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实验十一 蛋白质脱盐(透析和凝胶过滤)在蛋白质的研究中,经常要进行蛋白质脱盐,即将蛋白质同其它盐类小分子分离开。蛋白质脱盐的方法很多,各有优缺点。以下仅介绍常用的透析和凝胶过滤方法,可根据实验条件和要求选用。(一)蛋白质透析一. 目的学习透析的基本原理和操作。二. 原理蛋白质是大分子物质,不能透过透析膜而小分子物质可以自由透过。在分离提纯蛋白质的过程中,常利用透析的方法使蛋白质与其中夹杂的小分子物质分开。三. 仪器、试剂、材料1. 仪器烧杯;玻棒;离心机;离心管;冰箱;电炉。2. 试剂1氯化钡溶液;硫酸铵粉末;1mol/L EDTA;2%NaHCO3。3. 材料透析管(宽约2.5cm,长1215cm)或玻璃纸;皮筋;鸡蛋清溶液:将新鲜鸡蛋的蛋清与水按1:20混匀,然后用六层纱布过滤。四. 操作方法1. 透析管(前)处理:先将一适当大小和长度的透析管放在1mol/L EDTA溶液中,煮沸10分钟,再在2 NaHCO3溶液中煮沸10分钟,然后再在蒸馏水中煮沸10分钟即可。2. 取5ml蛋白质溶液于离心管中,加4g
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