免疫组织化学技术(ABC法)大鼠脊髓冰冻切片或细胞爬片依次入含3%Triton-x100和0.03%也02的0.01%磷酸盐缓冲液(PBS,pH7.4)，室温3Omin；含3%牛血清白蛋白(BSA,Sigma)的PBS,室温30min；豚鼠抗HAP1抗体(1:30000),4C孵育48h；PBS漂洗3次，每次10min；生物素化羊抗豚鼠IgG(1:200)室温2小时；PBS漂洗3次，每次10min；ABC复合物(1:100),2小时；PBS漂洗3次，每次10min；含0.03%DAB和0.006%H2O2的Tris盐酸缓冲液(pH7.6)室温13min；常规脱水、透明、树脂封片,显微镜观察、拍照。以上免疫染色以PBS缓冲液替代一抗作阴性对照。CDEControlsi-RNA鞘内注射HAPl-siRNA后大鼠脊髓HAP1表达水平的变化。A示对照组大鼠脊髓背角HAP1免疫反应性，B示RNAi组大鼠脊髓背角HAP1免疫反应性强度减弱。C示RNAi后大鼠脊髓HAP1表达水平的免疫印迹检测。D示RNAi后大鼠脊髓背角免疫反应强度变化的统计学分析，*示与对照组比较，P0.0
