细胞自噬诱导实验报告细胞自噬的实验观察，主要有四种方法。1、提取总RNA,通过Real-timePCR分析相关基因ATG4、ATG5和AT7G的表达;2、提取总蛋白，通过Westernblotting分析LC3的脂化；3、构建GFP-LC3表达载体，通过细胞转染利用荧光显微镜观察LC3颗粒的聚集;4、制备电镜样品，直接观察自噬体的形成。一、pEGFP-C2-LC3质粒的提取与鉴定实验原理一、实验原理质粒（Plasmid）是一种染色体外的稳定遗传因子，为双链、闭环的DNA分子，并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中，它具有自主复制和转录能力,能在子代细胞中保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息。质粒的复制和转录要依赖于宿主细胞编码的某些酶和蛋白质，质粒的存在使宿主具有一些额外的特性,如对抗生素的抗性等。质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的。与天然质粒相比,质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因（如抗生素抗性基因）和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列,并去掉了大部分非必需序列,使分
