1、毛细管气相色谱法测定比阿培南有机溶剂残留量摘 要：目的 建立气相色谱（GC）测定比阿培南中甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氢呋喃 5 种有机残留量的测定方法。方法 采用直接进样毛细管气相色谱法，色谱柱为：DB-624 色谱柱（30m530 m3.0 m） 载气为氮气，FID 检测器，水为溶剂。结果：此色谱条件下被测物均能得到很好的分离，峰面积与质量浓度呈良好的线性关系，回收率良好。结论：方法简便、灵敏，结果准确、可靠，适用于雷替曲塞中有机残留量的检测。 关键词：雷替曲塞 有机残留量 毛细管气相色谱法 比阿培南是一种碳青霉烯类合成抗生素；内盐白色或类白色粉末。溶于水，不溶于一般有机溶剂。对肾脱氢肽
2、酶比美洛培南更稳定，不需合用酶抑制剂。抗革兰氏阴性菌，特别是抗绿脓杆菌的活性比亚胺培南强；对需氧性革兰阳性菌的抗菌活性稍低于亚胺培南；抗厌氧菌的活性与亚胺培南相同。由于在原药合成过程中使用了有机溶剂甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氢呋喃，在成品中可能会有一定量的残留。按中国药典 2010 年版（附录）规定，该 3 种有机溶剂均有残留限量。对于原药中 3 种有机残留溶剂的色谱分析及残留量的测定尚未见文献报道。笔者参考了有关文献采用直接进样毛细管气相色谱法，测定了比阿培南原料药中甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氢呋喃的残留量。方法简便、灵敏，结果准确可靠。 一、仪器与试药 1.仪器 Agilent 7
3、890A 2.试药 比阿培南原料药 3 批 二、方法与结果 1.色谱条件 DB-624（30m530m1.0m）毛细管柱； 进样口温度为 200，检测器温度为 240。程序升温；起始温度 35，恒温 4.5 分钟后，以每分钟 30的升温速度升至 150，维持 5 分钟； 分流比：10：1 ； 以水为溶剂，直接进样 1l。 2.供试品溶液与对照品溶液的制备 取比阿培南样品 0.1g，精密称定，用水 1.0ml 溶解，作为供试品溶液。 精密称取甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氢呋喃各适量，加水制成每 1ml 中分别约含甲醇 300g、丙酮 500g、乙腈 41g、二氯甲烷60g、四氢呋喃 72g 的
4、混合溶液，作为对照品溶液。 3.系统适用性溶液 取水空白溶剂 1l 进行测定，结果表明溶剂无干扰。取对照品溶液1l 进行测定，记录色谱图，甲醇 tR3.4min，丙酮 tR4.6min，乙腈tR4.9min，二氯甲烷 tR6.2min，四氢呋喃 tR7.6min， 。结果表明，各被测溶剂之间分离度良好。 4.线性范围及标准曲线 取甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氢呋喃适量，精密称定，用水稀释制成一系列溶液，照上述色谱条件分别进行测定，以被测物峰面积为纵坐标，以被测物的质量浓度为横坐标进行线性回归。上述 5 种被测物的线性范围（g/ml）依次是：30.1361.2， 50.2600.4， 4.10
5、49.2，6.2174.5， 7.2186.5。回归方程及相关系数依次是： Y1 =0.6104X1 - 1.8120，r1=0.9993； Y2 =0.5413X2- 1.004， r2=0.9996； Y3= 0.6217X3 - 0.6154， r3=0.9998。 Y4= 0.5307X3 - 0.1054， r3=0.9996。 Y5= 0.6714X3 - 0.3412， r3=0.9995。 5.精密度实验 在上述色谱条件下，取对照品溶液（每 1ml 中含甲醇 300g，丙酮500g，乙腈 41g，二氯甲烷 60g，四氢呋喃 72g，的混合溶液） ，连续进样 6 次，计算对照品溶
6、液中被测溶剂的 RSD 依次为 2.17% ，2.32%，1.65%，1.43%，1.52%。 6.最低检测限 取对照品溶液用水逐步稀释，依据 S/N3，确定甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氢呋喃的最低检测限依次是 1.5，0.8，2.2，3.1，2.6。 7.回收率实验 取甲醇约 0.30g，丙酮约 0.50g，乙腈约 0.041g，二氯甲烷约0.06g，四氢呋喃约 0.072g，精密称定，置已加少许水的 10ml 容量瓶中，加水至刻度，摇匀。移取储备液 1.0ml，置 10ml 容量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得每 1ml 中含甲醇约 3000g，丙酮约 5000g，乙腈约410g，二氯甲烷约
7、 600g，四氢呋喃约 720g 的混合溶液。 溶液 1： 精密移取混合溶液 0.8ml，置 10ml 容量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得对照品溶液的 80%溶液。 溶液 2： 精密移取混合溶液 1.0ml，置 10ml 容量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得对照品溶液的 100%溶液。 溶液 3： 精密移取混合溶液 1.2ml，置 10ml 容量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得对照品溶液的 120%溶液。 取相同批次的比阿培南约 0.1g，精密称定，平行 9 份，分别移取溶液 1、溶液 2 和溶液 3 各 1.0ml 溶解，每 3 份加一种溶液，分别摇匀，即得 9 份供试品溶液。按外标法以峰面积计算回收率。回收率依次分别为：101.4%，100.9%，99.6%，100.4%，98.2%，RSD 在 1.17%3.07%之间。 8.供试品的测定 照 2.2 项下的方法制备供试品溶液与对照品溶液， 在上述色谱条件下测定， 3 批原料药中检测出甲醇分别为 0.010%，0.009%，0.009%，其他溶剂未检出。 三、讨论 本方法简便，灵敏，精密度，回收率符合中国药典 2010 年版的要求，因此本色谱方法适用于雷替曲塞有机溶剂残留量的检测。
