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DNA DNA 测序的原理及方法测序的原理及方法nDNA 测序的原理nDNA测序的操作过程nDNA测序实例SangerSanger法法DNADNA测序的原测序的原理理 使用特异引物在DNA 聚合酶作用下进行延伸反应、碱基特异性的链终止，以及采用聚丙烯酰胺凝胶区分长度差一个核苷酸的单链DAN 等3种方法。引入双氧核苷三磷酸（ddTBP ）作为链终止剂（Sanger 等，1977 ），酶法DNA 序列测定技术才得到广泛应用。n n22，33ddNTPddNTP与普通与普通dNTPdNTP不同之它们可以在不同之它们可以在DNADNA聚聚合酶作用下通过其合酶作用下通过其5 5 三磷酸基团掺入到正在增长三磷酸基团掺入到正在增长的的DNADNA链中，但由于没有链中，但由于没有33羟基，它们不能同后续羟基，它们不能同后续的的dNTPdNTP形成磷酸二酯链，因此，正在增长的形成磷酸二酯链，因此，正在增长的DNADNA链链不可能继续延伸。不可能继续延伸。n n在在DNADNA合成反应混合物的合成反应混合物的44种普通种普通dNTPdNTP中加入少量的中加入少量的一种一种ddNTPddNTP后，后， 链延
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