1、第 39讲 微生物的培养与 应 用最新考 纲 1.微生物的分离和培养。 2.培养基 对 微生物的 选择作用。 3.某种微生物数量的 测 定。 4.微生物在其他方面的 应 用。考点一 微生物的 实验 室培养1.培养基(1)概念:人 们 按照微生物 对 的不同需求,配制出供其 的 营 养基 质 。(2)营 养 组 成:一般都含有 和无机 盐 。此外,还 需要 满 足微生物生 长对 、氧气以及 的要求。(3)种 类 :按照物理性 质 可分 为 培养基和固体培养基。营养物质生长繁殖水、碳源、氮源pH 特殊 营 养物 质液体2.无菌技 术(1)含 义 :指在培养微生物的操作中,所有防止 的方法。(2)关
2、 键 :防止 的入侵。(3)不同 对 象的无菌操作方法 (连线 )杂 菌 污 染外来 杂 菌3.大 肠 杆菌的 纯 化培养(1)制 备 牛肉膏蛋白 胨 固体培养基 操作步 骤 倒平板的方法及注意事 项称量 灭 菌 倒平板a.请 用文字和箭 头 写出正确的倒平板操作流程: 。b.甲、乙、丙中的 灭 菌方法是 。c.丁中的操作需要等待 才能 进 行。(2)纯 化大 肠 杆菌的方法 纯 化培养原理:想方 设 法在培养基上得到_的肉眼可 见 的 ,即可 获 得 较纯 的菌种。 纯 化大 肠 杆菌的关 键 步 骤 : 。 常用的微生物接种方法有两种a.平板划 线 法:是通 过 在 琼 脂固体培养基表面_
3、的操作,将聚集的菌种逐步稀 释 分散到培养基的表面。丙 乙 甲 丁灼 烧灭 菌平板冷却凝固由一个 细 胞繁殖而来菌落接种接种 环 连续 划 线b. 法:是将菌液 进 行一系列的 ,然后将 的菌液分 别 涂布到 琼 脂固体培养基的表面, 进 行培养。(3)菌种的保存方法 对 于 频 繁使用的菌种,可以采用 的方法。 对 于需要 长 期保存的菌种,可以采用 的方法。稀 释 涂布平板 梯度稀 释不同稀 释 度临时 保藏甘油管藏(1)(教材 P16旁 栏 思考 题 解答 )请 你判断以下材料或用具是否需要消毒或 灭 菌。如果需要, 请选择 合适的方法。 培养 细 菌用的培养基与培养皿 玻棒、 试 管、
4、 烧 瓶和吸管 实验 操作者的双手提示 、 需要 灭 菌; 需要消毒。(2)(教材 P17“ 倒平板操作 讨论 ” 解答 ) 为 什么需要使 锥 形瓶的瓶口通 过 火焰?提示 通 过 灼 烧灭 菌,防止瓶口的微生物 污 染培养基。 平板冷凝后, 为 什么要将平板倒置?提示 平板冷凝后,皿盖上会凝 结 水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比 较 高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发 ,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成 污 染。3.下 图 甲、乙是微生物接种常用的两种方法, 请 思考:(1)图 甲是利用 _法 进 行微生物接种, 图 乙是利用_法 进 行微生物接种。 这 两种方法所用的接种工具分别 是 _和 _; 对这 两种接种工具 进 行 灭 菌和消毒的方法依次是 _和酒精消毒。(2)接种操作 为 什么一定要在火焰附近 进 行?_。(3)下 图 是采用上述接种方法接种后培养的效果 图 解,其接种方法是 _(填 “ 图 甲 ” 或 “ 图 乙 ” )。提示 (1)平板划 线 稀 释 涂布平板 接种 环 涂布器 灼 烧灭菌 (2)火焰附近存在着无菌区域 (3)图 乙