1、不常见细菌耐药表型结果探讨,胡付品华山医院抗生素研究所,药物敏感性试验方法,稀释法试管稀释法（肉汤稀释法）平板稀释法（琼脂稀释法）微量肉汤稀释法扩散法（纸片法）Kirby-bauer（K-B）法E-test自动化仪器,纸片扩散法,原理：将浸有抗菌药物的纸片贴在涂有细菌的琼脂平板上，抗菌药物在琼脂内向四周扩散，因此敏感细菌在纸片周围一定距离内的生长受到抑制。,如何制备菌悬液？,正确测量苯唑西林、万古霉素和利奈唑胺对葡萄球菌；以及万古霉素对肠球菌的抑菌圈直径,透射光,反射光,不要用反射光,要使用透射光,大肠埃希菌污染肠球菌；菌落再次纯分,铜绿假单胞菌有耐药菌落,抑菌圈内有菌落，怎么办?,第1问：如
2、何解释阿米卡星对大肠埃希菌的抑菌现象？,阿米卡星,厄他培南,J. Exp. Med., Jul 1948; 88: 99 - 131,药物：青霉素G细菌：-溶血性链球菌,矛盾的现象 (Eagle现象),指抗菌药物在高浓度的时候反而降低杀菌活性这种现象第一次由Eagle和Musselman两位科学家发现并报道。青霉素类抗菌药物在作用于葡萄球菌、溶血性链球菌以及肠球菌时出现药物低浓度（仍超过MIC值）时抗菌活性好于高浓度。,J. Exp. Med., Jul 1948; 88: 99 - 131,第2问：金黄色葡萄球菌D试验,erm基因编码改变的核糖体结构(23S rRNA甲基化)，导致对大环内酯
3、类和林可霉素类耐药。erm 基因需诱导，红霉素具诱导作用。若出现红霉素R而克林霉素S，但D试验阳性。若未进行D试验，克林霉素很可能会被报告敏感而误导临床用药。,第3问：如何解释万古霉素E-试验结果？,万古霉素依赖的粪肠球菌长期使用包括糖肽类、氨基糖肽类等抗生素压力下，必须依赖万古霉素才能生长,The change at the ninth codon resulted in the inactivation of the ddl gene andvancomycin-dependent growth.,第4问：铜绿假单胞菌对复方新诺明天然耐药？,第4问：铜绿假单胞菌对复方新诺明天然耐药？,20
4、11年CHINET监测6981株克雷伯菌属耐药率（%）,第5问：肺炎克雷伯菌体外药敏结果会显示对氨苄西林敏感吗?,肺炎克雷伯菌对氨苄西林天然耐药是天然产SHV型酶,160株肺杆中20株对氨苄西林敏感19株细菌SHV基因出现“点突变”，mRNA 逆转录失败，无法翻译出由SHV基因正确编码的-内酰胺酶。,第6问：大肠埃希菌对头孢噻肟的耐药机制？,第7问：如何解释大肠埃希菌对头孢唑啉S但头孢呋辛R的现象？,头孢呋辛,头孢唑林,头孢呋辛酶可水解头孢呋辛但不能水解头孢唑啉,第8问：大肠埃希菌纸片法药敏结果，结果可能吗？头孢唑林 S 头孢他啶R,第9问：这株大肠埃希菌可能的耐药机制是什么？,第10问：这株
5、铜绿假单胞菌可能的耐药机制是什么？,可能的机制：1、膜孔蛋白缺失：导致亚胺培南耐药2、AmpC酶：对头孢西丁耐药3、ESBL：对头孢他啶和头孢吡肟耐药,产ESBL菌株的检测,含酶抑制剂复合制剂与相应单药抑菌圈直径相差5mm，即判断该菌为产ESBLs菌株,MIC比值,假阳性结果,第12问：如何解释这株大肠埃希菌的药敏结果？,耐药阿莫西林、哌拉西林、头孢噻吩、头孢呋辛、头孢哌酮阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦敏感头孢噻肟、头孢他啶,第12问：如何解释这株大肠埃希菌的药敏结果？,ESBL确证试验阴性本株细菌产生TEM-1型内酰胺酶、膜孔蛋白缺失。头孢西丁的耐药性可能是由膜孔蛋
6、白缺失所致，而非-内酰胺酶Pa/Pb调控TEM-1b高表达所致，强启动子Pa/Pb是由弱启动子P3经32CT突变而成,第13问：肠杆菌科细菌对头孢西丁耐药就表示细菌产AmpC 酶吗？,肠杆菌科细菌对头孢西丁耐药只能表示该菌是产AmpC 的可疑菌株。某些类型的ESBL 也能水解头孢西丁,2009年14家医院大肠埃希菌的耐药率（%）（CHINET监测）,第14问：改良Hodge试验阳性就是产KPC酶？,改良Hodge试验检测假阳性结果,Figure 1. Phenotypic carbapenemase detection by MHT 1、K. pneumoniae ATCC BAA-1705,
7、 positive result2、K. pneumoniae ATCC BAA-1706, negative result3、CTX-M-producing K. pneumoniae clinical isolate4、KPC-producing K. pneumoniae clinical isolate,ETP,MEM,改良Hodge试验检测假阴性结果,第15问：这株大肠埃希菌对厄他培南可能的耐药机制是什么？,1. 厄他培南：13 mm2. 厄他培南+APB14 mm3. 厄他培南+EDTA14 mm4. 亚胺培南：30 mm5. 头孢吡肟：12 mm,第16问：这株大肠埃希菌对厄他培
8、南可能的耐药机制是什么？,1. 厄他培南：13 mm2. 厄他培南+APB+EDTA14 mm3. 美罗培南：28 mm4. 法罗培南：23 mm 5. 法罗培南+APB23 mm,第16问：这株大肠埃希菌对厄他培南可能的耐药机制是什么？,1、头孢美唑：26 mm2、头孢噻肟：11 mm3、头孢噻肟/克拉维酸：30 mm4、头孢他啶：22 mm5、头孢他啶/克拉维酸：30 mm6、头孢噻肟/硼酸：13 mm,第16问：这株大肠埃希菌对厄他培南可能的耐药机制是什么？,小结,细菌耐药越来越严重，需加强检测表型、基因型做好细菌药敏试验不容易且做且珍惜常规和科研是兄弟常规输送炮弹科研推进常规,？,不当之处，请批评指正！,
