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流式细胞分析课件.ppt

第十章 流式细胞分析 流式细胞术的定义:是一种对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行多参数的快速定量分析和分选的技术。 第一节 流式细胞分析理论知识 流式细胞仪的定义:是以激光为光源,集流体力学技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的细胞分析仪器。 什么是流式细胞仪 流式细胞仪实物BD FACSVantage BD-Calibur 关键是制备:单细胞悬液。流式细胞的样本制备技术流式细胞的检测步骤 1、单细胞悬液 2、对测量细胞进行荧光标记染色 3、流式细胞测量 4、对测量结果进行定量分析 5、对测量结果进行生物医学意义解释可测量的参数 分为:结构参数和功能参数 1、结构参数:细胞大小、形态、细胞核与细胞质的比值,色素颗粒,亚细胞形态,DNA,RNA,蛋白质含量,细胞表面抗原,碱性蛋白,染色体结构。 2、功能参数:氧化还原酶状态,表面电荷,pH值,膜电位,酶活性,DNA合成能力,膜的流动性,细胞受体,线粒体膜电位,细胞浆和膜的钙离子活性。影响因素 1、荧光染色 2、激光光源的稳定性 3、细胞流速的稳定性 4、细胞悬液样品的影响第二节

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