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实验一底物浓度对酶促反应的影响(1)5页.docx

实验一 底物浓度对酶促反应的影响一、 实验目的掌握底物浓度对酶活性的影响,了解碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, AKP)的Km值的测定原理和方法,理解Km值的意义。二、实验原理在温度、pH及酶浓度等恒定的条件下,底物浓度对酶的催化作用有很大的影响。当底物浓度较低时,酶促反应速度V随底物浓度S的增高而显著加快,随着底物浓度渐高,反应速度加快程度渐小,当底物浓度增加到一定程度以上时,再增高底物浓度,反应速度亦不再增加,成为该条件下极限最大反应速度Vmax。底物浓度与反应速度的这种关系可以用下列米曼(Michaclis-Menten)氏方程式表示。V=或Km=S( 1)式中,Km为米氏常数。当V=Vmax/2时,则Km=S,即米氏常数是反应速度等于最大速度一半时底物物浓度的数值。如图所示: VVmax Km S图1 底物浓度与酶促反应

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