长兴吊瓜籽油脂肪酸组成分析和毒理学初步评价.DOC

1、长兴吊瓜籽油脂肪酸组成分析和毒理学初步评价 1王亚萍 1 杨柳 2 朱光权 3 石从广 3*（中国林业科学研究院亚热带林业研究所 1，杭州 311400）（浙江省林产品质量检测站 2，杭州 310023）（浙江省林业科学研究院 3，杭州 310023）摘 要 对长兴吊瓜（ Trichosanthes bracteata）籽油中脂肪酸组分进行了分析，并对其食用安全性进行了毒理学评估。吊瓜籽油经甲酯化处理后采用气质联用（GC-MS）对其脂肪酸组分进行了分离、并通过质谱数据库检索和标准品对照对其主要脂肪酸进行定性分析，采用气相色谱(GC-FID)对这些脂肪酸组分进行定量测定。通过小鼠试验进行毒理学评

2、价，包括小鼠急性经口毒性试验和慢性毒性三项。结果表明，吊瓜籽油中脂肪酸主要有油酸、亚油酸、栝楼酸等 7 种，不饱和脂肪酸含量达 89.9 %，其特有的栝楼酸（十八碳三烯酸）达 25.4 %。毒理学试验结果显示 LD50 值高达 40 mL/kg 以上，慢性毒性三项试验的结果均为阴性，表明吊瓜籽油实际无毒。可见，富含栝楼酸的吊瓜子油有望开发成新资源食品。关键词 长兴吊瓜籽 脂肪酸组成 质谱 气相色谱 急性经口毒性试验 慢性毒性三项试验中图分类号：S38 文献标志码： 文章编号：Fatty Acid Composition Analysis and Toxicology Preliminary e

3、valuation of Trichosanthes bracteata seed oilWang Yaping1 Yang Liu2 Zhu Guangquan3 Shi Congguang3*( the Research Institute of Subtropical Forestry, CAF1, Fuyang Zhejiang, 311400)(Zhejiang quality testing station of forestry product2, Hangzhou 310023)(Zhejiang forest academy3, Hangzhou 310023)Abstrac

4、t Crude oil of Trichosanthes bracteata (Changxing Trichosanthes) seed was extracted, after dealing with methyl esterification, to determine the fatty acid composition by gas chromatography mass spectrometry (GC-MS) method, the 7 major fatty acids were identified by retrievaling mass spectrometry dat

5、abases and comparing standard substances. Using gas chromatography (GC-FID) to quantitatively determine the fatty acid composition, the results showed that the content of unsaturated fatty acids reached to 89.9%, the unique trichosanic acid is 25.4%. Crude oil of Changxing Trichosanthes seed was fil

6、tered to conduct continuous toxicological evaluation test, including mouse acute oral toxicity test and three chronic toxicity tests, the results showed that the LD50 value was more than 40 mL/kg, the results of three chronic toxicity tests were negative, which indicated that the oil was actually no

7、n-toxic. Therefore, combined with peoples long-term consumption custom, Changxing Trichosanthes seed oil is expected to be developed as a new resource food.收稿日期：2018-03-14作者简介：王亚萍，女，1978 年出生，助理研究员，经济林产品采后利用及质量控制 通讯作者：石从广，男，1980 年出生，副研究员，林木种质资源和遗传改良Key words Trichosanthes bracteata seed, fatty acid c

8、omposition, mass spectrum, gas chromatography, mouse acute oral toxicity test, three chronic toxicity test长兴吊瓜，又称长兴栝楼、吊瓜，属葫芦科（Cucurbitaceae）栝楼属（Trichosanthes）植物，经陈锡林等 1鉴定为大苞栝楼（Trichosanthes bracteata）的一个栽培种，已有百年栽培历史。长兴吊瓜籽营养丰富，炒制后香味浓、质地脆、口感好，食用后不上火，是炒货中之佳品，深受消费者的喜爱，自 1999 年开始规模化种植，很快在浙江省广泛栽培，2008年被国家

9、质量监督检验检疫总局批准实施地理标志产品保护。现已被引入江苏、江西、安徽、福建、广西、四川等省市栽培，成为一种新兴经济作物。目前对栝楼的研究报道较多，如栝楼的栽培繁育 2-4、栝楼资源的营养价值及利用 5,6、栝楼籽的营养及化学成分分析 7-10、栝楼籽油的理化特性及脂肪酸组成 11-13等，发现栝楼籽含有大量的三萜类、氨基酸、甾醇，这些成分均可入药，还含有大量的不饱和脂肪酸，如油酸、共轭亚油酸和共轭亚麻酸（即栝楼酸）等。共轭亚油酸具有抗癌、减肥、提高免疫力和改善血脂等一系列有益的生理功能，共轭亚麻酸具有对人类肿瘤细胞的毒性作用，能抑制癌症形成，改变脂代谢 14,15，降血脂、抗血栓等功能 1

10、6。而对长兴吊瓜的系统研究还鲜有报道，仅见史奎春等 5对其品种、营养和保鲜方面有相关研究，其开发利用技术还较为落后，产品仍停留在简单的炒制食品阶段，其药用价值尚未得到充分开发与利用。本研究通过对长兴吊瓜籽油的脂肪酸组分进行质谱（GC-MS）法定性分析和气相色谱（GC-FID）法定量测定，并用脂肪酸甲酯标准品对长兴吊瓜籽中的主要脂肪酸的质谱特征进行了分析归纳，以期为长兴吊瓜籽油的脂肪酸尤其是多不饱和脂肪酸的鉴定提供新的方法。此外，利用所榨取的长兴吊瓜籽油进行小鼠急性经口毒性试验和慢性毒性三项试验，判定其 LD50 值是否达到实际无毒的标准， 对应的 Ames、小鼠骨髓细胞微核、小鼠精子畸变三项试

11、验结果是否为阴性，为其食用安全性提供毒理学初步评价。同时也为拓展长兴吊瓜产业链，开发食用油新资源和功能性油脂提供理论基础。1 材料与方法1.1 试验材料长兴吊瓜籽：购自浙江省衢州市开化县，经鉴定无误。1.2 脂肪酸组分分析和含量测定1.2.1 仪器与试剂7890B型气相色谱仪、5977A型质谱仪（美国Agilent公司）；Laborota 4000 efficient旋转蒸发器（德国海道尔夫公司）；AB135-S型精密电子分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；Milli-Q Synthesis超纯水系统（美国Millipore公司）。脂肪酸甲酯标准品购于Sigma公司；甲醇、石油醚、异辛烷等试剂

12、均为分析纯，购于华东医药股份有限公司。1.2.2 长兴吊瓜籽油脂的提取吊瓜籽去种皮后，粉碎，取l0 g于250 mL锥形瓶中，用100 mL石油醚超声提取10 min，过滤，滤液经旋转蒸发除溶剂得吊瓜籽油脂，测得含油率为 38.33 %。1.2.3 脂肪酸甲酯化取1滴（约0.1 g）吊瓜籽油脂，加入5 mL异辛烷，待充分溶解加入 1 mol/L的KOH-甲醇溶液0.2 mL、摇匀，甲酯化处理5 min，然后加入硫氰酸钾试剂 1 g，振荡后静置待分层、取上清液供GC-MS 、GC-FID分析。1.2.4 脂肪酸 GC-MS 分析色谱条件：进样口温度为230 ，分流比为25:1。色谱柱为HP-IN

13、NOWAX石英毛细管柱（30 m 0.32 mm0.25m），载气为高纯氦气，恒流模式，流速为1 mL/min。柱温初始温度50 保持 1 min，以10 /min升温至250 ，保持5 min。FID 检测器温度为250 ，氢气40 mL/min，空气400 mL/min ，补充气氮气20 mL/min 。质谱条件：GC/MS接口温度280 ，电子轰击（EI）离子源，电离能量70 eV，离子源温度230 ，四极杆温度 150 ，扫描周期为2.84次/s ，质量扫描范围为 m/z为35500。1.2.5 定性与定量脂肪酸甲酯化样品经GC-MS分析，通过标准品对照和质谱数据库检索，并结合特征离子

14、对各组分进行定性分析；脂肪酸甲酯化样品经GC-FID分析，同时按峰面积归一法对各组分进行百分比定量测定，6次重复。1.3 毒理学试验1.3.1 样品及处理吊瓜籽油脂样品为淡绿色油状物，实验时以色拉油作溶媒配制成不同浓度的样品液供试。实验用 ICR 小鼠由浙江省实验动物中心提供，属清洁级，医学实验动物生产许可证号为 SCXK（浙） 2014-0001，实验动物使用许可证号为 SYXK（浙）2011-0166。实验动物饲料由浙江省实验动物中心提供，执行标准 GB 149252010。检测环境条件，温度范围2025 ，相对湿度范围 40 %-70 %。实验动物试验前在动物房环境中适应 35 d。1.

15、3.2 小鼠急性经口毒性试验参考食品安全性毒理学评价程序和方法 17和 GB 15193.12014，各剂量组浓度有所调整。选用健康、成熟，体重 1822 g ICR 小鼠 20 只，雌雄各半。1.3.3 慢性三项毒性试验 Ames 试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸变试验用 ICR 小鼠由浙江省实验动物中心提供，体重 25-30 g。雌雄小鼠随机分组，设 5 个体重剂量组，检测依据为食品安全性毒理学评价程序和方法 17，分别参考 GB 15193.12014 第 4，5，7 条。1.3.3.1 Ames 试验菌株选用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌，共 4 株，即TA97a；TA 98、

16、TA100、TA 102，由上海市疾病预防控制中心提供，经生物学鉴定合格后进行试验。试验采用平板掺入法，称取样品 0.50 g 于研钵中以 DMSO 研磨至 10.0 mL，于 0.103 MPa、105 灭菌 20min，以灭菌蒸馏水梯度稀释至各设定剂量。用 TA100 菌株的非代谢活化系统进行预实验，剂量为 5000 g/皿时未出现明显的增菌和抑菌现象，故试验时选择试验浓度为 8 g、40 g、200 g、1000 g、5000 g/皿 5 个剂量组，另设空白对照、溶剂对照和阳性对照组，每种菌株每个测试浓度设 3 皿平行，分别在加和不加 S9 条件下进行试验，重复试验一次。试验后直接计数培

17、养基上各菌株的回变菌落数。1.3.3.2 小鼠骨髓细胞微核试验ICR 小鼠按体重随机分为 5 组，分别为吊瓜籽油 2.5、5.0、10.0 g/kg 共 3 个剂量组，阴性对照组及阳性对照组。分别称取样品液 5.0、10.0、20.0 g，加色拉油分别配成 40 mL样品液。阴性对照组为色拉油，阳性对照组为环磷酰胺（40 mg/kg 体重），称取环磷酰胺80 mg，加蒸馏水溶解至 40 mL 备用。小鼠每组 10 只，雌雄各半，小鼠按 20 mL/kg 体重灌胃容量间隔 24 h 灌胃 2 次，于第二次灌胃后 6 h 脱臼处死，取胸骨骨髓制成骨髓片，甲醇固定，Giemsa 染色。镜检时每只动物

18、计数 1000 个嗜多染红细胞，计算微核千分率及PCE/NCE 值。1.3.3.3 小鼠精子畸变试验 设吊瓜籽油为 2.5、5.0、10.1 g/kg 体重 3 个剂量组，分别称取样品液 5.0、10.0、20.0 g，加色拉油分别配制成 40 mL 样品液。阴性对照组为色拉油，阳性对照组为丝裂霉素C（1.5 mg/kg 体重），称取丝裂霉素 C 2.0 mg，加蒸馏水溶解至 26.7 mL 备用。每组 5 只小鼠，小鼠按 20 mL/kg 体重灌胃容量以灌胃方式给予，连续 5 天，每天 1 次。于首次灌胃后第 35 d 脱臼处死，各组小鼠分别取两侧附睾，制成吸滤液直接涂片，自然干燥，甲醇固定

19、，用 1%伊红染色。高倍镜下观察精子形态并计数，每只小鼠计数完整精子 1000 条，计算精子畸形发生率。1.4 数据分析采用Excel 2007进行分析，并作图，计算标准误。利用 SPSS 18.0软件采用最小显著差异法（LSD ）多重比较对数据进行分析，并进行显著性差异分析。P0.01表示差异极显著；0.01P0.05表示差异显著；P0.05表示差异不显著。2 结果与分析2.1 长兴吊瓜籽油脂肪酸定性分析与定量测定结果运用GC/MS分析长兴吊瓜籽油的脂肪酸组成，得到总离子流色谱，通过标准品对照和质谱数据库检索，并结合特征离子进行定性分析，共测出长兴吊瓜籽油中含有油酸、亚油酸、栝楼酸等7种主要

20、脂肪酸，如表1所示。运用GC/FID对各组分百分比含量进行测定，在扣除溶剂峰后，按峰面积百分比对各组分相对含量进行计算，结果列于表1。长兴吊瓜籽油中的脂肪酸以不饱和脂肪酸为主，亚油酸含量最高，达33.4%，其次是油酸（30.3% ）和栝楼酸（包括栝楼酸-1和栝楼酸 -2，两者含量达25.3%），不饱和脂肪酸总量达90%。表1 长兴吊瓜籽脂肪酸成分测定结果峰号 保留时/min 定性方法 名称 CAS 号含量百分比/%（标准偏差）1 15.492 M,S 软脂酸( C16:0) 000112-39-0 6.638（0.012）2 17.272 M,S 硬脂酸( C18:0) 000112-61-8

21、 2.653（0.005）3 17.454 M,S 油酸(C18:1) 000112-62-930.275（0.038）4 17.508 M,S 反-油酸 (C18:1) 001937-62-8 0.873（0.002）5 17.851 M,S 亚油酸( C18:2) 000112-63-033.422（0.032）6 20.116 M 栝楼酸-1(C18:3) 1000336-42-6 23.574（0.028）7 20.247 M 栝楼酸-2(C18:3) 1000336-42-6 1.782（0.003）2.2 三烯及以上多不饱和脂肪酸的质谱特征BA图1 栝楼酸甲酯（9,11,13-十八

22、碳三烯酸甲酯）质谱图三烯酸甲酯通过双键迁移进行断裂产生环C 6H7+ 离子（m/z 79），此离子为三烯酸甲酯的基峰离子（形成此基峰离子的条件为脂肪链中至少有3个双键，且双键之间的间隔不得大于一个亚甲基）；同时羰基发生断裂，产生M-31离子；由此可以得到三烯酸甲酯的特征离子：m/z 79，M-31 +及分子离子M。图1A 为样品栝楼酸质谱图，图1B 为NIST11 库中栝楼酸质谱图，特征离子为m/z 79、261和292。多不饱和脂肪酸（三烯及以上）甲酯中碳链甲基端第一双键位置可以根据 离子C 5+2H2n+6+（n为甲基端到第一双键位置的碳原子数）进行判断；因此可以根据质谱图中m/z 108

23、、122、150和 192的强弱来判断多不饱和脂肪酸为n-3型、 n-4型、 n-6型和n-9 型 18,19。从该图可以看出 离子为m/z 108，表明其为n-3 型脂肪酸，并结合NIST11确定样品中该组分为栝楼酸甲酯（ 9,11,13-十八碳三烯酸甲酯）。2.3 小鼠急性经口毒性试验由表2可知，给样后实验动物未见明显症状与体征，7日内无死亡发生。小鼠经口急性毒性大于40.0 mL/kg体重。长兴吊瓜籽油按照食品安全性毒理学评价程序和方法中急性毒性试验，试验结果表明：雌雄两性小鼠LD 50均大于40.0 mL/kg体重，根据急性毒性（ LD50）剂量分级表分级，长兴吊瓜籽油属无毒类。表2

24、长兴吊瓜籽油的小鼠急性毒性试验结果统计性别 剂量分组 动物数 体重（g） 死亡动物数（mL/kg） （只） 始重 终重 （只）雌 40.0 10 19.30.7 27.61.8 0雄 40.0 10 19.50.5 31.01.5 02.4 Ames 试验长兴吊瓜籽油样品的Ames试验重复一次，各菌株回变菌落数见表3。从试验结果可见，同一剂量受试物同一菌落在加S9条件下比不加S9条件下回变菌落数多，且不同菌株回变菌落数有显著差异，按回变菌落数的多少排序，依次是TA102 TA100 TA97aTA98；不同剂量受试物随着剂量的增加，回变菌落数相应增加，但各剂量对应的值差异并不显著，在加与不加S

25、9条件下的回变菌落与阴性对照组（空白对照）相近似，而阳性对照（9AA、2,7AF 、NAN 3、2AAF 、MMC、1.8HAQ）回变菌落数均比阴性对照与各剂量组的回变菌落数至少高3倍以上，差异极其显著，以上结果表明长兴吊瓜籽油Ames试验检测结果为阴性。表3 长兴吊瓜籽油Ames平板掺入试验结果回变菌落数（XSD）TA97a TA98 TA100 TA102受试物 剂量(g/皿)-S9 +S9 -S9 +S9 -S9 +S9 -S9 +S9空白对照 0.0 116.324.7 143.39.0 34.73.8 46.04.4 146.08.2 199.06.9 274.017.3 308.3

26、21.8溶剂对照 0.0 111.321.2 148.715.1 33.33.8 42.03.0 139.014.1 186.06.0 268.318.0 302.317.28 116.020.1 164.316.4 31.33.1 42.75.7 143.017.1 180.015.1 258.318.4 311.716.340 122.313.9 175.013.0 33.33.8 46.03.6 156.313.5 191.012.3 274.016.4 317.311.7200 106.09.2 152.78.3 36.32.1 44.71.2 151.019.3 181.317.0

27、253.314.0 291.712.11000 140.316.1 167.318.6 33.72.1 43.02.0 138.77.4 170.78.1 289.218.7 302.326.7吊瓜籽油5000 160.05.3 171.76.5 30.32.5 45.73.1 176.020.1 181.019.5 282.721.0 301.024.8NAN3 2.0 / / / / 2906.798.7 / / /Dexon 50 2700.0294.6 1193.3133.2 883.3 75.12AAF 10 / 1690.0190.8 / 4033.3404.1 / 3096.72

28、07.9 / /1.8HAQ 25 / / / / / / / 953.365.1注：NaN 3（叠氮钠），Dexon （对二甲基氨基苯重氮磺酸钠（敌克松），2AAF（2-乙酰氨基芴），1.8HAQ（1.8- 二羟基蒽醌）2.5 小鼠骨髓细胞微核试验由表4可知雌雄各剂量组PCE/NCE比值不低于对照组的20%，实际上只有约2%的差距，表明此试验符合技术规范要求。用卡方检验统计，雌雄各剂量组与阴性对照组比，微核千分率均无显著性差异，而阳性对照组环磷酰胺对应的微核率则显著高于阴性对照组和各剂量组，其差异非常显著（P0.01）。表明长兴吊瓜籽油对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率未见明显影响，检测结果为阴性

29、。表4 长兴吊瓜籽油对小鼠微核率的影响性别 组别 剂量（g/kg) 鼠数 嗜多染红细胞数 微核细胞数 微核率（） PCE/NCE阴性对照 0.0 5 5000 7 1.40.5 1.010.07雌吊瓜籽油 2.5 5 5000 9 1.80.4 1.000.025.0 5 5000 10 2.01.0 0.990.0410.0 5 5000 9 1.80.8 0.980.02环磷酰胺 0.04 5 5000 95 19.02.0* 0.980.04阴性对照 0 5 5000 7 1.40.5 1.000.042.5 5 5000 8 1.60.5 1.000.015.0 5 5000 9 1.

30、80.4 0.990.02吊瓜籽油10.0 5 5000 10 2.00.7 1.000.02雄环磷酰胺 0.04 5 5000 95 19.01.6* 0.970.04注：* 表示P0.01 （与阴性对照组比）2.6 小鼠精子畸形试验由表5可知，各剂量组与阴性对照组（空白对照）比较精子畸形率差异不大，各剂量组间小鼠精子畸形发生率均无显著差异性，而阳性对照组MMC则明显高于阴性对照组和各剂量组，其差异非常显著（P0.01），表明长兴吊瓜籽油对小鼠精子畸形发生率未见明显影响，检测结果为阴性。表5 长兴吊瓜籽油对小鼠精子畸形发生率的影响畸形精子数组别剂量（g/kg）鼠数观察精子数 无定形无钩折叠胖

31、头香蕉双头双尾小计 畸变率%阴性对照 0 5 5000 60 9 / 8 5 1 / 83 1.660.402.5 5 5000 66 11 / 6 4 / 1 88 1.760.465.0 5 5000 78 10 / 8 2 2 / 100 2.000.43吊瓜籽油10.0 5 5000 80 12 / 8 1 2 / 103 2.060.53MMC 0.0015 5 5000 240 31 / 26 13 1 / 311 6.220.41*注：MMC（丝裂霉素 C），* P0.01（与阴性对照组比）3 结论与讨论3.1 GC/MS 与 GC/FID 法测定脂肪酸组分GC/MS作为脂肪酸分

32、析的一种有效方法，操作简单快速，同时在无标准品情况下，结合特征离子的定性分析，其结果比一般方法更准确可靠。长兴吊瓜籽油脂肪酸组分主要有7种，如油酸、亚油酸和栝楼酸等，不饱和脂肪酸占比达90，其中栝楼酸-1和栝楼酸-2 共占25.4，栝楼酸是十八碳三烯酸，也称共轭亚麻酸，其衍生物栝楼仁二醇对靶向细胞有毒性作用，具有抗肿瘤活性，这种脂肪酸在其他生物中很少含有。本研究测定的长兴吊瓜籽中的主要脂肪酸组分与史奎春 5研究结果相近，含有软脂酸、硬脂酸、油酸、栝楼酸等脂肪酸，就品种而言与其应属同一品种。与曾益坤 13、闫永婷 20等人测定的栝楼脂肪酸组分的定性结果一致，但脂肪酸组分含量差异较大，可能有以下原

33、因：一是样品来源不同，即样品差异可能对测定结果造成一定影响。根据植物学专家的仔细考证，长兴吊瓜被认为是大苞栝楼（T. bracteata）的一个栽培品种 1，与常见的栝楼（T. kirilowii）存在较大差别，东亚分布中心的葫芦科分类一直是个难题 21，这应该是脂肪酸组分含量差异较大的主要原因；二是定量测定时所用的检测器不同，前人研究采用的是MS检测器，该检测器属于浓度型检测器，响应值以离子数量来衡量，而本研究采用的是FID检测器，该检测器属于质量型检测值，响应值以被测有机物质量来衡量，二者有质的差别。相关报道把栝楼中含有的化学成分主要分为三大类 18,22，包括有机酸类（脂肪酸和不皂化物）

34、、蛋白质类（核糖体蛋白、凝集素和氨基酸）、矿物质及微量元素。本研究主要对与栝楼同属的长兴吊瓜籽中的脂肪酸做了定性和定量研究，也为长兴吊瓜的资源综合利用和脂肪酸的鉴定提供了一定的理论依据和参考。3.2 长兴吊瓜籽油的毒理学初步评价第一阶段急性经口毒性试验结果发现，长兴吊瓜籽油对应的小鼠LD 50值稳定在40 mL/kg体重以上，雌性和雄性小鼠在喂饲样品后均未出现死亡情况，根据急性毒性剂量分级表分级，长兴吊瓜籽油属于无毒类，对小鼠无毒害。每个 LD50 值都有其可信限范围，在进行小鼠急性经口毒性试验时，剂量的分组和小鼠的健康状况与否会影响其死亡率，而死亡率决定着 LD50 值的大小，本研究中无论是

35、小鼠急性经口毒性试验还是其他毒理试验，均未出现小鼠死亡的情况，说明长兴吊瓜籽油的 LD50值可信限上限远在 40 mL/kg 体重以上，也表明其在理论上具有可食用性。鉴于生活中人们有食用长兴吊瓜籽的习惯，因此将其油脂开发成新资源食品具有可行性。第二阶段 Ames 试验、小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验结果均为阴性，不同剂量组与阴性对照组相比，各指标对应的值差别不大，但与阳性对照组的值差异显著。这表明在本次实验条件下，长兴吊瓜籽油样品未显示有致突变性，对小鼠健康基本无害。综上可见，利用GC/MS与GC/FID法相结合定性和定量测定长兴吊瓜籽油脂肪酸组分和相对含量，此方法简单易行，且检测结果

36、可靠性高。长兴吊瓜籽油中富含的栝楼酸对人体具有极好的保健作用，有开发成高端食品或保健品的巨大潜力。石从广等 23研究表明，越南安息香种籽精炼油对应的小鼠LD 50值最高可达17.10 mL/kg体重，大鼠的LD 50值均为20.00 mL/kg体重，达到理论无毒的标准，白花树种籽油脂精炼前后的Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验3项结果均为阴性；与之相比，长兴吊瓜籽油小鼠急性经口毒性试验结果显示为实际无毒，对应的小鼠LD 50值远高于越南安息香粗练油和精炼油对应的值，Ames 试验、小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验结果均为阴性，表明长兴吊瓜籽油满足国家新资源食品安全评价的

37、前期规程，可以开发成新资源食品。参 考 文 献1 陈锡林,浦锦宝. 浙江吊瓜原植物鉴定研究J.浙江中医杂志, 2014, 49(8): 615-616CHEN Xilin, PU Jinbao. Study on the original pant identification of Zhejiang Trichosanthes J. Zhejiang Journal of Traditional Chinese Medicine, 2014, 49(8): 615-6162 刘伟，刘大会，史国玉，等. 栝楼棚架-丹参立体高效栽培模式研究J.中国现代中药，2014，16（2）：130-132L

38、IU Wei, LIU Dahui, SHI Guoyu, el at. The study of cultivation process of Trichosanthes kirilowii and Salvia miltiorrhizaJ. Modern Chinese Medicine, 2014, 16（2）:130-1323 诸秋南，伍国强. 吊瓜子繁育及高产栽培技术J. 现代园艺，2010,（12）：20-22ZHU Qiunan, WU Guoqiang. Breeding and high yield cultivation techniques of Diaogua seed

39、J. Xiandai Horticulture, 2010,(12): 20-224 任静，何家庆. 栝楼子资源的利用及其价值J. 中国野生植物资源，2001，(6)：21-22REN Jing, HE Jiaqing. A Study on resources of the seeds of Trichosanthes for its utilization and valueJ. Chinese Wild Plant Resources, 2001,(6)：21-225 史奎春. 食用栝楼的种质鉴定、营养评价及保鲜研究D. 南京师范大学，2007SHI Kuichun. Studies o

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42、J. 广西科学，2004,11(3)：266-268，272HU Xinghua, LI Guobin, CAI Aihua, et al. Nutritional components analysis of three kinds of Trichosanthes seedsJ. Guangxi Sciences, 2004,11(3)：266-268,2729 YANG Jing, ZhOU Ciqin, ZHENG Jusheng. Nutritional compositions in Trichosanthes Kirilowii Maxim seeds and seed oils

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45、:11-1212 韦传宝，祁伟，刘昌利，等. 栝楼籽仁油的特性和抗氧化剂的抗氧化作用 J. 中国粮油学报,2009,24（3）：92-94WEI Chuanbao, QI Wei, LIU Changli, et al. Trchosanthes kiriowii Maxim seed oil: properties and antioxidation effect of antioxidants addedJ. Journal of the Chinese Cereals and Oils Association, 2009,24(3): 92-9413 曾益坤，黄秀娟，王兴国. 栝楼籽油理

46、化性质及其脂肪酸组成分析 J. 中国油脂，2007,32（10）：80-82ZENG Yikun, HUANG Xiujuan, WANG Xingguo. Physicochemical property and fatty acid composition of Trichosanthes kirilowii Maxim. seed oilJ. China Oils and Fats, 2007,32(10): 80-8214 吴裕，何美莹，张凤良，等. 野生油料树种硬核脂肪酸含量群体变异分析 J. 西北林学院学报，2015,30（6）：99-103WU Yu, HE Meiying, Z

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