引物设计实例分析引物设计实例分析1ppt课件引物设计基本原则引物长度（primer length）产物长度（product length）序列Tm值(melting temperature)G+C含量（composition）引物二聚体及发夹结构 （duplex formation and hairpin）阅读框2ppt课件1.引物的长度 一般为15-30bp，常用的是18-27bp，但不能大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74，即Taq酶(Taq酶是从水生栖热菌 Thermus Aquaticus（Taq）中分离出的具有热稳定性的DNA 聚合酶。对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。与一般酶不同,用Taq酶扩增DNA时常使片段3端凸出一个A,应注意)的最适温度3ppt课件2.产物的长度 扩增片段长度为100600碱基对.4ppt课件3.Tm值 引物的Tm值一般控制在55-60度,尽可能保证上下游引物的Tm值一致,一般不超过2度.如果引物中的G
