HPLC法分析注射用乳糖酸阿奇霉素的有关物质和含量.doc

1、HPLC 法分析注射用乳糖酸阿奇霉素的有关物质和含量摘 要高效液相色谱法，能够通过液体流动相，对不同极性的溶剂进行分离从而得到数据绘成色谱，其分析的精确度非常高，尤其对于液体试剂的分析有重要的作用。乳糖酸阿奇霉素注射液，对于细菌性感染的治疗有非常好的效果，通过药物血液注射见效很快。三是乳酸阿奇霉素对酸碱度有比较严格的要求，PH 应该在 6.0-7.5 之间。所以对于其注射液内相关物质的含量测定要有非常高的精确度和准确度。因为，药物的本质是各种化学物质，人体也是化学工厂，再加上细菌病毒等容易出现很多异常的化学反应。对于身体机能发育不完善的婴幼儿和身体机能下降的老人，他们的用药要格外小心。本文通过

2、相关实验研究出了一种利用高效液相色谱来检测该注射液中某些物质含量的方法。下文分析，仅供参考。 关键词高效液相色谱法；注射用乳糖酸阿奇霉素；有关物质；含量 中图分类号：TU32 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2015）10-0343-01 秋冬季节交替，也是流行感冒高发的时候。细菌性引起的感染病症非常多，阿奇霉素对多种支原体和衣原体引起的病症有良好的治疗效果。阿奇霉素属于光谱型抗生素类药品，因为阿奇霉素的结构与红霉素非常像，所以它的作用机制和红霉素相同，主要是通过干扰细菌蛋白的合成来达到抑菌的效果。阿奇霉素的主要优点是基本无不良反应，所以被临床上普遍应用。但是作为药物，其用量的治

3、疗的关键，尤其是对于婴幼儿来说，要量过大会治好一病，又引起一病，严重影响孩子的健康成长。所以对于其相关物质的含量的测量和分析非常重要。下文主要是应用高效液相色谱法，即 HPLC，对其进行物质含量分析。 1 仪器与试药 高效液相色谱仪，高压泵，进样器，检测器，在线脱气机；色谱工作站；天平；酸度计。阿奇霉素对照品（批号：130593 一 01002；阿奇霉素系统适用性对照品；阿奇霉素峰鉴别对照品。甲醇、乙睛均为色谱纯，其余试剂均为分析纯。其中仪器的选择要注意选用现阶段先进的仪器以保证测试的准确性，其药品的选择要注意生产批号。并将仪器的型号和药品的生产批号进行详细记录，以备再度研究时对仪器的测量误差

4、进行修正，对药品的生产批次的药理进行分析。 2 方法与结果 1 方法 制备杂质峰定位用溶液与系统适用性溶液、定位用溶液、供试品溶液、对照溶液、灵敏度溶液和空白对照溶液。 含量测定溶液的制备取阿奇霉素对照品，加流动相制成溶液，作为含量测定对照品溶液；取供试品，加流动相制成含阿奇霉素 1mg?ml-1的溶液，作为含量测定供试品溶液。 色谱条件与系统适用性以 CAPCELLPAKC18 为色谱柱，在此色谱条件下，系统适用性溶液的色谱图与标准图谱一致。阿奇霉素峰与其他相邻色谱峰达至了基线分离，理论板数以阿奇霉素计大于 5000。空白对照对此测定方法无干扰。 2 有关物质 根据 USP 标准确定了杂质

5、1、杂质 2、杂质 3 的相对保留时间分别约 0.260.27、1.6、1.7，按 USP 给出的校正因子，分别为0.56、1.0、1.0。 结果表明，本品经光照和高湿破坏后，杂质无明显增加；经高温后杂质略有增加；经碱破坏后杂质明显增加；经氧化、酸破坏后，主峰几乎消失，但均不干扰本品的有关物质测定。 重复性试验取同一批号供试品（批号：10101411）依法制得有关物质供试品溶液与有关物质对照溶液 6 份，在上述色谱条件下分别测定，以加校正因子的主成份自身对照法计算各杂质 1、杂质 2、杂质 3 分别为4.63%，7.03%，0.57%，1.32%和 2.27%（n=6） 。 稳定性试验取新制备

6、的有关物质供试品溶液，于室温下放置，每隔 2h 进样一次，以加校正因子的主成份自身对照法计算各已知杂质、最大未知单杂和杂质总和的 RSD 均在 0%6%（n=6）之间。表明本品的有关物质供试品溶液在 12h 内是稳定的。 检测限与定量限试验取有关物质灵敏度溶液逐步稀释，进样，待主峰峰高为基线噪音 3 倍时确定检测限为 10ng，主峰峰高为基线噪音 10倍时确定定量限为 40ng。 样品的测定取本品 12 批与 USP 阿奇霉素特性对照品，分别制备有关物质供试品溶液、有关物质对照溶液与系统适用性溶液，按上述色谱条件分析，计算各杂质峰的含量。 3 含量测定 结果表明阿奇霉素在 0.46901.40

7、70mg?ml-1 范围内线性关系良好。精密度试验取对照品溶液，按上述色谱条件重复进样 6 次，测定峰面积的 RSD 为 0.82%（n=6） 。表明本品的含量测定供试品溶液在 12h 内是稳定的。结果平均回收率为 98.62%，RSD 为 0.44%（n=6） 。 样品的测定取本品 12 批，称取装量差异项下的内容物，分别制备含量测定供试品溶液。按上述色谱条件测定，以外标法计算样品中阿奇霉素含量，并与原质量标准方法测定结果进行比较。 3 讨论 1 溶剂的选择 选择流动相作为配制溶液的溶剂。 2 色谱柱的选择因本品的 pH 为 6.07.2，偏碱性，容易和色谱柱的硅醇基相互作用，影响峰形，为了

8、获得较好的峰形，本实验选用聚合物包被的 CAPCELLPAKC18（MG）色谱柱。3 柱温的选择因此试验选用柱温30。4pH 的选择试验选用 pH8.4 的磷酸盐缓冲液，并将磷酸盐缓冲液pH 的调节范围规定为0.1。 5 注射用乳糖酸阿奇霉素为乳糖酸阿奇霉素的无菌冻干品。为考察原料经生产加工后现有生产工艺及参数对有关物质的影响。试验选用了 3批成品对应的原料批次，进行了有关物质的考察，结果相互对应的成品与原料有关物质无明显区别，说明原料经生产加工后现有生产工艺及参数对有关物质的影响不显著。 6 为了考察产品留样期间的质量问题，分别对近效期批次、中间段批次及新生产批次的 12 批样品进行了新方法

9、的检测，结果显示，本品在贮存期间有关物质与含量无显著变化，说明本品在贮存期内性质稳定。 7TLC 法与抗生素微生物检定法测定本品有关物质与含量时方法误差较大且耗时长，而采用 HPLC 法测定时准确、快速、辅料无干扰，故建议用 HPLC 法替代 TLC 法与抗生素微生物检定法测定本品的有关物质和含量。8 对于注射用乳糖酸阿奇霉素，有关物质 B 是存在的主要杂质，该杂质来源于乳糖酸阿奇霉素合成的起始物料阿奇霉素，建议提高阿奇霉素的质量以确保最终制剂的质量。 4 结语 阿奇霉素作为广谱抗菌药广泛应用到由于细菌感染引起炎症的病患当中。注射用的乳糖酸阿奇霉素作为血液直接注射的药物，其组分含量的确切数值显

10、得格外重要。在科技高度发达的现在，要注意医疗用药的科学性，以避免医疗事故的发生。由于患者在治疗过程中不同药物内成分互相作用而导致新病症时有发生，如果能够确定药物中所有组分的具体含量，能够在医生配药的过程中提供有效的参考避免异常情况的发生。阿奇霉素注射液作为一种常用的临床使用药品，其相关的组分的数据极其重要。应用 HPLC 法，对其分析效果良好。但是科学没有止境，对其分析还可以精益求精，医药研究和化学以及生物领域交叉很多，因此，相关的科研工作者还要拓宽视野，继续努力研究，为医疗科学事业做出更大的贡献。 参考文献 1赵沈娟，宋雪洁，陈琴华，朱佳丽.HPLC 法分析注射用乳糖酸阿奇霉素的有关物质和含量J.中国药师.2012（08） 2寇晋萍，王国兰，王俊秋，周立春.阿奇霉素有关物质测定方法的优化J.中国抗生素杂志.2011（05） 3陈震.有关物质的研究与新药注册J.中国医药工业杂志.2010（11）