1、清开灵口服液中绿原酸的相关性分析摘要：目的：对清开灵口服液中绿原酸的相关性分析。方法：色谱柱：Diamonsil C18柱（4.6mm250mm，5m，Dikma） ；流动相：采用梯度洗脱，A 相为乙腈（含 0.3%甲酸） ，B 相为水（含 0.3%甲酸） ；流速：1mL?min-1，运行时间 65min；检测波长 254nm，280nm，329nm；柱温为25；两次进样之间用流动相初始梯度条件平衡 15 min；流动相使用前减压抽滤脱气；进样量 20L；ELSD 检测器参数：漂移管温度：80；载气压力：4.0Bar；梯度洗脱。结论绿原酸在线性范围内的线性关系良好，且日内、日间精密度良好，绿原
2、酸稳定较好。 关键词：清开灵口服液；绿原酸；相关性分析 中图分类号：R242 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2013）-04-0063-1 清开灵组方源于中医治疗急性热病传统处方“温病三宝”中的安宫牛黄丸，由胆酸、猪去氧胆酸、水牛角粉、珍珠母粉、金银花提取物、黄芩苷、栀子、板蓝根等组成。1清热解毒、镇静安神。用于外感风热时毒、火毒内盛所致发热、烦躁不安、咽喉肿痛、舌质红绛、苔黄、脉数者；呼吸道感染、病毒性感冒、急性咽炎、急性气管炎等病症。2，3现代药理分析认为，金银花、黄芩、栀子、板蓝根有很强的抗菌、抗病毒、抗炎和退热作用；水牛角、牛黄、珍珠母有镇静、抗惊厥、强心退热作用；黄芩
3、、山栀、板蓝根尚有保肝利胆，抑制乙肝病毒作用。清开灵迄今为止已经形成系列产品，临床效果显著，应用剂型主要有注射液、胶囊、颗粒、口服液。目前，许多研究人员对清开灵系列产品进行了 HPLC指纹图谱研究，但这些研究尚不能全面反映其质量状况。为了全面控制清开灵口服液的质量，根据中药口服液指纹图谱研究技术要求，本研究采用 HPLC技术对清开灵口服液中绿原酸的含量进行了相关性分析。 1 仪器与试药 高效液相色谱仪：Agilent 1200；法国 Sedex-55型蒸发光散射检测器（ELSD） ；电子天平（ShangPiMDll02，上海分析仪器厂） ；KUDOS SK2200H型超声器，上海科导超声仪器公
4、司；色谱纯（Fisher Scientific，Fair Lawn，USA） ；Milli-Q 处理纯净水；绿原酸（购买于张家界恒兴生物科技有限公司） ；清开灵口服液由亚宝北中大（北京）制药有限公司生产。 2 方法学考察 2.1 线性关系考察 准确量取对照品混合贮备液适量（含绿原酸 25g?mL-1）稀释，定容，制得 0.8，1.3，1.7，2.7，3.3，5.3 六个浓度梯度的对照品混合溶液，浓度范围为 0.725-5.5ug?ml-1，按“条件与方法”项下色谱条件实验，记录峰面积，以浓度 C为横坐标（X） ，以峰面积 A为纵坐标（Y）进行线性回归，计算回归方程：Y=42.045X-8.99
5、36，R2=0.9998，结果见表1。结果表明，绿原酸在线性范围内的线性关系良好。 2.2 精密度实验 分别精密吸取高、中、低三种浓度的对照品混合溶液，在 1天之内连续进样 5次，以及连续 3天分别进样，计算各成分浓度的相对标准偏差（RSD） ，进行日内精密度和日间精密度考察，结果见表 2。结果表明，绿原酸的日内、日间精密度良好。 2.3 稳定性实验 取批号为 BNBN的清开灵口服液，按照前述方法制备样品溶液，分别在 0，2，4，6，8，12，24h 测定绿原酸的峰面积和保留时间，计算其RSD，进行稳定性考察，结果见表 3绿原酸的稳定性实验结果。结果表明绿原酸的保留时间与含量测定的 RSD均小
6、于 4%，表明其在 24小时内稳定。2.4 讨论 绿原酸易溶解于乙腈等溶剂，溶解时采用超声处理，有利于促进样品中的绿原酸溶解。绿原酸在 329nm波长处有最大吸收，故选定 329nm作为检测波长。流动相比较了 A相为乙腈（含 0.3%甲酸） ，B 相为水（含0.3%甲酸）系统，本试验采用了 HPLC法测定了清开灵口服液中绿原酸成分在线性范围内线性关系良好，精密度较好，很稳定。 参考文献 1 杨慧峰.清开灵注射液临床应用进展.中国现代药物应用，2009， （02）. 2 张妙媛，姚金成，赵绪元等.清开灵不同制剂的高效液相指纹特征比较，2007，18（2）. 3 常桃言，康红英，魏俊德.HPLC 测定清开灵口服液中黄芩苷含量的方法改进，2006. 作者简介：刘晶（1987-） ，女，吉林长春人，吉林农业大学中药材学院 2010级硕士研究生，研究方向：中药新药研究与开发。 网络出版时间：2013-3-22 10：43：43 网络出版地址：http：/
