1、黄酮的定性、定量分析及生物活性研究发展摘 要:对柿叶黄酮的定性定量分析方法进行了简要的阐述;对黄酮类化合物的多种生物活性及作用机理进行了简要概括,为黄酮类研究提供参考。 关键词:黄酮类化合物 生物活性 研究进展 黄酮类化合物是药用植物中主要活性成分之一,在医药方面具有广泛的应用,如抗氧化、消炎抑菌、降血脂、降血压、降血糖、等作用,用于治疗心脑血管、抗肝脏病毒及治疗癌症等方面。还可作为天然添加剂,如天然甜味剂、食用色素等。正因其在医药、食品及化工方面的重要研究价值而得到的人们普遍关注,本文主要对其定性、定量分析方法及生物活性研究进展进行了综述。 一、定性分析 1.盐酸-镁粉法 大多黄酮醇、二氢黄
2、酮及二氢黄酮醇类显红紫红色,黄酮类显橙色,异黄酮及查尔酮类无变化。如芦丁的盐酸镁粉反应中溶液由黄色变红色。 2.色谱-质谱联用法 色谱-质谱联是以色谱作为分离手段以质谱作为检测手段一种高效分析方法。目前 MS 联采用的方法主要有 GC, HPLC, CE 等。Sari Hakkinen 1等采用高效液相色谱和电喷雾质谱联用分析浆果中的黄酮醇糖苷配基和黄酮醇糖苷。 3.平面色谱法 平面色谱法包括纸色谱法和薄层色谱法。薄层色谱法具有设备简单、操作方便、分离速度快等特点。余戟2等通过纸色谱法分离和检测桑色素、杨梅黄素等 8 种黄酮苷和苷元。 此外还有核磁共振谱法、单晶 x-射线法衍射等定性分析方法
3、二、定量分析 1.分光光度法 硝酸铝比色法是用分光光度法测定黄酮类化合物的主要方法。有操作方便,易于测量计算的特点,但是硝酸铝比色法具有专一性差,测定和处理过程中易受颜色变化影响等缺点。其作用原理是黄酮类化合物与AlNO3 进行络合显色,再以芦丁为标准溶液,并在一定的波长处测定黄酮类化合物的含量。 2.色谱法 高效液相色谱法(HPLC)以其工作效率高、自动化、测量准确快速的特点成为测定黄酮类化合物含量的有效方法之一,该方法可以分析黄酮苷元的含量。侯镜德3等以芦丁为标准物,检测毛竹叶中的总黄酮含量。此外还有超临界色谱法,但超临界流体色谱法因其仪器价格高昂,而在我国尚未普及使用。 3.高效毛细管电
4、泳 HPCE 具有检测方便、工作效率高、分辨率高等特点。在黄酮类化合物的分析中,该方法在药物研究、生物技术方面应用前景广阔。 三、黄酮活性研究 1.抗氧化作用 黄酮类化合物的抗氧化作用机理是单线态氧和含氧自由基具有清除的作用。此外类黄酮还可作为自由基消除剂以及单线态氧消除剂,来抑制脂质的过氧化,广泛应用于抗衰老的化妆品等方面。 2.提高免疫力作用 黄酮类化合物具有增强机体免疫功能的作用。但其中的机理目前尚不明确。杨凤华等4观察黄芪水溶性黄酮类物质对小老鼠细胞免疫功能具有促进作用。 此外黄酮类化合物可作为抗肝脏病毒、止咳平喘、抗菌消炎、抗心血管病,抗糖尿病等药物,可应用于食品安全方面如天然天然甜
5、味剂、天然食用色素,亦可用于生产发展方面如无公害农药。 四、应用前景及展望 黄酮类化合物对人体具有多种生理活性,不良反应少,具有极大的开发和应用前景,比如在食品、医学、化学生产等方面。随着分离提取技术的突飞猛进,大量的新黄酮类化合物为人们所发现,也掀起了对它们开发研究的革命热潮。由此开发了数种含有该物质成分的产品,比如黄酮的口香糖、黄酮茶叶、天然色素等,为人民的生产生活造福。 参考文献 1 Sari Hakkinen, Seppo Auriola. High-performance liquid chromatography with electrospray ionization mass
6、spectrometry, and diode array ultraviolet detection in the identification of flavonol aglycones and glycosides in berries. Journal of Chromatography A,1998, 829: 91 一 100. 2 佘戟,陈杰,莫丽儿等.胶束纸色谱法分离和鉴定黄酮类化合物J.广东医学院学报, 1999, 17(2): 102-104. 3 侯镜德,张廷志,肖军.高效液相色谱法测定苦竹叶中总黄酮J.宁波高等专科学校学报,2001, 13 增刊:89-91. 4 杨凤华,康成,李淑华,等! 黄芪水溶性黄酮类对小鼠细胞免疫功能的影响J. 时珍国医国药,2001, 13(12):718-719. 5 李鹏,李其福,黄胤怡等.抗辐射植物黄酮类化合物研究进展J.生态学杂志,2001,20(6):36-40.