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DNA重组技术的基本工具.ppt

1、专题1 基因工程,基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。 是在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切” 和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的新的生物类型和生物产品,基础理论 和技术的发展 催生了基因工程,阅读课本第2页,1.1 DNA重组技术的基本工具,是在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切” 和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的新的生物类型和生物产品,分析概念:,工具,为什么要加工,什么是表达,用什么导入,基

2、因操作的工具,基因的剪刀(分子手术刀) 限制性核酸内切酶(限制酶) 基因的针线(分子缝合针) DNA连接酶基因的运输工具(分子运输车) 运载体,到哪里去寻找这种酶,(1)限制酶,分布:主要在原核生物中。 作用特点:专一性,识别特定核苷酸序列,切割特定切点。 结果:产生黏性未端和平末端 举例:EcoR1限制酶、Sma1限制酶,与我们学过的DNA酶相同吗?,识别序列的特点,作用是什么,两者的区别,这两种酶切的特点,切断的是什么键,限制酶的识别特点,以中轴线双侧的DNA上碱基呈反向对称,重复排列 如:GAA TTC CCC GGG CTT AAG GGG CCC,(2)DNA连接酶,连接的部位:磷酸和脱氧核糖之间的键: 磷酸二酯键(梯子的扶手) 结果:两个相同的未端的连接。举例:Ecoli DNA连接酶 T4 DNA连接酶,与DNA聚合酶相同吗,二者在性质上的区别,(3)运载体,作用:将外源基因送入受体细胞。 具备的条件: 能在宿主细胞内复制 并稳定地保存。具有多个限制酶切点。具有某些标记基因 对受体细胞无害 举例:质粒、噬菌体 和动植物病毒。,为什么要具备这些条件,

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