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免疫固定电泳与交又免疫电泳.DOC

1、免疫固定电泳与交又免疫电泳免疫固定电泳(immuno fixationel ectrophoresis,IFE)是 Alper和Johnson于 1969年推荐的一项具有实用价值的电泳加沉淀反应技术,可用于各种蛋白质的鉴定。该方法原理是先将待检样品在凝胶板上作区带电泳,将蛋白质分离成不同区带,然后在其上覆盖抗血清!当抗血清与某区带中的单克隆免疫球蛋白结合,便形成抗原抗体复合物而沉淀。最后通过漂洗和染色,并与蛋白质参考泳道对照分析,可对各类免疫球蛋白及其轻链进行分型。免疫固定电泳图左图为 IgG 型;右图为 IgG 型免疫固定电泳最常用于 M蛋白的鉴定。方法是:先将患者血清或血浆在醋酸纤维膜或琼

2、脂上作区带电泳(6 孔),根据血清蛋白质的电荷不同将其分开;将 IgG、IgA、IgM、 轻链和 轻链的抗血清加于分离的蛋白质泳道上,参考泳道加抗正常人全血清用于区带对照;作用 30min后,洗去游离蛋白质,待干燥后用氨基黑染色;结果判新,M 蛋白被固定,形成窄而致密的沉淀带。本法可用于鉴定迁移率近似的蛋白和 M蛋白,免疫球蛋白轻链,尿液、脑脊液等微量蛋白,游离轻链,补体裂解产物等。免疫固定电泳最大的优势是分辨率强,敏感度高,操作周期短,仅需数小时,结果易于分析,目前已作为常规检测。交叉免疫电泳(crossed immuunoelectrophoresis,CIEP)是将区带电泳和火箭免疫电泳相结合的免疫电泳分析技术。CIEP是一种有效的抗原蛋白定量技术,可一次同时对多种抗原定量。分辨率较高,有利于各种蛋白组分的比较,对于蛋白质遗传多态性、微小异质性、蛋白质裂解产物和不正常片段等进行定性分析。上海越研生物科技有限公司提供+86-021-55785280 55785281

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