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分子荧光分析方法制作人:杨文丽第一节 概述n 一、分子荧光的定义及发展n 二、分子荧光的特点及应用n 三、分子荧光与紫外可见分光光度法的异同第二节 分子荧光法的基本原理n 一、荧光的产生n 二、激发光谱和荧光光谱n 三、荧光与物质的分子结构 已经知道,荧光是在一定波长光照射下,某些分子受到激发后发出光量子所致。对一种特定的分子来说: 哪些波长光使之激发产生荧光?哪个波长激发后所产 生的荧光最强? 激发光谱 一定波长的激发光使其产生的荧光哪个波长下最强? 荧光光谱 可由实验测定物质分子的激发光谱与荧光光谱来说明。激发光谱与荧光(发射)光谱n 一、荧光的检测n 光源发出的紫外可见光通过激发单色器分出不同波长的激发光,照射到样品溶液上,激发样品产生荧光。样品发出的荧光为宽带光谱,需通过发射单色器分光后再进入检测器,检测不同发射波长下的荧光强度F。由于激发光不可能完全被吸收,可透过溶液,为了防止透射光对荧光测定的干扰,常在与激发光垂直的方向检测荧光(因荧光是向各个方向发射的)。 吸收池 光源检测器单色器信号显示系统单色器荧光激发光谱与荧光(发射)光谱1.激发光谱excitation spect
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