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琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物ppt课件.ppt

实验二 琼脂糖凝胶电泳检测PCR 产物 1. 实验目的2. 实验原理 3. 实验仪器、材料与试剂 4. 实验步骤 5. 实验结果及讨论 实验目的 v 了解琼脂糖凝胶电泳的原理v 掌握琼脂糖凝胶的制作及进行电泳的方法 实验原理 v 凝胶电泳是分离和纯化DNA 片段最常用的技术。根据制备凝胶的材料,分为琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺电泳。 v 琼脂糖凝胶电泳是基因工程操作中常规的实验方法,它能检测少量的DNA (如用肉眼观察,可检测到10 ng 的DNA ),且检测的范围很广。 琼脂糖是一种天然聚合长链状分子,沸水中溶解,45 开始形成多孔性刚性滤孔,凝胶孔径的大小决定于琼脂糖的浓度。 DNA 分子在碱性环境中带负电荷,在外加电场作用下向正极泳动。DNA 分子的迁移速度与相对分子质量的对数成反比。v 琼脂糖是一种线性多糖聚合物。v 浓度越高,孔隙越小,其分辨能力就越强。琼脂糖浓度琼脂糖浓度(%)(%)线型线型DNADNA分子的分离范围分子的分离范围(Kb)(Kb)0.3 0.3 5 5 60 600.6 0.6 1 1 20 200.7 0.7 0.8 0.8 10 100.9 0.9 0.5 0

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