1、 微生物检查体系的调整2010版 2015版分类依据 按微生物类别分 按营养条件分质控分类 细菌、真菌 需气、厌气菌检验体系 选择培养、或者人为区分 直接与培养条件对应项目1 细菌数营养琼脂需氧菌总数胰酪大豆胨琼脂（TSA）项目2 霉菌及酵母菌总数玫瑰红钠琼脂霉菌及酵母菌总数沙氏葡萄糖琼脂（SDA)评价 容易造成漏检 简便、严谨微生物检测环境变化2010版 2015版检测环境 应在洁净度10000级背景下的局部100级单向流空气区域内进行应在受控洁净环境（不低于D级洁净环境）下的局部洁净度不低于B级单向流空气区域内进行 其他要求： 检验过程及环境既要最大可能防止样品受污染 要防止检验过程 对环
2、境 人 造成的 区域的 及区分 微生物 验 的 可控 菌项目变化培养 体系 2010版 2015版变化大 菌 菌大 菌 大 菌沙菌 沙菌单currency1菌 单currency1菌“葡萄菌 “葡萄菌 变化fi菌 fi菌fl 菌 fl 菌菌品微生物 度检查：微生物数”要求要：(1) 微生物数系”于能在氧条件下生的 细菌 真菌的数 检查可”检查 检测 其于 的检查 （9201）品微生物检验验 (2) 环境洁净度应 要求 检测：不低于B级的单向流空气区域、 、环境 USP 1117 验 分区 (3) ： 品的菌 的 及 的 及与容 (4) 选择：据 品 化 微生物 度 选择 （ 、 过 MPN）(
3、5) 菌 ：（9203）品微生物 验 质 于菌 的要求 (6) 对：微生物检查需进行 对 验 对菌生 应进行 调查 验菌2010版 2015版大 菌 单currency1菌“葡萄菌、 草芽孢杆菌、fl 菌、黑曲霉“葡萄菌、 草芽孢杆菌、fl 菌、黑曲霉(1)胰酪大豆胨琼脂：“葡萄菌、 草芽孢杆菌、单currency1菌、fl 菌、黑曲霉 (2)胰酪大豆胨肉汤：“葡萄菌、单currency1菌、 草芽孢杆菌 (3)沙氏葡萄糖琼脂：fl 菌、黑曲霉 微生物数”培养 2010版 2015版1、营养琼脂”于细菌数2、玫瑰红钠”于霉菌 酵母菌数3、酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂”于酵母菌数4、菌液 备”稀释液：
4、0.9氯化钠溶液1、胰酪大豆胨琼脂 胰酪大豆胨肉汤”于需氧菌总数测2、沙氏葡萄糖琼脂”于霉菌 酵母菌总数测3、沙氏葡萄糖琼脂+生 ”于细菌超 引起霉菌 酵母菌总数超 ”4、菌液 备”培养 ：PH7.0菌氯化钠-蛋fl胨缓冲液或0.9菌氯化钠溶液2010版 2015版验菌1、营养琼脂：大 菌、“葡萄菌、 草芽孢杆菌2、玫瑰红钠琼脂：fl 菌黑曲霉1、胰酪大豆胨琼脂：“葡萄菌、草芽孢杆菌、单currency1菌、fl 菌、黑曲霉2、胰酪大豆胨肉汤：“葡萄菌、单currency1菌、 草芽孢杆菌3、沙氏葡萄糖琼脂：fl 菌、黑曲霉培养 适” 检查2010版 2015版检查范围 固体培养 微生物数”的
5、成品培养 、由脱水培养 或按 配 的固体 液体培养 加菌 50100CFU 不大于100CFU培养度 营养琼脂：3035玫瑰红钠：2328胰酪大豆胨琼脂TSA：3035培养胰酪大豆胨肉汤TSB： 3035培养沙氏葡萄糖琼脂SDA：2025培养培养时间 细菌：48h真菌：72h细菌不超过72h 真菌不超过5天可接受 70%固体培养 （与对培养 ）：50%200%（0.52）液体培养 （与对培养 比较）：生良好 建议：培养 呈混浊的液体 或线于应的分离 板上 培养后呈现型菌落培养 适” 检查培养 名称 沙氏葡萄糖琼脂+生 （当细菌超 引起霉菌 酵母菌总数超 ”）菌 检查 取已 菌的SDA注 ”于2
6、025培养57天 应菌落生 验”菌抑菌 检查： 草芽孢杆菌、“葡萄菌、单currency1菌促生能力：fl 菌、黑曲霉常”生 1、庆大霉 ：广谱 对G- G+菌比较好的菌 ”2、氯霉 ：广谱 对G-菌 ”强；对G+菌 ”不及青霉 与四环 接 抑菌 ：接不小于100cfu 验”菌 促生能力：接不大于100cfu 验”菌 适” 检查fl 菌、黑曲霉于2025培养不大于5天 与对培养比较 恢复率在50%200%之间 草芽孢杆菌、“葡萄菌、单currency1菌应不得生 数适” 验1、常”的 液 备(1)水溶 品 (2)水不溶 油脂类 品 (3)油脂类 品(4)需要殊 备 液的 品： 、 溶及结 溶
7、、气雾 喷雾 、贴 2010版 2015版(1)PH7.0菌氯化钠-蛋fl胨缓冲液(2)PH7.2菌磷酸 缓冲液(3)PH6.8菌磷酸 缓冲液（”于溶 ）或PH7.6菌磷酸 缓冲液（”于结 溶 ）(1)PH7.0菌氯化钠-蛋fl胨缓冲液(2)PH7.2菌磷酸 缓冲液(3)PH6.8菌磷酸 缓冲液（”于溶 ）或PH7.6菌磷酸缓冲液（”于结 溶 ）(4)增加胰酪胨大豆肉汤培养 不局 上述稀释液2、接 稀释2010版 2015版验组 液 菌液同时加入 液 加入 验菌液 混匀 使每张 所 过的 液 含菌 不大于100cfu 品对组 液直接加入 稀释也菌液同 验组 （ 国殊 的 协调案要求）菌液对组直接加入菌液到 不含 及 的应稀释液 液 按 验组 对组稀释 对组 、 及 的稀释液 加入 菌液
