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免疫组化结果中常见问题的处理 当免疫组化染色没有出现预期结果时，应系统地查找原因，而每一次只能排除一种原因。对照标本和目标标本均无着色1. 确认是否漏加了某种试剂，包括一抗、二抗、三抗及底物等。2. 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入，是否孵育了足够的时间。3. 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体，以及所用的检测系统是否和一抗匹配，这一点是非常重要的。比如，如果一抗是兔来源的抗体，二抗一定用抗兔的二抗来匹配；或一抗是小鼠的IgM一抗，二抗必须是山羊/兔抗小鼠的IgM（不是IgG）二抗。4. 检查抗体所使用的稀释度及稀释溶液。 5. 检查抗体的有效和保存条件，尤其是标记了酶或荧光素的抗体，现在大多数试剂公司的抗休均要求在48条件下保存，应避免反复冻融，试剂保存时一定要避免与挥发性有机溶剂同放一室，以免降低抗体的效价。6. 查标本的储存条件，最好用巳知阳性的标本来同时做阳性对照。7. 检查色原/底物溶液，最简单的检测方法是将一滴标记有酶的抗体加入到制备好的底物溶液中，如果底物发生预期的颜色变化，则可排除底物的因素。需要注意的是，有些底物在制成工
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