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生物化学实验教案生化小老师一组生物化学实验室生化小老师团队氨基酸的分离鉴定 纸层析法3 ,5 二硝基水杨酸比色法测还原糖和总糖含量氨基酸的分离鉴定纸层析法实验 目的实验 原理实验试剂与 仪 器实验 步 骤注意事 项实验结 果与分析实验目的1 掌握氨基酸 纸层 析法的原理2 熟悉 纸层 析法的 实验 操作3 分离 鉴别 未知氨基酸 样 品的成分。实验原理 纸层析 纸层析法属于分配层析,层析滤纸为载体,流动相是指层析液,在毛细拉力作用下,层析液能不断由下向上流动。固定相是指被吸附在滤纸纤维之间的水分。由于纤维素上的羟基具亲水性使这部分水束缚在纤维素周围,不易扩散而成为固定相。实验原理 在层析过程中,当层析液在毛细拉力作用下,上升流经滤液滴点时,滴点上的氨基酸就相继融入层析液,随着层析液上升,并发生在分配,即有一部分色素从层析液分配溶解到固定相中,直到平衡。由于分配系数的不同,那些分配系数大的氨基酸分子,随层析液向上移动得快,形成的斑点集中在滤纸的上部;而分配系数小的氨基酸分子,随层析向上移动得慢,形成的斑点集中在滤纸的下面。实验原理 分配系数 指一定温度下,处于平衡状态时,组分在固定相中的
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