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气相色谱测定血液中的酒精含量医学应用.DOC

1、气相色谱测定血液中的酒精含量医学应用酒精的作用在医学和法医学上都很有意义。当医生需要知道酒精是否与病人的病情有关时,对血液或尿液中酒精的含量的估计就会起到相当关健的作用。从法医学的观点来看,酒精含量在突然死亡、驾驶事故以及有关以喝醉酒作为防卫性辩解等案件中是至关重要的。决定摄入酒后显示出最大乙醇浓度及量的时间的因素是:对象的体重、乙醇的量及浓度、摄入乙醇的方式、有无食物存在以及对象的身体状况。酒精的影响对不同的人以及在不同时间的同一个体都是各不相同的。其作用主要取决于各人的所处的环境和体质以及所饮酒精的稀释情况。饮用同等量的酒精对习惯性饮酒者所造成的影响较偶尔饮酒者小得多。药物有加强酒精效果的

2、作用。很多案例表明,酒精与巴比土酸盐类的协同作用是一些看似是自杀的死亡的一个原因,酒精本身可能是最常见的中毒致死的原因。装配有火焰离子化检测器及 Porapak Q 柱的气-固色谱技术在药物制备中一直被用来鉴定和检测乙醇、异丙醇以及丙酮。此项技术是用稀释过的样品的水溶液直接进样, 方法简单而直接。样品制备 将两份 0.5 毫升的异丁醇内标物 (浓度为 10mg/ml 水,其配制法为:用吸量管吸取12.4ml 异丁醇用水稀释至 1L ), 用吸量管分别吸入两个不同的 2-打兰(7.4 毫升)的壳型小瓶中,一个标为“已知”, 另一个标为“ 未知”。取 0.5ml 乙醇作标准物 (浓度为 50mg/

3、100ml 血液,其配制法为:吸 5ml 乙醇贮存液,再从血库中取 100ml 血液加以稀 释;所用的乙醇贮存液的配制法为:用水将 12.7 ml 的无水乙醇稀释至 1 升),并将其转移至一个 标为“ 已知” 的小瓶中。吸量管用内标溶液洗涤三次。用一支 10 微升的亨氏注射器, 取 0.5 微升的已知样和未知样各两份进样,分别测量乙醇和异丁醇的峰高。气相色谱参数 使用一台配有氢火焰检测器的气相色谱仪。火焰离子化检测器可用于检测含水的样品。柱子为不锈钢材料(6 英尺0.25 英寸外径), 用 30%聚乙二醇 2 万固定相涂布在用酸洗过的 60-80 目的 Chromosorb W 担体上。柱子用

4、氮气作载气于 180C 下吹扫过夜。操作条件为:炉温 100 或 130C进样口温度 160C氮气流速 35ml/min氢气流速 28ml/min氧气流速 100ml/min计算 用酒精和内标物的峰高进行计算,可采用下式进行计算:式中: W 1 = 乙醇的毫克数W2 = 100 毫升的未知物Cs = 标准乙醇溶液的浓度(50mg/ml)h x = 已知物中乙醇的峰高hs = 未知物中内标物(异丁醇)的峰高Rx = 已知物中乙醇的峰高Rs = 已知样中内标物(异丁醇)的峰高讨论图 1 显示了一份通过注射 0.5 微升血液-异丁醇内标混合物而 获得的典型的色谱图。图中各峰都被清楚地分开而且峰很尖锐

5、。表 1 给出了一些常见的挥发性化合物的保留时间和相对保留时间,这些挥发性化合物都与酒精的摄取、糖尿病及嗜好嗅粘接剂中的有机溶剂味等病有关。操作参数如柱温或载气流速并不是确定不变的,它们可随所研究的化合物的类型及所用气相色谱仪的性质不同而改变。其它填料也可用于该测定,包括 Hallcomid M 180L 涂布在 Chromosorb W 80-100 目的担体上或 Porapark Q 80-100 目的填料。Porapak 有不同的特性但它的优点是它是一种无需涂层的填料。注入系统的血液进入进样口并在那里被捕集,而挥发物被载气带入柱中。在柱中进样将会堵塞柱子。所以,如果使用一个长的进样口,将

6、有利于多次进样并能延长使用周期。使用六至八个月后,应将进样口拆开并除去被捕集在此的血液,若有必要,可用水清洗。仪器应在被再次使用前稳定一夜。根据峰高进行定量测定是令人满意的,但是,若所获得的峰太宽或不对称,也可根据峰面积进行定量。表 1 一些化合物的保留值炉温 100 度 炉温 130 度化合物 保留时间(min)相对保留时间(相对于EtOH)保留时间(min)相对保留时间 (相对于 EtOH)乙醛 2.56 0.73 1.25 0.60丙酮 2.38 0.68 1.62 0.76氯仿 5.62 1.61 3.25 1.53乙醇 3.50 1.00 2.12 1.00异丁醇 7.25 2.10 3.94 1.86异丙醇 l 3.19 0.91 2.06 0.97乙酸丙酯 4.50 1.29 2.75 1.30北京华盛谱信仪器有限责任公司制造和销售专业的色谱仪及配件

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