分叶的中性粒细胞数量大于6。杆状核粒细胞增多,甚或出现杆状核以前更
15、幼稚阶段的粒细胞,称为核左移。 意义:常见于感染,特别是化脓性感染,另外中 毒、溶血、失血等。,分度: 轻度左移:杆状核 数量 6 。 中度左移:杆、晚幼粒 10。 重度左移:杆、晚、中、早、原 25。 核左移的程度主要与病情的严重程度及机体反应能力相关。 临床所见:WBC N 轻度左移:感染轻、抵抗力强。 WBC N 中度左移:严重感染。 WBC N 重度左移:病情极为严重、休克。,2)核右移:(少见) 定义:外周中出现5叶或5叶以上分叶核粒细胞数 量大于3。 临床所见:造血原料不足(叶酸Vit-B12)造血功 能减退。,4.中性粒细胞常见的形态异常 中性粒细胞中毒性改变;巨多分叶核中性粒细
16、胞; 棒状小体; 球形包涵体;其它异常粒细胞; 中毒颗粒:中性粒中出现粗大、大小不等、分布不均深紫色 或蓝黑色的颗粒,称为中毒颗粒。 棒状小体:(Auer小体) 白细胞胞质中出现呈紫红色 杆状 物,长约16um,一条或数条不定称为棒状小体。,嗜酸性粒细胞:Eosinophil E嗜酸性粒细胞生成: CFU-Eo 原粒 早幼粒 嗜酸中 嗜酸晚 嗜酸杆 嗜酸分 嗜酸粒细胞与免疫系统之间有密切关系。 成熟嗜酸粒外周血中只占总数1,大部分存在骨髓组织中。 嗜酸粒细胞功能:吞噬作用。,1.嗜酸粒细胞增多: 1).变态反应性疾病:(过敏性疾病) 哮喘、血管神经性水肿、荨麻疹、异种蛋白、枯草热、食物、药物过
17、敏。 2)寄生虫感染: 肠道外寄生虫:血吸虫、肺吸虫、丝虫、中华分支睾吸虫。 肠道内寄生虫:钩虫、蛔虫等(少见)。 3)皮肤病:银屑病、湿疹、剥脱性皮炎等。,4)血液病: 慢性粒细胞性白血病、淋巴瘤、嗜酸粒细胞白血病。肝切除术后,MM、真性 红细胞增多病。5)恶性肿瘤: 肿瘤转移、坏死灶等恶性肿瘤。6)某些传染病:某些传染病恢复期时。7)其它:风湿病、重体前叶功能减退、肾上腺皮质 功能减退。,8)高嗜酸性粒细胞综合征: 肺浸润的嗜酸性粒细胞增多症。 过敏性内芽肿。 嗜酸性粒细胞心内膜炎。 2.嗜酸粒细胞减少: 临床少见:意义较小。长期应用肾上腺皮质激素、伤寒、 副伤寒。,(三)嗜碱性粒细胞 :
18、Basophil,B 嗜碱性粒细胞生理功能突出的特点是参与超敏反应。 细胞内嗜碱性颗粒中含有多种活性物质: 组胺:小动脉、毛细管扩张、小静脉毛细管通透性增加。 肝素:具有抗凝作用。 慢反应物质:与前列腺素有关,改变血管通透性,平滑 肌收缩(支气管)。 嗜酸粒细胞趋化因子:对嗜酸粒细胞起趋化作用。 血小板活化因子:活化血小板便其释放5-羟色胺。,1.嗜碱粒细胞增多(少见) 见于:慢粒、骨髓纤细胞、慢性溶血、脾切除术后等。 2.嗜碱粒细胞减少:无临床意义。,(四)淋巴细胞:Lymphocyte. L T 淋巴细胞(胸腺依赖淋巴细胞) T淋巴细胞淋 B 淋巴细胞(骨髓依赖淋巴细胞) B淋巴细胞巴 K
19、 细胞 T 淋巴细胞:参与细胞免疫,是淋巴细 细胞5070%,寿命数月数年。 胞 N K细胞 B 淋巴细胞:参与体液免疫,占淋巴 细胞1530%,寿命45天.,1. 淋巴细胞增多:1)生理性增多: 主要见于儿童及婴儿,46岁后淋巴细胞比例逐渐降低。2)病理性增多: 感染性疾病: 病毒感染(主要):麻疹、风疹、水痘、病毒性肝炎。 细菌感染(次要):百日咳杆菌、结核杆菌、梅毒螺旋体。 肿瘤性疾病: 急慢性淋巴细胞白血病、淋巴瘤。 急性传染病恢复期: 移植排斥反应:GVHD GVHR,2.淋巴细胞减少: 射线接触,肾上腺皮质激素应用、烷化剂、免疫缺陷、丙种球蛋白缺乏症。3.淋巴细胞形态变化: 异形淋
20、巴细胞:外周血中一种形态变异的不典型淋巴细胞。 型(泡沫型) 型(不规则型) 型(幼稚型)(五)单核细胞:Monocyte M 单核细胞由CFU-GM祖细胞分化而来,经原单、幼单发育为成熟单核细胞,在血液中逗留13天后出血管进入组织或体腔内转变为吞噬细胞,形成单核-吞噬细胞系统。,单核吞噬细胞系统功能:诱导免疫应答(反应): 通过吞饮或吞噬抗原将抗原提供给淋巴细胞,激活淋巴细胞,启动特异性免疫过程。吞噬和杀灭某些病原体: 病毒、疟原虫、结核杆菌、隐球菌、布氏杆菌等。吞噬红细胞和清除损伤组织及死亡的细胞: 处理衰老,异常的RBC,清理炎症反应场所。抗肿瘤活性:对白细胞生成的调节: 单核细胞和吞噬
21、细胞可产生集落刺激因子。,单核细胞增多: 1)生理性增多:儿童 9%;婴儿(2周内) 15% 2)病理性增多: (1)某些感染:疟疾 、黑热病、结核、感染性心内膜炎。 (2)血液病:AML-M4 、AML-M5、MDS、恶组、淋巴瘤等。 (3)急性传染病或急性感染的恢复期。 2单核细胞减少: 无重要临床意义。,(六)类白血病反应: Leukemoid reaction 是指机体对某些刺激因素所产生的类似白血病表现的血象反应。 刺激因素包括:严重感染、恶性肿瘤最多见,其次急性中毒、外伤、休克、溶血、失学、烧伤、过敏、电离辐射等。,四、血小板计数 platelet count PLT血小板的生成:
22、 原巨核细胞 幼巨核细胞 颗粒型巨核细胞 产板巨核细胞 巨核细胞裸核 血小板,【参考值】 100300109/L 1030万/l【临麻意义】 1)血小板减少(多见) 生成障碍:再障、放射线损伤、白血病、巨幼贫。 破坏或消耗增多: 破坏增多:ITP SLE 过敏药物,脾功 亢进。 消耗亢进:DIC 血栓性血小板减少性紫癜。 血小板分布异常:脾肿大,血液稀释,2)血小板增多: 原发性增多:骨髓增生性疾病(MPD)、 慢粒、真 红、 骨 髓纤维化原发血小板增多症。 反应性增多: 急性失血、溶血、急、慢性感染、肿 瘤等。附:血小板平均容积: mean platelet volume, MPV 血小板分布宽度: platelet distribution width,PDW,谢 谢,
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