基因诊断、PCR、测序等介绍罗俊明2013年6月PCRPCR技术l聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction)简称PCR，是一项在短时间内采用两引物大量扩增特定的DNA片段的分子生物学技术。l每个循环之后，模板量为原来的2倍。它可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍。PCR原理阈值线（阈值线（Threshold）基线以上，阴性对照以上，与对数期相交，尽可能靠近基线。基线（基线（Baseline）本底，无扩增区域，一般为315Ct值之间Ct值值荧光信号开始由本底进入指数增长阶段的阈值所对应的循环次数。PCR原理Y=AX+B线性的一次方程直线。常用指标有斜率(A)，截距(B)，相关系数(R)一般A在-3.5-2.8之间，B在44，R无限接近于1，0.95PCR原理PCR原理原理实质就是实质就是体外基因体外基因复制复制技术技术MgMg2+2+dCTPdCTPdGTPdGTPdUTPdUTPdATPdATPTaqTaq DNA DNA聚合酶聚合酶 AmpEraseAmpErasePrimerPrimer靶序列靶序列加热变性加热变性95 95 C C靶序列引物退火靶序列引物
