项目名称基于毛细管电泳技术筛查中药扩血管活性成分的研.DOC

1、1项目名称：基于毛细管电泳技术筛查中药扩血管活性成分的研究和应用推荐单位（专家）：陕西省教育厅项目简介：项目立项背景：近年来，人们广泛应用生物模型及药物作用靶标进行药物筛选的研究工作，已经建立的药物筛选模型主要有整体动物模型、受体模型、细胞模型、基因芯片技术和色谱技术等。这些方法各具优势，也存在各自的不足，其共同缺陷是样品须经过纯化处理、筛选周期长等。虽然亲和色谱等方法也可获得药物-靶标之间的结合常数，但存在受体固定相制备成本较大的缺陷，而毛细管电泳（CE）微量操作的特征恰好解决了这一问题；且不需要进行样品纯化、分析速度快、可在生理环境或接近生理环境下运行，可获得较为真实的生物分子间相互作用信

2、息。有望发展成为一种非常有潜力、高效、准确的药物筛选新手段。然而，CE 在药物与生物分子相互作用研究中还面临一些问题：从研究对象上讲，对生物酶及运输蛋白（血清白蛋白）的研究较为广泛，但对药物在人体内的主要作用靶点即受体的研究还有待深入；从 CE本身来讲，研究药物-受体相互作用时存在受体经非定向固定化反应键合到毛细管内壁后可能丧失活性等不足之处。为了克服受体等功能蛋白非定向固定化产生的弊端，其定向固定化已成为发展方向，研究结果表明，生物大分子的定向固定化可以显著提高其稳定性和生物活性。但是，该方法尚未应用到毛细管电泳药物筛选研究中。科学价值：本项目通过 2-AR 分子胞外结构域 N-末端含有的

3、2 个糖基（此区域与配体结合的特异性无关且远离跨膜区） ，将其定向键合在毛细管内壁，建立了受体在毛细管内壁的定向键合新方法；并建立了定向固定化受体键合量的定量测定新方法；表征了定向和非定向固定化受体的生物活性；以与受体有特异性及非特异性作用的药物为例，阐明了受体定向键合在药物筛选中的先进性、选择性、重复性和可靠性；建立了归一化容量因子、结合常数等多参数方法评价受体对药物选择性作用；以具有明确抗心血管疾病功效但药效物质尚待深入研究的赤芍为例，对其扩血管活性成分进行筛选，得出了各提取物与 2-AR 作用活性强弱顺序，发现 B18-19-与 2-AR 之间存在较强作用力， 并结合在线质谱联用技术进行

4、结构鉴定。建立以 G-蛋白偶联受体毛细管电泳为核心的扩血管活性成分筛选新方法，可为药物活性成分的毛细管电泳高通量筛选研究提供思路，对于合理解释药物的作用机理及开发新型抗心血管疾病药物具有重要意义；可加快抗心血管疾病药物的研发步伐，降低心血管疾病死亡病例。同行引用及评价情况： 在此基础上，发表相关论文 40 余篇，其中 SCI 检索 13 篇，EI 3 篇，专著 1 部；培养青年教师 3 人，1 人博士在读，培养本科生 50 余名；所发论文被 Analytical Chemistry、Talanta、Journal of Chromatography A 等权威期刊引用，其中浙江大学 Wang

5、Yi 教授在 molecule 期刊指出该项目所建方法是从天然产物中筛选活性组分的一种非常有潜力的方法；意大利 Sassart 大学 Zinellu 教授在权威期刊Journal of Chromatography A 中指出本项目所建方法为研究相互作用的有效方法，其他论文也被多次引用，证明了该项目研究成果的先进性。2主要完成人情况表：姓名 刘春叶 技术职称 教授 排名 第一工作单位 西安医学院 完成单位 西安医学院曾获科技奖励情况2015 年 3 月作为第一完成人获得陕西省教育厅颁发的陕西高等学校科学技术奖二等奖（项目名称：心血管类药物的提取分离、活性评价及筛选研究）。本人对本项目主要学术贡

6、献：（限 300 字）建立了毛细管内壁 2-AR 键合量的定量分析方法；采用亲和毛细管电色谱法，以归一化容量因子、结合常数、结合位点数等为参数，对药物及赤芍提取物与受体的相互作用进行测定，从而对活性进行评价。姓名 张剑 技术职称 讲师 排名 第二工作单位 西安医学院 完成单位 西安医学院曾获科技奖励情况2015 年 3 月作为第二完成人获得陕西省教育厅颁发的陕西高等学校科学技术奖二等奖（项目名称：心血管类药物的提取分离、活性评价及筛选研究）。本人对本项目主要学术贡献：（限 300 字）承担受体非定向键合条件的优化，包括反应物浓度、反应温度、微波功率、微波时间等对受体键合量的影响；根据靶点 2-

7、AR 受体已知阳性药物为参考，尝试合成系列待筛选化合物。姓名 苗延青 技术职称 副教授 排名 第三工作单位 西安医学院 完成单位 西安医学院曾获科技奖励情况2015 年 3 月作为第三完成人获得陕西省教育厅颁发的陕西高等学校科学技术奖二等奖（项目名称：心血管类药物的提取分离、活性评价及筛选研究）。本人对本项目主要学术贡献：（限 300 字）3承担受体定向键合条件的优化，包括反应物浓度、反应温度、微波功率、微波时间等对受体键合量的影响；根据靶点 2-AR 受体已知阳性药物为参考，尝试合成系列待筛选化合物；承担了键合毛细管的红外表征、扫描电镜等定性表征，并对所得结果进行分析。4姓名 卫引茂 技术职

8、称 教授 排名 第四工作单位 西北大学 完成单位 西北大学曾获科技奖励情况2015 年 3 月作为第四完成人获得陕西省教育厅颁发的陕西高等学校科学技术奖二等奖（项目名称：心血管类药物的提取分离、活性评价及筛选研究）。本人对本项目主要学术贡献：（限 300 字）从家兔体内获取受体 2-AR 受体并进行纯化，指导受体在毛细管内壁的定向键合。姓名 张雪娇 技术职称 副教授 排名 第五工作单位 西安医学院 完成单位 西安医学院曾获科技奖励情况2015 年 3 月作为第三完成人获得陕西省教育厅颁发的陕西高等学校科学技术奖二等奖（项目名称：心血管类药物的提取分离、活性评价及筛选研究）。本人对本项目主要学术

9、贡献：（限 300 字）承担受体定向键合条件的优化，包括反应物浓度、反应温度、微波功率、微波时间等对受体键合量的影响；根据靶点 2-AR 受体已知阳性药物为参考，尝试合成系列待筛选化合物；承担了键合毛细管的红外表征、扫描电镜等定性表征，并对所得结果进行分析。5姓名 杨黎燕 技术职称 教授 排名 第六工作单位 西安医学院 完成单位 西安医学院曾获科技奖励情况本人对本项目主要学术贡献：（限 300 字）以索氏提取法对赤芍中活性成分进行分离提取；利用 Box-Behnken 中心组合试验设计和响应面分析法，对提取条件进行优化；对药物与受体相互作用进行研究。姓名 张寒 技术职称 副教授 排名 第七工作

10、单位 西安医学院 完成单位 西安医学院曾获科技奖励情况2015 年 3 月作为第七完成人获得陕西省教育厅颁发的陕西高等学校科学技术奖二等奖（项目名称：心血管类药物的提取分离、活性评价及筛选研究）。本人对本项目主要学术贡献：（限 300 字）确定以赤芍提取物为心脑血管药物筛选目标，并参与赤芍、丹参的微波辅助提取方法的优化与评价。6代表性论文专著目录1.不超过 10 篇代表性论文、专著序号论文、专著名称/刊名/作者影响因子年卷页码年( 卷):页码发表年月通讯作者/第一作者(中文名)SCI 他引次数他引总次数是否国内完成1 毛细管电泳在药物分析中的应用，西北工业大学出版社，刘春叶 2013 2013

11、.09 刘春叶2A Microfluidic Paper-Based Device to Assess Acetylcholinesterase Activity. . Electrophoresis. Liu CY, Gomez F.A. 2.742017, 38, 1002-1006 2017.04刘春叶 2 2 否3Research on drug-receptor interactions and prediction of drug activity via oriented immobilized receptor capillary electrophoresis. Electr

12、ophoresis. Liu C.Y., Zhang X.J., Jing H., Miao Y.Q., Zhao L.Z., Han Y., Cui C.X.2.742015, 36(19): 2433-2441 2015.09刘春叶 2 2 是4Modified CaO Catalyzed Heterogeneous Synthesis of 3,5-diphenyl-4,5-dihydroisoxazole. J. J. Chem. Soc. Pak. Miao Y.Q., Zhang X.Q., Liu C.Y. 0.332015, 37(4): 739-745 2015.04苗延青

13、0 0 是5Determination of Polymer Molecular weight and gyration radius of DNA by Capillary Electrophoresis. Analytical Letters . Liu C.Y., Wei Y.M., Yang L.Y., Yang L.Y., Chen W. 1.152013, 46(5): 776-789 2014刘春叶 0 0 是6nteraction between Isoprenaline Hydrochloride and BSA in Capillary Zone Electrophores

14、is and Affinity Capillary Electrophoresis. J. Pharmazie. Liu C.Y., Wei Y.M., Miao Y.Q., Miao Y.Q., Zhang Y.Y.1.002012, 67: 839-843 2012刘春叶 5 5 是7Effects of frying and microwave heating on decomposition of benzoyl peroxide in flour. Cereal Chemistry. Liu C.Y., Zhang J., Bei Q., Miao Y.Q., Yang L.Y. 1

15、.422011, 88(4): 352-355 2011刘春叶 1 1 是8Tris(3-hydroxyimino-1-methylindolin-2-one) monohydrate. Acta Crystallographica Section E. Miao YQ, Zhang XQ, Liu CY, You Jing. 0.402011, E67, o1291 2011 苗延青 3 3 是9Poly(5-3,5-dinitrobenzoato)rubidium. J. Acta Crystallographica Section E. Miao YQ, Zhang XQ, Liu CY, You Jing. 0.402011, E67, m1002 2011苗延青 3 3 是10 Poly(-3,5-dinitrobenzoato)(-3,5-dinitrobenzoic acid)rubidium. Acta Cryst. Miao YQ, Fan T. 0.402011. E67, m1040 2011苗延青 4 4 是