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质粒DNA的碱变法提取 分子生物学实验.doc

质粒DNA的碱变法提取、纯化和检测史倩110级生命基地同组者:阎珍珍、张姗一、实验目的1.利用碱变法从大肠杆菌DH5(E.coli DH5)中提取pUC19质粒2.学习并掌握质粒DNA提取的原理、纯化和检测方法及琼脂糖凝胶电泳技术二、实验原理1.质粒概述:质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位,现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DNA分子。在基因工程中质粒常被用做基因的载体。目前,已发现有质粒的细菌有几百种,已知的绝大多数的细菌质粒都是闭合环状DNA分子(简称cccDNA)。细菌质粒的相对分子质量一般较小,约为细菌染色体的0.5%-3%,大小在1Kb-200Kb之间。质粒由于分子小、便于分离和提取,在DNA重组中,质粒或经过改造后的质粒可通过连接外源基因构成重组体,携带目的基因进入细菌、动物细胞或植物体内进行扩增与表达,因此是基因工程中一种非常重要的载体,质粒特征的分析已被广泛用于细菌种属鉴定、耐药性、毒力及同源性分析。近年来由于基因芯片技术的出现,质粒基因探针的开发和应用也得到了飞速的发展,所以这就要求

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