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医院细胞遗传室白血病外周血细胞培养及染色体制备作业指导书1目的 反映那些病理细胞的染色体改变,为临床提供辅助诊断。 2实验方法密闭培养/手工收获。3实验原理在不受外界抗原的刺激下,通过短期培养和直接制片法可以观察到血液病患者外周血中的异常肿瘤细胞的核型。4性能特征经G显带处理后可见300-550条显带5.样本类型及受检者准备外周血用5ml灭菌注射器吸取注射用肝素(6250U/ml)0.05 ml湿润管壁。消毒皮肤,于肘静脉采血约5ml,立即送检。6试剂完全培养基: RPMI-1640培养基4ml,小牛血清1ml,肝素0.05ml,双抗:青霉素和链霉素,终浓度为100U/ml,最后用3.5%碳酸氢钠调节pH为7.2-7.4;秋水仙素:浓度20g/ml,低渗液:0.075mol/L的KCl溶液,卡诺固定液,0.25% EDTA-trypsin:A液:将0.25g的trypsin溶于100ml的PBS中, B液:另将0.02g的EDTA溶于100的PBS中,0.25% EDTA-trypsin:A:B=1:1(V/V);10ml温育
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