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生化蛋白质分离纯化技术课件.ppt

蛋白质的分离、纯化和结构分蛋白质的分离、纯化和结构分析析2401120102黄嵩v蛋白质分离指利用其理化性质,采取透析、盐析、电泳、层析以及超速离心等不损伤蛋白质空间构象的物理方法,以满足研究蛋白质结构域功能的需要一、透析和超滤法可除去蛋白质溶液中的小分子化合物 利用透析袋分离蛋白质的方法叫透析发,透析袋是具有超小微孔的膜,一般只允许分子量为10kD以下的化合物通过,高分子蛋白则留在袋内二、丙酮沉淀、盐析及免疫沉淀法v丙酮沉淀:在丙酮沉淀:在04时,用时,用10倍于蛋白质溶倍于蛋白质溶液体积的丙酮加入到蛋白质溶液中,形成液体积的丙酮加入到蛋白质溶液中,形成沉淀后,立即分离,防止蛋白质变性沉淀后,立即分离,防止蛋白质变性v盐析:在溶液中加入中性盐使生物大分子盐析:在溶液中加入中性盐使生物大分子沉淀析出的过程称为沉淀析出的过程称为“盐析盐析”,它属于沉,它属于沉淀法,目的是将所需要的蛋白质转入固相淀法,目的是将所需要的蛋白质转入固相沉淀或留在液相,而与杂质得到初步的分沉淀或留在液相,而与杂质得到初步的分离离v免疫沉淀法:利用特异抗体识别相应抗原免疫沉淀法:利用特异抗体识别相应抗原蛋白质,以

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