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蛋白质分离技术-电泳.PPT

1、 蛋白质分离技术-电泳上海交通大学医学院倪培华 副教授概 述 凝 泳:由 脂、 脂糖、淀粉 及聚丙胶电 琼 琼 胶 烯酰胺等物 作支持体的 泳。质 电 特点:1.可以制成非常均 的凝 , 点在凝 的孔匀 胶 带电质 胶中泳 。动2. 泳操作方法 便, 泳速度快电 简 电3. 分辨率高,重 性好, 泳 晰。复 电 图谱清4. 适用于生化,免疫等定性定量 定测琼脂糖凝胶天然琼脂(agar):又名琼胶、菜燕、冻粉 从石花菜及其它红藻类植物提取出来的一种线状高聚物。琼脂糖(agarose)琼脂胶(agaropectin) Acid sulfateCarboxylic acid groups在电场作用下

2、能产生较强的电渗现象 脂糖琼半乳糖及其衍生物 成的中性物 ,不构 质荷带电琼脂糖链依分子内和分子间氢键及其它力的作用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束,构成大网孔型凝胶。 D-半乳糖 3,6-脱水-L-半乳糖琼脂糖凝胶的特点(一)优点1.因不含硫酸根和羧基,几乎消除了琼脂的电渗2.对蛋白质吸附极微,故无拖尾现象。3.凝胶结构均匀,孔径较大,可用来分离酶的复合物、核酸、病毒 等大分子物质。4.透明度较好,可直接或干燥成薄膜后进行染色。5.不吸收紫外光,可直接利用紫外光吸收法作定量测定6.有热可逆性( ) 点1. 度 , , 度不 。2. 染,不 , 用 。3.琼脂糖 上的 带 ,电 后定染色。4.currency1currency1“,分子作用, 带。 fi 用1. fl用 大分子的核酸、核蛋白等的分离、 定2. 用 LDH、CK等”酶的分离测3. 不” 的脂蛋白 、病等

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