固相萃取-气相色谱法测定多种有机磷农药【毕业设计】.doc

1、（20届）本科毕业设计固相萃取气相色谱法测定多种有机磷农药SIMULTANEOUSDETECTIONOFORGANOPHOSPHORUSPESTICIDERESIDUESINVEGETABLESWITHGASCHROMATOGRAPHY所在学院专业班级应用化学学生姓名学号指导教师职称完成日期年月I摘要【摘要】本文建立了大白菜、苹果等复杂样品中多种常用有机磷农药SPE气相色谱的多残留同时检测方法。实际样品经过乙腈提取之后，经SPE小柱净化后，用GCFPD分析检测。添加水平为02MG/KG时，回收率范围为6581115，RSD范围为132136。5种有机磷农药的检出限非常低，为0001MG/KG，

2、符合有机磷农药残留分析的检测要求。研究果蔬样品中有机磷农药多残留检测技术对保障食品的安全，促进食品的出口具有非常重要的意义。【关键词】SPE；GCFPD；有机磷农药残留；复杂样品IIABSTRACT【ABSTRACT】TOESTABLISHASIMPLEMETHODFORSIMULTANEOUSDETECTIONOFORGANOPHOSPHORUSPESTICIDERESIDUESINVEGETABLESWITHGASCHROMATOGRAPHYAFTERTHESAMPLESWEREEXTRACTEDWITHACETONITRILE,THEMIXTUREOFACTIVATEDCARBONAND

3、PSAEXTRACTION,SPECARTRIDGEPURIFIEDDETERMINEDBYGCFPDRESULTSHOWTHATRECOVERY6581115，RELATIVEANDDEVIATION（RSD132136,THELIMIT0001MG/KGITWASCONSISTENTWITHTHEREQUIREMENTSINSTANDARDSOFPESTICIDERESIDUEDETECTIONINCHINA【KEYWORDS】SPE；GCFPD；ORGANOPHOSPHORUSPESTICIDERESIDUES；COMPLEXSAMPLESIII目录摘要IABSTRACTII目录III1

4、引言111有机磷农药的毒性112有机磷农药的最大残留限量水平MRL113有机磷农药残留分析检测技术的研究进展214本研究的提出42材料与方法421试剂与标准品422仪器与设备623样品制备与保存624样品处理6241提取6242净化625仪器测定条件726定量测定727添加回收试验728结果计算与表述83结果与分析831样品提取剂的选择832样品净化的优化933仪器方法的建立1034绘制标准曲线1135添加回收率与精密度实验1236实际样品的检测134结论14参考文献15附录错误未定义书签。11引言11有机磷农药的毒性中国是世界上著名名的农业大国，有机磷农药由于具有高效、便捷、速效、经济效益显

5、著、适应性广泛等优点而被广泛应用于防治病、虫、草害。然而最近几年来，由于害虫抗药性的增强，因此使用有机磷农药的浓度和次数不断地增加，导致有害有毒有机磷农药多残留对自然环境造成越来越严重的污染和危害，也导致中国国农产品中有机磷农药残留超标现象十分严重，各种中毒事件屡见不鲜1。有机磷杀虫剂（ORGANOPHOSPHROUSPESTICIDES，简称OPPS）是含有CP键或COP、CNP或CSP键的有机化合物，现在常用的有机磷杀虫剂主要有以下四大类1）硫代磷酰胺和磷酰胺类磷酸分子中的羟基基团被氨基所替换，生成磷酰胺化合物；或者磷酰胺分子中的氧原子被硫原子所取代，生成硫代磷酰胺；2）硫代磷酸酯类磷酸分

6、子中的氧原子被硫原子替代后生成的化合物，或硫代磷酸中的氢原子被有机基取代，即成为硫代磷酸酯；3）硫代膦酸酯类与膦酸酯类磷酸中的1个羟基被有机基取代，即在分子中形成PC键的化合物，膦酸中羟基的氢原子再被有机基取代即为膦酸酯，或膦酸酯中的氧原子再被硫原子取代，即为硫代膦酸酯；4）磷酸酯类磷酸中的3个氢原子被有机基替代后生成的化合物2。当前我国使用范围最广、用量最大的农药是有机磷杀虫剂，一类大多数属磷酸脂类或硫代磷酸脂类的化合物,占所有农药总产量的65上下，与其它种类的农药杀虫剂相比,有机磷杀虫剂具有极多优点，如杀虫谱广泛、高效、毒性低、残效期短及价格低廉等,易被为广大消费者和农民所认可。但是由于农

7、民缺乏科学用药的意识和其它原因，经常存在剧毒类有机磷如甲拌磷、甲胺磷、氧化乐果等的误用和滥用，即使是相对低毒性类的有机磷农药，也存在收获前施药不按照安全间隔期或加大剂量等问题，给消费者带来了健康威胁，对自然环境造成了极大的破坏。随着生活水平的提高，普通大众越来越高度重视水果、蔬菜等农产品中的安全问题。有机磷农药极易与人类、动物、环境发生接触，其危害分为慢性和急性，慢性中毒症状通常表现为头昏、头痛、恶心、疲劳、视力模糊、食欲不振等，严重中毒者会可能因为呼吸衰竭而窒息死亡。急性中毒者症状主要体现为多汗呕吐、恶心、腹痛、腹泻、头痛、头晕、疲劳、昏迷、嗜睡、抽搐、流涎、呼吸困难等情况。为了保护广大消费

8、者的健康，大多数国家已经制定和颁布法律法规，不仅要限制农药的使用种类和数量，而且规定了食物中能够允许的农药残留的限量。12有机磷农药的最大残留限量水平MRL2一方面，农药对人类的各类影响己，经成为十分严重的社会问题；在另一方面，出口的农产品也由于残留超标而不能出口，我国农产品的出口不断遭受贸易壁垒，造成了巨大的经济损失，同时也破坏了国际形象。美国新规定大部分有机磷农药残留允许限量必须小于01MG/KG，三唑磷最高允许限量必须小于005MG/KG。2008年4月13日，日本制定了新规定食品中残留农业化学品肯定列表制度，这规定是针对进口农产品的。新规定的835种兽药、农药及饲料添加剂设定了上万个最

9、大允许残留限量水平；对一些不归属于新规定具体的兽药、农药及饲料添加剂，设定最大允许残留量为001MG/KG的高标准，应该是世界上最苛刻的农药类残留标准2，表1罗列主要几种果蔬的MRL。表111种农药不同基体的限量值（日本）序号农药名称食品种类菠萝苹果荔枝胡萝卜马铃薯茄子菠菜荷兰豆鲜木耳1敌敌畏0101010101010102012甲基对硫磷0202021001101010103灭线磷010050020201010040020024甲拌磷005005030302030303035氯唑磷026特丁硫磷0005000500050005000500050005000500057久效磷100502005

10、010058对硫磷0050300503不得检出0303040059磷胺02050202020202020210甲基异柳磷11硫环磷13有机磷农药多残留分析检测技术的研究进展与方向有机磷农药多残留分析检测方法至今已经有非常多种，如气相色谱法、微生物分析法、高效液相色谱法、分光光度法、化学荧光发光法、质谱检测法、放射免疫检测分析法等，但在实际分析检测中最主要使用的以下几种方法，包括传感器法、色谱法和免疫分析法4。131色谱法色谱法包括两种高效液相色谱法HPLC与气相色谱法GC，这两张色谱法是现在世界上非常流行的定性定量分析检测有机磷农药多残留的方法5。近些年来,又研发了许多气相色谱与其他仪器联用的

11、分析检测方法，例如气相色谱与质谱联用分析检测技术、毛细管电泳与质谱联用分析检测技术、液相色谱与质谱联用技术、以及气相色谱与多级质谱联用技术等等。现在世界上分析检测有机磷农药多残留方法已经很多种，非常具有代表性的是德国DFG有机磷农药多残留检测方法可以分析检测到360种以上各类农药、德国D19有机磷农药多残留检测方法可以分析检测到220种以上各类农药和日本FDA9有机磷农药多残留检测方法可以分析检测到320种以上各类农药6。中国是在九十年代3才开始致力于研究有机磷农药多残留分析检测技术，并不断发展了一系列的行业标准和国家标准，例如国家标准GB/T173311998果蔬食品中有机磷和氨基甲酸酯类多

12、种农药残留的分析和测定。庞国芳等建立了有机磷农药多种残留的GCMS分析方法，其中之一已经在2005年成为国家标准GB/T196482005，这个国家标准非常适用于分析检测黄瓜、香蕉、犁、芒果等多种果蔬的分析测定，而且检测限为0000206000MG/KG。最近十年以来，采用HPLC进行农药多残留分析已经相当普及，大多是分析检测气相色谱不能够分析检测的有机磷农药，例如甲拌磷久效磷，甲胺磷或乙酰甲胺磷。对复杂样品的多残留分析，采用液相色谱法进行分析十分简便。HPLC对各种有机磷农药的检出限介于005075MG/KG之间。虽然气相色谱法和液相色谱法两种方法具有很多共同有点，例如灵敏度高、特异性强、准

13、确度高、重复性好等，但是液相色谱法样品的前处理过程非常复杂、仪器化程度非常高而且仪器价格昂贵、分析速度较慢，明显不适合于大量样品的筛选分类与分析检测。132免疫分析法免疫分析法IMMUNOASSAY,IA是以抗原抗体特异性结合和识别反应为基础的生物分析方法。根据不同的标记物，免疫分析法分为荧光免疫法FIA、酶免疫法EIA、放射性免疫法RIA等。免疫分析法拥有安全可靠、灵敏度高、特异性强、方便快捷、分析成本、低分析大容量等优势。而且与色谱法相比较一般不需要高端精密仪器，比较容易传播和推广，且可简化甚至消除前处理过程。假如未来能开发成试剂盒，可广泛用于快速分析监测大量样品和现场样品9。然而放射性免

14、疫法存在放射性防护和放射性废物处理等缺点，应用受到极大限制，所以后来免疫分析法的研究方向主要是酶标记免疫分析法。另据相关报道，已有上百种农药建立起ELISA检测方法，如甲基异柳磷、地虫硫磷、治螟磷、特丁硫磷、苯线磷等。某些有机磷农药的检测限已经达到NG甚至PG级以上，甚至已经开发出一些商品化试剂盒，这些试剂盒已经广泛用于大量样品和现场样品的快速分析监测，农业部食品安全检验司FSISUSDA、美国环保局EPA和美国分析化学家学会AOAC分别制定了有关农药多残留的免疫分析检测试剂盒的评定等级和许可标准10。虽然ELISA检测法具有特异性很强的优点，并且能实现一次性批量检测，但是，ELISA检测法需

15、要具备一定的实验条件，需要一定的仪器设备，并且需要一定的专业培训人员才可分析检测，对于基层和偏远地区应用等有较大局限性。在这种情况下，研究人员开始关注起一种新型的免疫检测方法胶体金免疫层析法。胶体金免疫层析法具有简单快速的优点，开发的试剂盒携带更为方便，适合定性、半定量分析检测，该法应用于检测有机磷农药残留已经非常成熟，该法甚至比ELISA法检测更为快速，更适合现场检测，即使没有相关专业知识也可进行简单操作，目前市场上试剂盒已经实现商品化，但是还没建立相关的行业技术标准。133传感器法传感器法是农药免疫分析技术与传感技术相结合而建立起来的综合分析方法，所以可以说这是免疫4分析方法的一种分支或延

16、伸。检测有机磷农药的生物传感器主要是以乙酰胆碱酯酶或胆碱酯为基础。农药速测卡是对农药具有高度敏感的胆碱酯酶和显色剂做成的酶试纸，可以简单快速地分析检测蔬菜和水果中氨基甲酸酯和有机磷，该快速检验检测方法已经通过国家标准委员会审核，定为国家标准方法GB/T50091992003，该方法操作简单、成本低廉且快速灵敏，快速初筛可以采用，但检测范围有限，准确度较低6。14本研究的提出有关蔬菜和水果中有机磷农药残留检测的相关研究报道36及检测方法标准711比比皆是。等张宁12、张艳林等13、刘辉14、吴武杰15、唐勤学16等对有机磷农药残留检测技术的研究进展和研究方向进行了非常全面的综述。我国也已经制定了

17、30多个涉及有机磷农药多残留检测方法的国家标准；有关行业和相关部门制定的标准多达50多个。但是检测方法涉及韭菜大白菜果、茭白等复杂样品的很少。复杂食品中含量差别大、含有组分种类多、干扰成分已知信息少。许多食品中含有大量能干扰有机磷农药分析的干扰成分，包括从无机物到有机物，从常量级分析物到痕量级分析物，从小分子物质到大分子物质，从离子型、强极性化合物到非极性化合物，甚至会有上百种干扰成分。而这些干扰成分的存在，使食品中有机磷农药的分析检测更为困难，影响了最终分析测定结果的准确度。因此，我们在前人的研究基础上，研究建立起了能够分析检测复杂的样品如大白菜、苹果等中多种有机磷农药残留分析方法，适用于常

18、规检测，更准确、可靠、灵敏，能够满足快速分析、准确定性定量的分析检测要求。2材料与方法21试剂与标准品水去离子水。乙腈气相色谱纯；丙酮气相色谱纯；甲苯气相色谱纯乙酸乙酯气相色谱纯；5正已烷乙酸乙酯11，VV量取50ML正已烷和50ML乙酸乙酯，混匀；无水硫酸镁400灼烧5H，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中以待备用；氯化钠150烘烤5H，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中以待备用。5种有机磷类农药标准物质，详细见表2，由宁波农产品质量检测中心提供。标准储备溶液分别往已经准确称取100MG的农药各标准物质的小烧杯中加入少量丙酮溶解，然后转移至100ML容量瓶中，再用少量丙酮多次洗涤小烧杯，洗涤

19、液倒入容量瓶中，最后用丙酮定容至刻度处，混匀，配成标准储备溶液浓度为100MG/L，于4冷藏保存备用。混合标准储备液根据各农药在使用仪器和本次实验色谱条件下的响应值，逐一准确吸取一定体积的的单个农药储备液分别注入同一容量瓶中，用丙酮稀释至刻度处，配制成农药混合标准储备溶液待用。混合标准工作溶液使用前，先计算比例，然后用丙酮将混合标准储备液稀释成所需要浓度的标准工作液。除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂和蒸馏水。表25种有机磷农药的基本参数序号中文名称英文名称结构式分子式分子量1敌敌畏DICHLORVOSC4H7CL2O4P220982乐果DIMETHOATEC5H12O3PS2

20、N229963甲基对硫磷METHYLPARATHIONC8H10NO5PS263214毒死蜱CHLORPYRIFOSC9H11CL3NO3PS35055对硫磷PARATHIONC10H14NO5PS29126622仪器与设备气相色谱仪AGILENT6890N，配火焰光度检测器，FPD磷滤光片，美国安捷伦科技有限公司；氮吹仪HGC24，天津恒奥科技公司；高速组织捣碎机DS200，江阴市周庄科研机械厂；KQ300E超声波清洗器昆山市超声仪器有限公司；ENVICARB固相萃取小柱05G，3ML，SUPELCO公司；PP材质带盖离心管50ML，上海安谱科学仪器有限公司；电子天平METTLERTOLED

21、O公司；DB1730M053MM025M，石英毛细管柱；除非另有说明，分析时均使用符合国家标准A级玻璃量器。23样品制备与保存实际样品大白菜、苹果购买于宁波市农贸市场。从所购全部样品中取出具有代表性的样品的可食部分约500G，用干净的纱布轻轻擦去样品表面的附着物，用捣碎机全部彻底磨碎混合均匀，均分成两份，分别装入干净容器中，密封，标记，并冷冻存放。在样品制备过程中，注意做好各类措施，以防止样品受到污染，以至检测不符合真实值。24样品处理241提取准确称取均匀样品1000G精确到001G,置于50ML塑料离心管中，加入约10ML乙腈，再加入约4G无水硫酸镁和1G氯化钠，盖上盖子剧烈震荡2MIN后

22、，以5000R/MIN的转速离心5MIN，在室温下静置15MIN，使乙腈相和水相分层。吸取上层乙腈相装入另一50ML塑料离心管，再加入约10ML乙腈，重复提取一次，合并两次提取液，并加入1G无水硫酸镁，剧烈震荡后，再以5000R/MIN的转速离心1MIN，移出上清液到烧杯中，将其置于水浴锅70中,通入氮气40,吹至只有几滴乙腈即可停止氮吹，让残余乙腈在室温条件下自然完全挥发，氮气浓缩乙腈的最后处理是非常关键的，这直接影响到添加回收率的高低。242净化将ENVICARB/PSA小柱装在固相萃取装置上，先用5ML乙腈混合溶剂预淋洗小柱，保持流速约为71ML/MIN。将提取液通过小柱，再用10ML乙

23、腈混合溶剂洗脱，收集全部洗脱液10ML玻璃刻度试管，放于40下氮吹浓缩近05ML，用丙酮定容至10ML，供GCFPD分析检测。25仪器测定条件A色谱柱DB1730M053MM025M50聚苯基甲基硅氧烷；B柱箱升温程序100保持05MIN，以25/MIN升温至180，以20/MIN升温至250，保持10MINC载气氮气，纯度9999，恒流模式，流量为20ML/MIN；燃气氢气，纯度9999，流量为80ML/MIN；助燃气空气，流量为100ML/MIN；D进样口温度220；E进样量1L；F）进样方式不分流进样；G）检测器温度250。26定量测定在25测定条件下，采用外标法定量。根据实际样品溶液中

24、被测物残留的含量多少，选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作溶液和实际样品溶液中被测物的响应值都要在仪器的线性范围内，若含量超过制作的标准曲线范围，那么应该稀释到合适浓度后再进行分析检测，这样才能保证数据的准确性。27添加回收和精密度实验在100G可控制样品中添加标样，让其浓度为02MG/KG，然后进行添加回收试验，每个水平做3个平行样。样品均按2426测定步骤分析检测，测定每个样品含量，计算添加回收率和变异系数。828结果计算与表述试样中每种有机磷农药残留量按下式（1）计算AICIVXI（1）AISM式中XI试样中每种有机磷农药残留量，MG/KG；AI样液中每种有机磷农药的峰面积；CI标准工

25、作液中每种有机磷农药的浓度，MG/KG；V样液最终定容体积，ML；AIS标准工作液中每种有机磷农药的峰面积；M最终样液代表的试样质量，G。3结果与分析31样品提取剂的选择有机磷农药残留检测方法中的提取溶剂种类非常多，有乙酸乙酯5、环己烷乙酸乙酯11，VV6、丙酮二氯甲烷体积比1111、乙腈17等。本论文，在前人的研究基础上，对乙腈、环己烷乙酸乙酯等提取溶剂进行了比较研究。在10G新鲜苹果中添加混标使样品含有05MG/KG的农药，放置2H，按24处理样品，保证混标彻底渗透到空白样品中。实验结果表明（如图1，图2），乙腈做为提取溶剂，添加回收率比环己烷乙酸乙酯高，不仅能有效的提取5种有机磷农药残留

26、量，并且能减少复杂基质中的部分干扰。因此，随后的研究选择乙腈做为实验的提取溶剂。图1乙腈为提取溶剂9图2环己烷乙酸乙酯为提取溶剂32样品净化的优化中国已经开发建立了众多有关有机磷农药多残留的检测方法，由于使用选择性极强的FPD检测器进行检测，因此常常对样品提取液不进行净化处理，直接进样分析检测样品。但对于复杂基质，由于干扰因素大，无法实现较准确的定性定量分析检测，所以需要净化。比较常用的净化手段是固相萃取SPESOLIDEPHASEEXTRACTION，其中常用的吸附柱填充料有氧化铝、FLORISIL、活性碳和硅胶等18。固相萃取与传统的液液萃取技术相比较具有明显有点，如操作简单，节约溶剂，选

27、择性高，线性范围宽，10分离效果好，有较好的准确度和精密度等。由于植物类中的共萃物具有一定的极性，因此一般用弱极性的淋洗液，淋洗液极性越低，共萃干扰物淋洗出来的越少，净化效果越好。本研究，在前人研究的基础上，比较了ENVICARBPSA及AGILENT种柱子，实验结果表明，ENVICARBPSA的净化效果较后者较好。因此，随后的实验均采用ENVICARB/PSA柱子进行净化处理。洗脱剂的选择直接关系到测定结果回收率的高低，如果洗脱剂极性非常弱，有些组分有可能不被彻底洗脱，回收率会较低。如果洗脱剂极性非常强，会将一些干扰成分洗脱下来，净化效果不好。实验分别用正已烷、正已烷乙酸乙酯11，VV等2种

28、极性强度不一样的洗脱剂淋洗一定浓度有机磷农药及样品空白液的柱。通过表3的数据对照，可以很明确的看到所用洗脱溶剂、洗脱步骤均相同，检测方法也相同，结果表明，正已烷乙酸乙酯11，VV混合溶洗脱剂的洗脱效果最好。用5ML正已烷乙酸乙酯11，VV混合溶剂预淋洗小柱，保持流速约为1ML/MIN。将提取液通过小柱，再用10ML正已烷乙酸乙酯11，VV混合溶剂洗脱，收集全部洗脱液于10ML玻璃刻度试管，置于40下氮吹浓缩至近05ML，用乙酸乙酯定容至10ML，供GCFPD分析检测。表3萃取柱性能和淋洗液种类比较萃取柱种类ENVICARBPSAAGILENT加标02PPM峰面积PAS回收率峰面积回收率敌敌畏1

29、257548436344270821653575457乐果1014674665535528853841624615甲基对硫磷19231275663112558513857201084563毒死蜱26091815696134651617806821706654喹硫磷2725200273416796162126771187668833仪器方法的建立有机磷农药种类繁多，一次性检测多种有机磷农药的分析检测方法明显节省分析成本和快速简单，于是成为理想的检测方法之一。色谱分离法的原则是尽可能在短时间内将混合物完全分离，因此载气和柱温的设置条件是非常重要的，柱温高载气流速快，分离效果差；柱温低载气流速慢，分

30、析时间过长。由本研究，在前人研究的基础上，结合不同有机磷农药的不同物理性质和化学性质，经摸索和优化，按25色谱条件，能非常有效地对5中有机磷农药进行分析检测，参考保留时间见图1GCFPD。从图1可见,色谱峰分离良好，12种有机磷农药的色谱峰流出顺序为11图35种有机磷农药标准溶液气相色谱图从图1可见,色谱峰分离良好，5种有机磷农药的色谱峰流出顺序为1敌敌畏（340MIN）2乐果（677MIN）3甲基对硫磷（923MIN）4毒死蜱（1035MIN）5喹硫磷（1116MIN）34绘制标准曲线根据有机磷农药多残留检测要求，分别配制005，01，02，05，1，2MG/L混合标准工作溶液，存贮在棕色小

31、瓶中，于4冷藏保存备用。在25色谱条件下进样，得到不同浓度的色谱图。以保留时间定性，以各个有机磷的峰面积对标准溶液的浓度做标准曲线，按信噪比的3倍计算检出限LOD。经过测定方法操作以下实验，5种有机磷农药的线性回归方程及检出限如表4，能满足国内对5种有机磷农药残留限量要求。图4标准曲线12000510152001000200030004000峰面积PAS浓度PPM敌敌畏乐果甲基对硫磷毒死蜱喹硫磷表45种有机磷农药的线性回归方程和最低检出限编号农药线性回归方程相关系数剩余标准偏差仪器检出限（MG/KG）1敌敌畏Y1038357X82664099395916000022乐果Y1131297X124

32、8280986441502000013甲基对硫磷Y1530715X1138680994931235000024毒死蜱Y1901730X1193630995611427000015喹硫磷Y2013673X13027809965413410000535添加回收率与精密度实验回收率实验在10G新鲜大白菜和苹果中添加混标使样品含有02MG/KG的农药，即将1MG/L的有机磷混标20ML加入到10G的有机磷样品中，放置2H，按24处理样品，保证混标彻底渗透到空白样品中。精密度实验将大白菜和苹果的添加回收率实验平行检测3次，分析计算出添加回收率，再计算出此法的精密度。添加回收率按如下公式（2）进行计算10

33、0XYP（2）式中X某一浓度或含量水平样品测试的平均值；Y添加样品测试的平均值；添加量；P添加回收率。13对5种有机磷农药分别在大白菜和苹果中以02MG/KG浓度的添加水平进行回收率实验，对每个样品分别平行测定3次，仪器自动计算回收率和RSD。因为敌敌畏出峰时间比较早且敌敌畏易分解，分离检测过程在受到温度，仪器条件的影响比较大；而乐果、甲基对硫磷、毒死蜱和喹硫磷这四种农药的物化性质非常稳定，出峰时间较晚，分离检测过程受仪器条件、温度的影响较小。总得来说，得到了较好的实验结果，除了敌敌畏，其它4种有机磷的RSD均在10以内，回收率为6581115，说明该方法具有较好的精密度和准确度，得到的数据是

34、准确可靠的，满足实际分析的精度要求表4。为了提高回收率，要掌握好氮吹的程度，最后不要彻底吹干，残余几滴乙腈让其在自然条件下挥发完全。如果完全吹干，那么对挥发性较强的敌敌畏影响很大，其回收率降低较明显。因为敌敌畏出峰时间比较早且敌敌畏易分解，分离检测过程在受到温度，仪器条件的影响比较大；而乐果、甲基对硫磷、毒死蜱和喹硫磷这四种农药的物化性质非常稳定，出峰时间较晚，分离检测过程受仪器条件、温度的影响较小表45种农药添加回收率测定结果N3农药名称添加水平MG/KG大白菜苹果回收率（）变异系数（）回收率（）变异系数（）敌敌畏020719105658136乐果0208824421086275甲基对硫磷0

35、20991572965132毒死蜱020798846826721喹硫磷020111532188882536实际样品的检测利用本研究建立的分析方法，对5种农药残留进行了检测，结果见表5，检出的农药残留包括毒死蜱，色谱图见图2。本文采用固相萃取的样品前处理方法和GCFPD分析条件，建立了检测农药多残留的方法。检测限低，灵敏度高，抗基体干扰性好，更为有效地排除假阳性。5种农药的检测下限可达00001MG/KG，完全满足国内对农药残留限量的要求。为果蔬安全质量提供一种可行的农药多残留测定方法。表5实际样品分析结果情况实际样品敌敌畏残留量乐果残留量甲基对硫磷残留量毒死蜱残留量喹硫磷残留量大白菜未检出01

36、29未检出01580100苹果002500300048未检出0020144结论采用SPE法净化和GCFPD法分析检测果蔬中5种有机磷农药残留量，采用添加法，即对本底不含5种有机磷农药的大白菜、苹果等样品，添加02MG/KG水平的样品进行回收测定，水平单独测定3次，回收率和精密度试验结果详见表4。线性范围为0986409965，回收率范围为6581115，相对标准偏差为13136。该方法的回收率比较高，相对标准偏差比较小，满足果蔬中有机磷农药残留量测定的检测要求，与传统液液提取方法相比具有绝对优势，是一种操作简便、分析速度快、试剂用量少、高效灵敏且使用范围广的方法。15参考文献1中国农业百科全书

37、编辑部中国农业百科全书农药卷M,北京农业出版社,19932花蕾主编植物保护学M,北京科学出版社,20093日本厚生劳动省食品残留农业化学品肯定列表制度M,食品卫生法,20064STANHJPESTICIDERESIDUEANALYSISINFOODSTUFFSAPPLYINGCAPILLARYGASCHROMATOGRAPHYWITHMASSSPECTROMETRICDETECTIONSTATEOFTHEARTUSEOFMODIFIEDDFGMULTIMETHODS19ANDAUTOMATEDDATAEVALUATIONJJCHROMATOGRA,2000,8923473775LEHOTAYS

38、JELLERKIDEVELOPMENTOFAMETHODOFANALYSISFOR46PESTICIDESINFRUITSANDVEGETABLESBYSUPERCRITICALFLUIDEXTRACTIONANDGASCHROMATOGRAPHY/IONTRAPMASSSPECTROMETRYJJAOACINT,1995,7838218306佟玲,李重九含硫蔬菜中50种农药多残留的气相色谱一串联质谱检测技术研究J分析测试学报，2008,2799309357杨艳玉,范三红,薛平,杜利君固相萃取一气相色谱法检测菠菜中的54种有机磷J农产品加工学刊,2008,1211158GB/T20769200

39、8,水果和蔬菜中450种农药及相关化学品残留量的测定S9GB/T196482006,水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留的测定气相色谱质谱法S10GB/T5009202003,食品中有机磷农药残留量的测定S11SN033495出口水果和蔬菜中22种有机磷农药多残留量检验方法S12唐勤学，陶小林，黎司有机磷农药残留检测技术的研究进展J化工时刊，2008，22（9）687213吴武杰,保志娟,权小菁,高富荣有机磷农药残留检测前处理技术研究进展J,化学分析计量,2009,184889014刘辉食品中残留有机磷农药分析方法研究J安徽农业科学,2008,36166630663215张艳林有机磷农药残

40、留检测方法研究进展J科技信息,200923535516张宁果蔬中有机磷农药残留快速检测方法研究J安徽农业科学,2005,338471147217NY/T7612008,蔬菜和水果有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定S18黄德智,岳永德,汤锋农药残留分析的研究进展J,安徽农业科学,2002,304523526,54119NY/T13802007蔬菜水果中51种农药多残留的测定气相色谱S20GB/T50091992003,蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测S21AYYAGARIMS,KAMTRKARS,PANDER,ETALBIOSENORSFORPESTICIDE

41、DETECTIONBASEDONALKALINEPHOSPHATESCATALYZEDCHEMILUMINESCENCEJMATERIALSSCIENCEANDENGINEERING,1995,C219119622杨曼君农药残留的免疫分析法J农药科学与管理,1996,4202223METHODFORTHEDETERMINATIONOFORGANOPHOSPHORUSANDPYRETHROIDPESTICIDESVIAGASCHROMATOGRAPHYWITHELECTRONCAPTUREDETECTIONJAGRICFOODCHEM2010,58,13961402RONALDEHUNTER,J

42、R,ANNEMRIEDERER,ANDPBARRYRYAN24ENZYMATICDETERMINATIONOFORGANICPHOSPHORUSINSECTICIDESPAULAGIANGANDSAHALL25HAMMOCKBDMUMMASZWEIGETRECENTADVANCESINPESTICIDEANALYTICALMETHODOLOGYMACS,WASHINGTONDC,1980,3213521626HOOIJSHUUREWJ,KIENTZCHE,DIJKSMANUATCHROMATOGRAPHIA,2001,5429527JELINEK,CF1985FOCUSCHEMICALCONT

43、AMINANTSINFOODSJJASSOCOFFANALCHEM,681063106828KUMARMA,CHUHANRS,THAKURMS,ETALAUTOMATEDFLOWENZYMELINKEDIMMUNOSORBENTASSAYELISASYSTEMFORANALYSISOFMETHYLPARATHIONJANALYTICACHIMICAACTA,2006,560303429LEVA,DYKMAN,VLADIMIRA,ETALUSEOFTHEDOTIMMUNOGOLDASSAYFORTHERAPIDDIAGNOSISOFACUTEENTERICINFECTIONSJFEMSIMMUN

44、OLOGYANDMEDICALMICROBIOLOGY2000,2713513730MARRSTCTOXICOLOGYOFPESTICIDESINBLAIANTINEB,MARRST,TURNERPEDSGENERALANDAPPLIEDTOXICOLOGYNEWYORKMACRMILLANPRESS,1993132931MCADAMDP,HILLAS,BEASLEYHL,ETA1MONOANDPOLYCLONALANTIBODIESTOTHEORGANOPHOSPHATEFENTROTHION1APPROACHTOHAPTENPROTEINCONJUGATIONJJAGRICFOODCHEM

45、1992,401466147432NAOKINAGATANI,RYOUTANAKA,TERUKOYUHI,ETALGOLDNANOPARTICLEBASEDNOVELENHANCEMENTMETHODFORTHEDEVELOPMENTOFHIGHLYSENSITIVEIMMUNOCHROMATOGRAPHICTESTSTRIPSJSCIENCEANDTECHNOLOGYOFADVANCEDMATERIALS,2005,7327027533WANLIXING,LIRENMA,ZHONGHUAJIANG,FUHUANCAO,MINGHONGJIAPORTABLEFIBEROPTICFORDETEC

46、TIONOFMETHSULFURONMETHYLJTALANTA,200052879883934桂文君,金仁耀,黄雅丽等毒死蜱多克隆抗体的制备J农药学学报2006,8210911435郭剑平,昊启庆,高芬芳等免疫化学方法在检测农药小分子中的应用J毒理学杂志2006,201545636郭玉莲,农药残留的酶联免疫分析技术及研究进展J农机化研究,2006220120337韩鹤友,游子涵化学发光联用技术在兽药残留分析中的应用进展J分析科学学报,2005,21555255638韩丽君,贾明宏,钱传范等甲基对硫磷的酶联免疫吸附分析ELISA研究J农业环境学学报,2005,2418719039贾明宏,钱传范,韩丽君等甲基对硫磷人工抗原的合成与鉴定J农药学学报,2003,52223240金仁耀,桂文君,吴建祥等抗毒死蜱单克隆抗体的研制J浙江大学学报农业与生命科学版32659L59720041王升吉,杨崇良,尚佑芬等免疫分析法在农药残留检测中的应用及前景J山东农业科学,20054727542王爽食品中农药残留分析方法的研究进展J贵州农业科学2007,35213513943乌日娜,李建科生物传感器在农药残留分析中的研究现状及展望J食品与机械,2005,2125456