1、教学目的与要求n 掌握基因工程疫苗的原理，了解基因工程疫苗的概念与进展。n 了解生物技术诊断制剂，掌握这些生物技术诊断制剂的原理n 了解抗体工程的种类。n Introduction疫苗技术的 3个阶段：n 第一次革命：经典的微生物疫苗时代： 19世纪到 20世纪n 第二次革命： 20世纪 70年代生物技术的出现：重组 DNA技术为代表的基因工程疫苗时代n 第三次革命： 20世纪 90年代的 DNA疫苗时代n 重组 DNA技术产生基因工程疫苗：n 重组亚单位疫苗、活载体疫苗、基因缺失疫苗和 DNA疫苗等疫苗；n 生物技术诊断抗原制剂，如基因工程抗原、核酸探针、 PCR和基因芯片等的制造新技术，n
2、 抗体工程技术。n 治疗性疫苗、肿瘤疫苗和生理调控疫苗等。反向遗传学疫苗研制途径。 第一节、基因工程疫苗 n 基因工程疫苗：指用重组 DNA技术研制的疫苗。n 重组亚单位疫苗、活载体苗、基因缺失疫苗，裸露 DNA疫苗等。n 新途径，新希望，受到重视。一、重组亚单位疫苗（ recombinant subunit vaccines) n 用 DNA重组技术，将编码病原微生物保护性抗原的基因导入原核或真核细胞，使其在受体细胞中高效表达，分泌保护性抗原肽链。提取保护性抗原肽链，加入佐剂即制成生物制品，叫 基因工程重组亚单位疫苗。原 理选择合适的表达系统PCR扩增保护性抗原的基因重组 DNA： 把抗原的
3、基因亚克隆到表达载体重组表达质粒导入系统的宿主细胞鉴定和选择表达所需细胞培养繁殖 制备疫苗生产重组亚单位疫苗的 表达系统 ：n 原核表达系统：大肠埃希氏菌（ E. coli） 和枯草杆菌（ Bacillus subtilis） 表达系统。（最常用），其他如：链霉菌基因表达系统等n 真核表达系统：如酵母表达系统；昆虫基因表达系统；丝状真菌基因表达系统；哺乳动物细胞表达系统n 植物表达系统n 参考：基因工程原理。重组亚单位疫苗的 优点：n 安全性好，无感染，可用于不宜使用活疫苗动物，如妊娠动物。n 减少或消除了常规活疫苗或死疫苗难以避免的热原、变应原、免疫抑制原和其它有害的反应原。n 稳定性好，便
4、于保存和运输，n 可与感染产生的免疫应答相区别，适合疫病的控制和消灭计划。成功例案： 首次：口蹄疫基因工程亚单位疫苗；人乙型肝炎基因工程亚单位疫苗，广泛应用。预防仔猪和犊牛下痢的大肠杆菌菌毛基因工程重组亚单位疫苗。 二、重组活载体疫苗（ live, vectored vaccines)定义 ：用基因工程技术将保护性抗原基因（目的基因）转移到载体中使之表达的活疫苗。分类： 重组载体病毒活疫苗、重组载体细菌活疫苗细菌载体 ，沙门氏菌、大肠杆菌等； 病毒载体 ：痘病毒，腺病毒和疱疹病毒等。n 例子 ：国外：腺病毒为载体的乙肝疫苗、以疱疹病毒为载体的新城疫疫苗等。n 优点： 活载体疫苗具有传统疫苗的许多优点，而且又为多价苗和联苗的生产开辟了新路，是当今与未来疫苗研制与开发的主要方向之一。 n (非复制性疫苗， 又称活 -死疫苗：与重组活载体疫苗类似，但载体病毒接种后只产生顿挫感染，不能完成复制过程，无排毒的隐患，同时又可表达目的抗原，产生有效的免疫保护。n 如用金丝雀痘病毒为载体，表达新城疫病毒HF基因，用于预防鸡的新城疫。 )
