荧光定量PCR的化学原理,水解探针的MIX,SYBR染料的MIX,SYBR染料,结合于双链核酸的小沟处与双链DNA结合后受激产生荧光在变性条件下双链分开，荧光消失背景强，非特异性较强,SYBR染料法的扩增曲线,Taqman探针类,水解探针-Roche cobas与ABI Taqman,Scorpions,杂交探针检测罗氏专利性技术,荧光定量PCR仪的光学原理,荧光染料的光学性质,ABI 7500 Real-Time PCR Systems 光学原件,荧光定量PCR的数据分析,标准曲线法 2 -Ct法,相对定量,标准曲线法,LogX0与循环数呈线性关系，通过已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，根据未知样品Ct值，就可以在标准曲线上计算出未知样品初始模板量。,优点：无需作标准曲线 实用适合于配对样本的相对定量分析,2 -Ct法,实例,举例-BCR/ABL1融合基因定量检测,ABL扩增曲线Rn,BCR/ABL1-P210扩增曲线Rn,报告举例,CML缓解指标,比较Ct值法-实例,Pfaffl equation:if Eref=a, Etar=b, so:-Fold change=b(CTtarget)/a(CTref.),THE END!,
