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一、概述外外源源DNA一一般般没没有有明明显显的的遗遗传传标标志志,如如果果将将其其导导入入宿宿主主细细胞胞,没没有有有有效效的的方方法法将将导导入入了了外外源源DNA的的细细胞胞和和未未导导入入外外源源DNA的的细胞区分开来。细胞区分开来。外外源源DNA导导入入宿宿主主细细胞胞后后,不不能能随随宿宿主主细细胞胞的的繁繁殖殖而而复复制制,达达不不到到使使外外源源DNA片片段段扩增的目的。扩增的目的。1载体(vector)携携带带靶靶DNA片片段段(外外源源DNA片片段段)进入宿主细胞进行扩增和表达的工具。进入宿主细胞进行扩增和表达的工具。宿主细胞,常见的有大肠杆菌、酵母等。宿主细胞,常见的有大肠杆菌、酵母等。2载体的特征:能自主复制;能自主复制;具备筛选标记;具备筛选标记;适当大小的分子量和适当限制性内切酶适当大小的分子量和适当限制性内切酶酶切位点;酶切位点;在细胞中拷贝数高在细胞中拷贝数高除上述特征外,表达载体还应配备有与除上述特征外,表达载体还应配备有与宿主细胞相适应的启动子、前导顺序、宿主细胞相适应的启动子、前导顺序、加尾信号、增强子等调控加尾信号、增强子等调控DNA元件。元件。
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