1.小鼠用pH值7.4，0.1MPBS彻底穿心灌注。2. 用剪刀去头。3. 剥开头骨的软组织。4. 除去下颌骨。5. 除去头骨延髓到上颌骨之间的组织。6. 手术剪刀，取出头骨顶部，顺时针方向切割，开始和结束于右后鼓膜钩。7. 舀出大脑，维持组织的完整性。8. 立即将脑组织置于预冷的流式细胞术缓冲液中（1%BSA1mM的EDTA的pH值7.40.1MPBS,50U/mlDNAsel）。如果计划标记神经元，应在缓冲液中添加I-谷氨酸以防止在制备过程中的神经细胞死亡。9. 用杜蒙5镊子从大脑的外表面仔细剥离脑膜（硬脑膜、蛛网膜和软脑膜）。10. 使用手术刀作冠状切口分离大脑和小脑/脑干。11. 使用镊子分离小脑和脑干,小心剥离出第四脑室脑膜衬砌。12. 使用手术刀,纵向平分,小心剥离出大脑脉络丛及相关的脑膜组织。13. 进一步解剖到所需分析的脑区（如海马,大脑皮层等）。14. 将脑组织转移到15MLTenbroeckhomogenizer中,其中含有10毫升冰冷的FACS缓冲液。15. 轻柔震荡3次破碎组织。16. 粗匀浆,经过7
