1、肺炎克雷伯菌1. 形态结构:肺炎克雷伯菌肺炎亚种为革兰阴性杆菌,无鞭毛,无芽孢,标本直接涂片或在营养丰富培养基上的营养物可见菌体外有明显的荚膜。2. 培养特性:兼性厌氧,营养要求不高,在初次分离培养基可形成较大、凸起灰白色黏液型的菌落。菌落大而厚实、光亮,相邻菌落容易发生融合,用接种蘸取时可挑出长丝状细丝。在麦康凯琼脂(MAC)培养基上形成较大的黏液型、红色的菌落,红色可扩散至菌落周围的培养基中。在伊红美蓝琼脂(EMB)上为大、粘稠、红色、易融合成一片的菌落。在血琼脂上为灰白色、大而黏、光亮且形成菌丝的菌落。3. 生化特性:氧化酶阴性,葡萄糖产酸产气,动力阴性,吲哚阴性,脲酶阳性。金黄色葡萄球
2、菌典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径 0.8m 左右,显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜,革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度 37C,最适生长 pH 7.4。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径 1-2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。在EMB 培养基上基本不生长。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性,可在 10-15%NaCl 肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气。甲基红反应阳性,VP 反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸,水解尿素,还原硝酸盐,液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力,对磺
3、胺类药物敏感性低,但对青霉素、红霉素等高度敏感。大肠埃希氏菌1形态与染色特性菌体两端钝圆、中等大小,杆状(有时呈卵圆形)、13um X 0.6um、周生鞭毛,能运动,不产生荚膜,革兰氏阴性,而且一般是对碱性染料着色较好,但有时两端着色较浓,要与巴氏杆菌区分开来。2培养特性1)需氧及兼性厌氧菌2)对营养的要求不高,在普通琼脂上就生长良好,在 15C-45范围内均可生长,但最适生长温度为 37,最适 pH 为 7.27.4。3)在普通琼脂平板上培养 24 小时,可形成圆形、凸起、光滑、湿润、半透明、边缘整齐、中等大小的菌落其菌落与沙门氏菌比较相似,但是,大肠杆菌菌落对光(45 角折射)观察可见荧光
4、。4)在肉汤培养基中生长 1824 小时变为均匀浑,而后底部出现粘性沉淀物,并伴有臭味。5)部分菌落可出现 溶血。6)在远藤琼脂上长成带金属光泽的红色菌落7)在 SS 琼脂平板上多不生长,少数生长的细菌,也因发酵乳糖产酸而形成红色菌落;8)在伊红美兰琼脂上形成具有金属光泽的黑色菌落9)在麦康凯琼脂上培养 24 小时后孤立菌落呈红色3生化特性1)可发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇产酸产气,有些不典型的菌株不发酵或迟缓发酵乳糖;2)不同菌株对蔗糖,卫矛醇、水杨苷发酵结果不一致。3)本菌可使赖氨酸脱鞍、不能使苯丙氨酸脱羧。4)不产生 H2S,不液化明胶,不分解尿素,5)、不能在氰化钾培养基上生长,靛
5、基质试验阳性,V-P 试验阴性,不利用枸橼酸盐。后四项生化特性是典型的大肠埃希氏菌,与此不一致的即为非典型大肠埃希氏菌菌。IMViC 试验:如 IMViC 试验为+、+、-、-,且乳糖发酵,表明被检物已有粪便污染,有发生肠道传染病的危险,这是卫生细菌中常用的检测指标。(I:吲哚形成试验,M:甲基红试验,Vi:V-P 试验,C:枸橼酸盐利用试验)4.血清学特性 大肠埃希氏菌的抗原构造主要由菌体抗原(O),鞭毛抗原(H)和荚膜抗原(K)三部分组成。1)O 抗原成分为细胞壁上的糖、类脂和蛋白质复合物,也是细菌的内毒素,热稳定性较强,高压蒸汽处理 2 小时不被破坏。每一血清型只含有一种 O 抗原,本菌
6、已发现有 167 种 O 抗原,分别以阿拉伯数字表示。2)H 抗原为蛋白质;一种大肠埃希氏菌只有一种 H 抗原,无鞭毛则无 H 抗原,H 抗原能在 80 度被破坏,也能被酒精破坏。H 抗原共有 64 种。3)K 抗原是细胞外部的荚膜或的表面物质,又称包膜抗原。新分离的大肠埃希氏菌 70具有 K 抗原。根据 K 抗原耐热的敏感性可把 K 抗原分为 A、B、L 三类,共有103 种,致病性大肠埃希氏菌的抗原主要为 B 抗原,少数为 L 抗原,B 抗原与 L抗原均可在煮沸后被破坏,A 抗原耐热性强,可耐受煮沸 1 小时而不被破坏。,O 抗原可将大肠埃希氏菌分成若干血清群,再根据 K 抗原和 H 抗原
7、进一步分为若干个血清型或亚型,根据大肠埃希氏菌抗原的鉴定结果,写出其抗原式如O111:K58(B)H12,一般认为 H 抗原与致病性无关,因此,一般不需要进行 H 抗原的鉴定。铜绿假单胞菌为 革 兰 阴 性 菌 , 菌 体 大 小 ( 1.5 5.0)um宽 (0.5 1)um, 细 长 且 长 短 不 一 , 有 时 呈 球杆 状 或 线 状 , 成 对 或 短 链 状 排 列 。 菌 体 的 一 端 有 单 鞭 毛 , 无 芽 胞 。 分 离 培 养本 菌 生 长 对 营 养 要 求 不 高 。 对 有 正 常 菌 群 存 在 的 临 床 标 本 或 采 自 环 境 中 的 标 本 应接
8、种 选 择 性 培 养 基 如 麦 康 凯 琼 脂 培 养 基 ( MAC) ; 1对 无 正 常 菌 群 存 在 的 临 床 标 本 如 血 液 、 脑 脊 液 、 穿 刺 液 等 可 接 种 普 通 或 血 琼脂 培 养 基 。 在 普 通 琼 脂 培 养 基 上 生 长 1824h 可 以 见 到 扁 平 、 湿 润 的 菌 落 ,该 菌 所 产 生 的 带 荧 光 的 水 溶 性 青 脓 素 与 绿 脓 素 相 结 合 将 使 得 培 养 基 呈 亮 绿 色 ;在 血 琼 脂 平 板 上 生 长 时 可 以 见 到 在 菌 落 的 周 围 有 溶 血 环 , 菌 落 呈 金 属 光 泽
9、 ,有 生 姜 气 味 ; 在 肉 汤 中 形 成 菌 膜 , 肉 汤 澄 清 或 微 浑 浊 , 菌 液 上 层 呈 绿 色 。如 果 是 在 液 体 培 养 基 中 则 呈 浑 浊 状 生 长 , 在 液 体 表 面 形 成 菌 落 , 而 在 培 养 基底 部 细 菌 的 生 长 不 良 。 生 化 鉴 定该 菌 氧 化 酶 阳 性 , 能 氧 化 分 解 葡 萄 糖 、 木 糖 , 产 酸 不 产 气 , 但 不 分 解 乳 糖 和 蔗 糖 。液 化 明 胶 、 可 分 解 尿 素 , 还 原 硝 酸 盐 为 亚 硝 酸 盐 并 产 生 氮 气 , 吲 哚 阴 性 , 利 用 枸 橼
10、酸盐 , 精 氨 酸 双 水 解 酶 阳 性 。变 形 杆 菌1. 形 态 结 构 革 兰 阴 性 杆 菌 , 两 端 钝 圆 , 有 明 显 的 多 形 性 , 呈 球 形 或 丝 状 。 有周 身 鞭 毛 , 运 动 活 泼 , 无 芽 孢 , 无 荚 膜 。2. 培养与生化反应特性 兼性厌氧,对营养物特殊要求,生长温度为 10-43 摄氏度。在营养琼脂和血琼脂上均可生长。普通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌株在普通琼脂平板上可蔓延成波纹状薄膜布满整个培养基表面(迁移现象)若在培养基中加入 0.1%石碳酸或 0.4%硼酸可以抑制其扩散生长,形成一般的单个菌落。在 ss 平板上可以形成圆形、扁薄、半透明的菌落,易与其它肠道致病菌混淆。培养物有特殊臭味,在血琼脂平板上有溶血现象。能迅速分解尿素。在鉴别培养基上为无色透明,有的蔓延生长,有的不蔓延生长,在选择培养平板上形成单个菌落,有的菌落边缘呈扩散状,对光观察,菌落周围淡蓝色中心稍厚,打开平皿时有臭味,有粘性,选出可疑菌落,在平皿底部做好标记。3. 生化特性 本族细菌苯丙氨酸脱羧酶为阳性,它们发酵葡萄糖产酸及少量气体,对果糖、半乳糖与甘油的发酵能力不一致,甲基红试验(MR)阳性。对左旋伯胶糖、糊精、卫矛醇、肝糖,菊糖、乳糖、山梨醇和淀粉无作用。除奇异变形杆菌外,都产生靛基质( 引哚),能在 KCN 培养基上生长。
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